董会娜
- 作品数:53 被引量:39H指数:4
- 供职机构:中国科学院天津工业生物技术研究所更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金天津市自然科学基金天津市科技支撑计划重点项目更多>>
- 相关领域:生物学轻工技术与工程农业科学化学工程更多>>
- 苜蓿中华根瘤菌代谢组学样品制备方法的研究被引量:2
- 2019年
- 代谢组样品制备是代谢组学研究的基础。本文以维生素B12生产菌株苜蓿中华根瘤菌Sinorhizobium meliloti 320为研究对象,通过检测细胞损伤、ATP泄漏、代谢物回收效率以及细胞代谢淬灭效率综合评价细胞淬灭方法,同时对5种提取试剂的提取效率进行比较优化胞内代谢物的提取方法。最终获得苜蓿中华根瘤菌S.meliloti 320的胞内代谢组学样品制备较佳条件:即-20℃40%甲醇淬灭细胞,过滤收集淬灭细胞,甲醇/乙腈/水(体积比为2∶2∶2,外加0.1%的甲酸)与50%甲醇相结合提取胞内代谢物。实验结果显示-20℃的40%甲醇(通过过滤收集细胞)对细胞膜的损伤较小,且细胞代谢淬灭效率和回收效率较高;甲醇/乙腈/水(体积比为2∶2∶2,外加0.1%的甲酸)与50%的甲醇对胞内代谢物的提取效率较高且有互补作用。
- 张田张志丹刘蛟董会娜付绍平张大伟
- 关键词:苜蓿中华根瘤菌
- 尿卟啉原Ⅲ合成酶突变体、突变基因及其在制备维生素B12中的应用
- 本发明公开一种尿卟啉原Ⅲ合成酶突变体、突变基因及在制备维生素B<Sub>12</Sub>中的应用。在苜蓿中华根瘤菌中过表达的尿卟啉原Ⅲ合成酶基因<I>hemD</I>和突变基因的基因工程菌,其生产维生素B<Sub>12<...
- 张大伟董会娜马延和
- 文献传递
- 一种响应维生素B12的生物元件及其应用
- 本发明公开了一种响应维生素B12的核糖开关元件以及基于该核糖开关元件的维生素B12生物传感器的构建及其应用,属于基因工程技术、分子检测和生物传感领域。所述生物传感器包括响应维生素B12核糖开关元件和可选择的标记物基因。利...
- 张大伟王会颖董会娜
- 一种人工合成启动子Pw及其在产维生素B12菌株中的应用
- 本发明属于基因工程技术领域,具体涉及一种人工合成启动子Pw及其在产维生素B12菌株中的应用,所述人工启动子核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。功能验证其可以广泛用于苜蓿中华根瘤菌、脱氮假单胞菌和黏着剑菌等产维生素B<...
- 张大伟王会颖董会娜刘璇丁冬芹
- 甲硫氨酸合成酶突变体、突变基因及其在制备维生素B<Sub>12</Sub>中的应用
- 本发明公开一种甲硫氨酸合成酶突变体、突变基因及其在制备维生素B<Sub>12</Sub>中的应用。在苜蓿中华根瘤菌中过表达的所述甲硫氨酸合成酶基因和突变基因的基因工程菌,其生产维生素B<Sub>12</Sub>的能力得到...
- 张大伟董会娜
- 文献传递
- 一种双组分调控系统及其在制备维生素B<Sub>12</Sub>中的应用
- 本发明公开一种双组分调控系统的突变体、突变基因及其在制备维生素B<Sub>12</Sub>中的应用。在苜蓿中华根瘤菌中过表达的双组分调控系统基因和突变基因的基因工程菌,其生产维生素B<Sub>12</Sub>的能力得到了...
- 张大伟董会娜
- 文献传递
- 木糖诱导启动子及其质粒载体和应用
- 本发明通过扩增苜蓿中华根瘤菌中的木糖诱导启动子,进行生物信息学分析和功能验证,获得可广泛用于苜蓿中华根瘤菌、运动发酵单胞菌、新月柄杆菌、脱氮假单胞菌、致瘤农杆菌、流产布鲁氏菌、荧光假单胞菌、豆科根瘤菌和跟黏着中华根瘤菌等...
- 张大伟董会娜吴香莹刘振权
- 文献传递
- 一种胞苷高产微生物菌株的高通量筛选方法
- 本发明公开了一种胞苷高产微生物菌株的高通量筛选方法。它是将单菌落接种于装有液体种子培养基的深孔板I中,摇床震荡培养,然后将深孔板I孔中的种子液对应接种到装有发酵培养基的深孔板II中,摇床震荡培养后,将深孔板离心,取上清液...
- 张大伟董会娜刘永飞李宁
- 文献传递
- 一种强启动子及其质粒载体和应用
- 本发明通过扩增黏着剑菌中的一种强启动子,进行生物信息学分析和功能验证,获得可广泛用于苜蓿中华根瘤菌、运动发酵单胞菌、新月柄杆菌、脱氮假单胞菌、致瘤农杆菌、流产布鲁氏菌、荧光假单胞菌、豆科根瘤菌和黏着剑菌等α‑变形菌门中基...
- 张大伟董会娜
- 文献传递
- 响应面法优化腺苷脱氨酶法快速检测发酵液中的腺苷含量被引量:1
- 2015年
- 通过腺苷脱氨酶(ADA)与靛酚蓝方法结合建立一种高通量快速检测腺苷的新方法。通过单因素、响应面方法优化氢氧化钠、水杨酸、亚硝基铁氰化钠和次氯酸钠的用量,并进行了验证,以最优试剂用量建立腺苷的标准曲线。确定了检测腺苷的最优试剂用量氢氧化钠25.85g/L、水杨酸68.05g/L、亚硝基铁氰化钠2.19g/L和次氯酸钠40.9m L/L,该方法线性范围为0.01~10mmol/L,加标回收率在95.5%~103.8%之间,RSD精准度在0.9%~3.3%之间。本方法与HPLC法检测发酵液中的腺苷含量结果一致。本方法可以用来快速、高通量的检测发酵液中的腺苷含量。
- 祖昕董会娜李宁张大伟孙玉梅
- 关键词:腺苷腺苷脱氨酶高通量筛选响应面