- 利用酵母双杂交研究铜绿微囊藻生物钟蛋白KaiB的自身相互作用被引量:2
- 2006年
- 从铜绿微囊藻(Microcystis aeruginosa)PCC7820中克隆了生物钟基因kaiB,并将其克隆入酵母双杂交系统的两个质粒pGADT7和pGBKT7中。经测序验证后,将重组质粒pGADT7-kaiB和pGBKT7-kaiB转化酵母菌AH109进行自激活性和自身相互作用的检测和验证。结果表明,铜绿微囊藻生物钟蛋白KaiB无自激活性,KaiB蛋白自身能发生相互作用。因此,可用KaiB蛋白为诱饵利用酵母双杂交系统筛选文库钓取与KaiB发生相互作用的蛋白。
- 郑锦乾徐虹章军王靖朱斌琳
- 关键词:酵母双杂交
- 铜绿微囊藻生物钟蛋白KaiC的自激活活性和自身相互作用研究被引量:3
- 2008年
- 通过PCR扩增了铜绿微囊藻的生物钟主控基因KaiC,并将其分别克隆到酵母双杂交系统的诱饵质粒pGBKT7和猎物质粒pGADT7中,然后将重组质粒pGBKT7-kaiC/pGADT7-kaiC和pGBKT7-kaiC/pGADT7分别共转化酵母菌AH109,经营养缺陷生长和β-半乳糖苷酶印迹检测表明,KaiC蛋白不具有毒性不会影响酵母细胞的生长,也不具有自激活活性,不会激活报告基因的表达,并且KaiC蛋白自身存在较强的相互作用。诱饵质粒pGBKT7-kaiC可用于从基因组文库中筛选KaiC的相互作用蛋白。
- 王靖徐虹李珣郑锦乾王立红
- 关键词:铜绿微囊藻酵母双杂交
- 利用酵母双杂交系统筛选铜绿微囊藻生物钟蛋白KaiC的相互作用蛋白
- 生物钟是调控生物代谢和行为的内源计时系统,它广泛存在于自然界的各种生物体内。蓝藻是目前已知的具有生物钟的最简单的生物。其生物钟核心是kai基因簇及其编码的KaiA、KaiB、KaiC蛋白。其中KaiC蛋白是蓝藻生物钟机制...
- 王靖
- 关键词:铜绿微囊藻酵母双杂交蛋白质相互作用
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