刘巧霞
- 作品数：3 被引量：2H指数：1
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- 蛇源裂头蚴感染小鼠空肠免疫球蛋白A抗体分泌细胞数量及分泌型免疫球蛋白A水平观察
- 2017年
- 目的 观察蛇源裂头蚴感染小鼠诱导免疫球蛋白A（IgA）抗体分泌细胞（IgASCs）数量及分泌型IgA（sIgA）抗体应答水平，了解IgASCs及sIgA在抗裂头蚴入侵中的作用。方法 选取清洁级昆明小鼠100只，雌雄各半，体重为20 ~ 25 g，按体重采用随机数字表法分为对照组和实验组，每组50只。用蛇源裂头蚴喂饲实验组小鼠，每只喂5条；对照组不感染。分别于感染后1、7、14、28、56 d从2组中各取10只小鼠进行解剖，收集空肠液和空肠段组织。采用免疫组织化学法检测空肠黏膜中IgASCs数量，酶联免疫吸附实验（ELISA）检测空肠液sIgA水平。结果 IgASCs分布于空肠黏膜的固有层中，实验组IgASCs数量（以IgASCs阳性细胞率表示）于感染后1 d达到峰值［（64.24 ± 0.60）%］，随后下降，至感染后14 d［（41.98 ± 0.42）%］低于对照组［（43.52 ± 0.94）%，t = - 4.727，P 〈 0.01］。实验组sIgA水平于感染后7 d达到峰值［（22.05 ± 1.43）mg／L］，随后呈下降趋势，于感染后56 d［（21.26 ± 2.59）mg／L］与对照组［（20.00 ± 0.42）mg／L］比较差异无统计学意义（t = 1.516，P 〉 0.05）。实验组感染后7 d，空肠黏膜IgASCs数量与空肠液sIgA水平呈正相关（r = 0.663，P 〈 0.01），而在感染后14 d，二者呈负相关（r = - 0.542，P 〈 0.05）。结论 小鼠感染蛇源裂头蚴后，可诱导IgASCs高水平的表达及sIgA水平的升高，二者在感染后7 d呈正相关。
- 刘巧霞陈艳李金福蔡倩彤
- 关键词：裂头蚴病分泌型免疫球蛋白A
- 4种试剂盒提取病理组织切片中裂头蚴DNA效果的比较被引量：1
- 2018年
- 目的筛选一种快速、简单、高效、价格合理的从病理组织切片中提取猬裂头蚴DNA的试剂盒。方法用4种不同的试剂盒提取病理组织切片(含虫白片/HE染色片)中裂头蚴DNA,通过比较所提取DNA的浓度、纯度、提取率、提取时间、提取价格及PCR产物的亮度,评价4种市售商品试剂盒提取DNA的效果。结果 4种试剂盒提取裂头蚴有虫组织白片DNA的结果:试剂盒1提取DNA的浓度、纯度及提取率最高,提取成本也最高且耗时较短;试剂盒2的提取效果与试剂盒1相近,提取成本较低且时间最短;试剂盒3的提取效果介于试剂盒2与试剂盒4之间,成本最低但时间长达26h;试剂盒4提取效果最低,PCR产物条带也最暗,提取成本较低但耗时较长。4种试剂盒提取HE染色片DNA的结果:试剂盒1与试剂盒2提取的效果相近,两者成本较高耗时较短,试剂盒3与试剂盒4的提取效果相近,两者成本低耗时长,试剂盒3与试剂盒4的提取效果均低于试剂盒1和试剂盒2的提取效果。结论 4种商品试剂盒均能满足裂头蚴感染有虫组织的DNA提取,其中试剂盒2更适用于快速提取。
- 蒙兴慧陈艳李金福胡月刘巧霞刘鉴
- 关键词：DNA提取病理组织切片
- 虫种特异性基因检测小鼠无虫病理组织裂头蚴感染的可行性研究被引量：1
- 2018年
- 目的研究用细胞色素C氧化酶1基因(cox1)及内转录间隔区1(ITS-1)特异性序列检测小鼠无虫病理组织中裂头蚴感染的可行性。方法 6~8周龄昆明小鼠20只,采用随机抽签法分为感染组(15只)和未感染组(5只),感染组小鼠经口感染蛇源裂头蚴(5条/只),未感染组不作任何处理。感染后第14天剖杀小鼠,取感染组小鼠皮下含裂头蚴肌肉组织(含虫组织)、去除裂头蚴肌肉组织(无虫组织)及未感染组小鼠相应部位肌肉,制作组织切片,苏木精-伊红染色法(HE)染色后观察。用改良的蛋白酶K消化法提取未染色肌肉组织切片的DNA,PCR扩增cox1(2对引物,对应cox1-1和cox1-2片段)和ITS-1序列。选取从感染组无虫组织DNA扩增的cox1-1进行克隆并测序,与Gen Bank中猬裂头蚴序列(KJ418421、KF990161、GQ999947)进行比对。以猪囊尾蚴感染的小鼠肌肉组织同法制作切片并提取DNA,评价cox1和ITS-1 PCR扩增的特异性。结果感染组含虫组织DNA经1次PCR即可扩增出414 bp(cox1-1)、151 bp(cox1-2)、822 bp(ITS-1)的条带。感染组无虫组织DNA第1次PCR未扩增出条带,以第1次PCR产物为模板再次PCR,扩增出相同大小的3条条带。未感染组DNA第1次和第2次PCR均未扩增出条带。序列比对结果显示,从感染组无虫组织DNA扩增的cox1-1序列与KJ418421、KF990161、GQ999947序列的同源性分别为98.2%、99.1%、99.1%。猪囊尾蚴感染组织DNA没有扩增出条带。结论以cox1和ITS-1序列为靶序列进行重复PCR,能鉴定小鼠无虫病理组织裂头蚴感染。
- 胡月陈艳李金福蒙兴慧刘巧霞刘鉴
- 关键词：裂头蚴基因检测
