孟军
- 作品数：5 被引量：1H指数：1
- 供职机构：华东理工大学生物工程学院生物反应器工程国家重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学化学工程更多>>
- 雄激素可调节的肾脏近端肾小管上皮细胞靶向杂合启动子的优化被引量：1
- 2014年
- 为研究肾脏雄激素调节蛋白杂合启动子Kap147／HAGT-Kpn的细胞特异性，将HAGT-Kpn片段克隆到pGL3-Kap147载体质粒上，通过细胞转染和荧光素酶活性测定，证实Kap147／HAGT-Kpn杂合启动子只在肾小管上皮细胞来源的OK、LLC-MK2细胞中具有活性，经20nmol／LDHT处理后其活性增加了7～8倍。依据雄激素应答原件的保守性，将不同长度的HAGT-Kpn亚片段克隆到pGL3-Kap147载体质粒上，经20nmol／LDHT处理后，KpnI-StuI和MscI-KpnI两个片段能够使Kap147活性增强1～2倍，由此表明Kap147／HAGT-Kpn杂合启动子依然具有组织细胞特异性且受雄激素调控，KpnI-StuI和MscI-KpnI两个片段承担了雄激素的调控作用。
- 孟军刘飞范立强朱庆庆吴宝杰左丽君
- 关键词：肾脏
- Kap147/Kpn杂合启动子引导Cre重组酶在转基因小鼠睾丸组织中特异性表达
- 2019年
- 为了验证杂合启动子Kap147/Kpn的体内、外功能,构建了Kap147/Kpn引导的Cre重组酶转基因鼠。体外细胞转染和激素诱导证实Kap147/Kpn启动子具有细胞特异性,且受雄激素诱导。通过RT-PCR(Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction)和荧光定量PCR(Polymerase Chain Reaction)证实Kap147/Kpn启动子引导Cre重组酶在转基因鼠(Cre-F0-2)睾丸组织中特异表达。荧光定量PCR检测发现,Cre mRNA在转基因鼠睾丸中的表达量与小鼠年龄相关,经15 mg/(kg·d)二氢睾酮(DHT)处理后睾丸中Cre mRNA表达量增加1.7倍,经100 mg/(kg·d)醋酸环丙孕酮(CAP)处理后Cre mRNA表达量降低约50%,证实Kap147/Kpn启动子在转基因鼠体内受雄激素调控。荧光组化显示,转基因鼠Cre-F0-2与双荧光Cre重组酶报告鼠杂交后,能成功介导子代鼠睾丸组织特异性的基因敲除。杂合启动子Kap147/Kpn引导的Cre重组酶转基因鼠(Cre-F0-2)具有雄激素调节性和睾丸靶向性,是一个潜在的研究睾丸基因功能的有力工具。
- 刘飞孟军范立强
- 关键词：基因打靶睾丸
- 雄激素可诱导的Kap147/HAGT-Kpn杂合启动子的体内外研究
- 基因的表达和调控决定了生物体的生长、代谢、发育等一系列过程,基因的特异性表达决定了生物体的特异性。启动子作为直接调控基因表达的重要元件,决定了基因表达的时空特异性和组织细胞特异性。肾脏雄激素调节蛋白(kidney and...
- 孟军
- 关键词：肾脏
- 文献传递网络资源链接
- 土豆环氧化物水解酶基因的克隆、表达及其活性包涵体分析
- 2012年
- 目的克隆、表达土豆环氧化物水解酶基因,分析其活性包涵体。方法提取土豆总RNA,以反转录获得的cDNA为模板进行聚合酶链式反应(PCR),扩增得到土豆环氧化物水解酶基因,构建大肠杆菌表达质粒pET-P.EH,将重组表达质粒pET–P.EH转化E.coli BL21(DE3)。结果 SDS-PAGE分析表明,IPTG诱导表达的重组土豆环氧化物水解酶在各种温度下均主要以包涵体形式表达,只在15℃有微量可溶表达。酶活性分析表明,28℃表达的重组酶包涵体酶活性性为0.7 U/mg。结论初步证实了存在活性包涵体的观点。
- 李小灵贺婉红范立强程安阳王刚潘忠孝朱庆庆孟军
- 关键词：大肠杆菌
- 结核分枝杆菌RipB基因的克隆、表达及对藤黄微球菌生长的影响
- 2013年
- 提取肺结核分枝杆菌基因组DNA,PCR扩增RipB基因并将其连接到表达载体pET-21a上,重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞后,用IPTG诱导表达重组蛋白。SDSPAGE表明:重组RipB表达蛋白量约占菌体总蛋白量的40%,而其在37℃表达时主要为包涵体,在15℃表达时主要在可溶上清内;Ni柱一步亲和层析获得重组RipB;100pmol/L重组RipB可显著促进藤黄微球菌生长。
- 王刚范立强程安阳李小灵潘忠孝孟军
- 关键词：结核分枝杆菌克隆表达生物活性
