王立红 作品数:6 被引量:26 H指数:3 供职机构: 厦门大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 福建省自然科学基金 更多>> 相关领域: 生物学 理学 农业科学 环境科学与工程 更多>>
铜绿微囊藻生物钟蛋白的表达纯化与抗体制备 被引量:1 2006年 为了获得融合表达的铜绿微囊藻(Microcystic aeruginosa)生物钟蛋白KaiA、KaiB、KaiC并制备其相应的多克隆抗体,将kaiA、kaiB、kaiC基因分别克隆到原核表达质粒pET-His中.重组质粒pET-His-KaiA,pET-His-KaiB和pET-His-KaiC经酶切和测序鉴定后,分别转化E.coli BL21(DE3)进行融合表达.经SDS-PAGE分析可知,融合表达的KaiA、KaiB和KaiC蛋白表达量可分别达到菌体总蛋白的25%、40%和20%.经亲和层析后融合蛋白KaiA和KaiB的纯度分别达95%和92%,而KaiC经胶回收纯化后纯度也可达93%.将纯化后的三种Kai蛋白作为抗原分别免疫小鼠制备多克隆抗体,经ELISA检测抗体滴度表明,制备的抗KaiA、抗KaiB和抗KaiC的多克隆抗体效价高,分别可达到1:50000、1:60000和1:100000.Western blotting结果表明:获得的多克隆抗体具有较高的效价,抗体能识别相应的Kai蛋白,具有较高的特异性,能用于铜绿微囊藻生物钟蛋白KaiA、KaiB和KaiC的表达节律检测. 罗志勇 徐虹 章军 杨秀娜 王立红关键词:铜绿微囊藻 生物钟蛋白 酶联免疫吸附 免疫印迹 厦门及周边地区产10种食用菌的脂类研究 被引量:9 2003年 对厦门及周边地区产的黑木耳、鲍鱼菇、平菇、香菇、草菇、茶树菇、鸡腿菇、金针菇、蘑菇和姬松茸(子实体和菌丝体)的10种食用菌样品中的脂肪进行了测定,并采用气相色谱方法分析了样品中的脂肪酸组成及其含量.测定结果表明:这些食用菌的粗脂肪含量在1%~5%之间,其中姬松茸子实体最高(约5.4%),最低者为黑木耳(约0.7%).脂类中共有10种脂肪酸组成得到了确认,但在含量及饱和脂肪酸与不饱和脂肪酸比值上存在着较大的差别.其中又以棕榈酸、硬脂酸、油酸和亚油酸等为主要脂肪酸,其余的则明显较少.这些为从不同角度探讨对上述食用菌的利用提供了实验依据. 徐金森 沈明山 刘扬 赵卿 王立红关键词:食用菌 脂类 气相色谱法 棕榈酸 油酸 亚油酸 黄连素对结肠炎与结肠癌的作用机制研究 结肠癌是一种常见的消化系统恶性肿瘤,其发展过程非常缓慢,慢性感染和炎症反应已经成为结肠癌发生的重要危险因子。黄连素(Berberine),是从植物中提取出来的异喹啉生物碱,已被用来作为一种传统药物用于治疗细菌性腹泻和肠道... 王立红关键词:黄连素 结肠炎 结肠癌 凋亡诱导因子 表皮生长因子 黄嘌呤氧化酶电极的研制和鱼的鲜度测定 被引量:11 1990年 黄嘌呤氧化酶电极的研究报道较少,本文以牛血清白蛋白—戊二醛为交联剂,将黄嘌呤氧化酶固定在混合纤维素酯微孔膜上,自制的氧电极为基础电极,研制成黄嘌呤氧化酶电极,研究了酶膜的制备,电极的稳态响应特性和动态响应特性、以及稳定性、温度、pH 值、检出限以及回收率等,并且采用流动注射分析法和稳态法进行了测试,用 SY一1A 型氧酶测定仪可检测6.63×10^(-10)A 的电流。并且用流动注射分析法测定了鱼的鲜度,这在水产品加工和食品制造等方面有实际的应用价值。 罗颖华 王立红关键词:黄嘌呤氧化酶 电极 鲜度 柚的子叶细胞状态对其组培中分化的影响 被引量:2 1992年 以柚的子叶切块作外植体。子叶取自三类果实:第一类是刚采收的,果皮硬实;第二类是采后短期储藏的,果皮略软;第三类是采收已久,果皮软、表层皱缩。外植体先在附加2,4-D2,BA 0.5 mg/1的 MS 培养基上诱导愈伤组织,20天后转到附加 BA 2,IBA 0.2 mg/1的 MS培养基上分化培养二个月。在培养过程中,定期观察,并取样固定石蜡切片作解剖学观察。试验结果如下: 徐罕伦 王立红关键词:诱导愈伤 解剖学观察 分化培养 分生细胞 石蜡切片 铜绿微囊藻生物钟蛋白KaiC的自激活活性和自身相互作用研究 被引量:3 2008年 通过PCR扩增了铜绿微囊藻的生物钟主控基因KaiC,并将其分别克隆到酵母双杂交系统的诱饵质粒pGBKT7和猎物质粒pGADT7中,然后将重组质粒pGBKT7-kaiC/pGADT7-kaiC和pGBKT7-kaiC/pGADT7分别共转化酵母菌AH109,经营养缺陷生长和β-半乳糖苷酶印迹检测表明,KaiC蛋白不具有毒性不会影响酵母细胞的生长,也不具有自激活活性,不会激活报告基因的表达,并且KaiC蛋白自身存在较强的相互作用。诱饵质粒pGBKT7-kaiC可用于从基因组文库中筛选KaiC的相互作用蛋白。 王靖 徐虹 李珣 郑锦乾 王立红关键词:铜绿微囊藻 酵母双杂交