潘忠孝
- 作品数：2 被引量：0H指数：0
- 供职机构：华东理工大学生物工程学院生物反应器工程国家重点实验室更多>>
- 相关领域：生物学化学工程更多>>
- 土豆环氧化物水解酶基因的克隆、表达及其活性包涵体分析
- 2012年
- 目的克隆、表达土豆环氧化物水解酶基因,分析其活性包涵体。方法提取土豆总RNA,以反转录获得的cDNA为模板进行聚合酶链式反应(PCR),扩增得到土豆环氧化物水解酶基因,构建大肠杆菌表达质粒pET-P.EH,将重组表达质粒pET–P.EH转化E.coli BL21(DE3)。结果 SDS-PAGE分析表明,IPTG诱导表达的重组土豆环氧化物水解酶在各种温度下均主要以包涵体形式表达,只在15℃有微量可溶表达。酶活性分析表明,28℃表达的重组酶包涵体酶活性性为0.7 U/mg。结论初步证实了存在活性包涵体的观点。
- 李小灵贺婉红范立强程安阳王刚潘忠孝朱庆庆孟军
- 关键词：大肠杆菌
- 结核分枝杆菌RipB基因的克隆、表达及对藤黄微球菌生长的影响
- 2013年
- 提取肺结核分枝杆菌基因组DNA,PCR扩增RipB基因并将其连接到表达载体pET-21a上,重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞后,用IPTG诱导表达重组蛋白。SDSPAGE表明:重组RipB表达蛋白量约占菌体总蛋白量的40%,而其在37℃表达时主要为包涵体,在15℃表达时主要在可溶上清内;Ni柱一步亲和层析获得重组RipB;100pmol/L重组RipB可显著促进藤黄微球菌生长。
- 王刚范立强程安阳李小灵潘忠孝孟军
- 关键词：结核分枝杆菌克隆表达生物活性
