张大伟
- 作品数：190 被引量：94H指数：5
- 供职机构：中国科学院天津工业生物技术研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金天津市自然科学基金天津市科技支撑计划重点项目更多>>
- 相关领域：生物学轻工技术与工程化学工程农业科学更多>>
- 苜蓿中华根瘤菌代谢组学样品制备方法的研究被引量：2
- 2019年
- 代谢组样品制备是代谢组学研究的基础。本文以维生素B12生产菌株苜蓿中华根瘤菌Sinorhizobium meliloti 320为研究对象,通过检测细胞损伤、ATP泄漏、代谢物回收效率以及细胞代谢淬灭效率综合评价细胞淬灭方法,同时对5种提取试剂的提取效率进行比较优化胞内代谢物的提取方法。最终获得苜蓿中华根瘤菌S.meliloti 320的胞内代谢组学样品制备较佳条件:即-20℃40%甲醇淬灭细胞,过滤收集淬灭细胞,甲醇/乙腈/水(体积比为2∶2∶2,外加0.1%的甲酸)与50%甲醇相结合提取胞内代谢物。实验结果显示-20℃的40%甲醇(通过过滤收集细胞)对细胞膜的损伤较小,且细胞代谢淬灭效率和回收效率较高;甲醇/乙腈/水(体积比为2∶2∶2,外加0.1%的甲酸)与50%的甲醇对胞内代谢物的提取效率较高且有互补作用。
- 张田张志丹刘蛟董会娜付绍平张大伟
- 关键词：苜蓿中华根瘤菌
- 尿卟啉原Ⅲ合成酶突变体、突变基因及其在制备维生素B12中的应用
- 本发明公开一种尿卟啉原Ⅲ合成酶突变体、突变基因及在制备维生素B<Sub>12</Sub>中的应用。在苜蓿中华根瘤菌中过表达的尿卟啉原Ⅲ合成酶基因<I>hemD</I>和突变基因的基因工程菌，其生产维生素B<Sub>12<...
- 张大伟董会娜马延和
- 文献传递
- 新型的L-苏氨酸-诱导型启动子及其应用
- 本发明提供了一类新型的L-苏氨酸-诱导型启动子及其应用，具体的，本发明提供了新型的L-苏氨酸-诱导型启动子以及包含该启动子的构建物、载体和宿主细胞，所述启动子能被苏氨酸所诱导。本发明新型的L-苏氨酸诱导型启动子核酸分子能...
- 孙际宾李庆刚刘亚男郑平刘永飞张大伟马延和
- 文献传递
- 一种地衣芽孢杆菌溶菌酶突变体及其在虹鳟鱼保鲜中的应用
- 本发明公开了一种利用基因工程改造地衣芽孢杆菌来源的溶菌酶而得到的溶菌酶突变体，与野生型相比较，突变体的比酶活提高了0.43~1.1倍。本发明获得的地衣芽孢杆菌溶菌酶突变体具有比酶活高、制备简单的特点，并且在虹鳟鱼保鲜领域...
- 张大伟盖园明付绍平
- 大肠杆菌BL21(DE3)中定向进化突变体库构建的方法比较
- 2013年
- 定向进化的突变体库建立是定向进化是否成功的关键因素,只有建立足够大的库容才有可能筛选到合适的突变体。然而用来做定向进化的宿主菌的转化效率并不总是那么高,难以达到建库要求。而且在以常规分子克隆方法做连接转化时,耗时长,效率低等问题也影响了突变体库的建立,高效的克隆转化方法是定向进化所需求的。本文以大肠杆菌BL21(DE3)为转化宿主菌,挑选了一种新的高效的克隆转化方法,与现在实验室常规克隆转化方法进行了比较,证明了PCR多聚质粒的克隆转化方法在定向进化突变体库构建中的优势。为定向进化突变体库的构建提供了新的高效可靠的技术方法。
- 陈菲云张大伟刘森
- 关键词：定向进化
- 一种响应维生素B12的生物元件及其应用
- 本发明公开了一种响应维生素B12的核糖开关元件以及基于该核糖开关元件的维生素B12生物传感器的构建及其应用，属于基因工程技术、分子检测和生物传感领域。所述生物传感器包括响应维生素B12核糖开关元件和可选择的标记物基因。利...
- 张大伟王会颖董会娜
- 一株高产核黄素工程菌株及其应用
- 本发明公开了一种核黄素工程菌及其构建方法，其保藏编号为：CGMCC NO.16132。通过基因工程手段构建核黄素营养缺陷型菌株，随后染色体整合表达解淀粉芽孢杆菌解调的核黄素操纵子，恢复了菌株的核黄素生产能力，并通过表达载...
- 张大伟夏苗苗刘川付首颖孙宜文
- 文献传递
- 一种快速检测发酵液中苏氨酸含量的方法
- 本发明公开了一种快速检测发酵液中苏氨酸含量的方法，将样品溶液稀释后与含有NADH、PLP、乙醇脱氢酶和DTT的溶液混匀反应后，再与含有LTA的溶液反应，通过检测计算OD<Sub>340</Sub>降低速率，与标准曲线进行...
- 张大伟刘永飞李斐然姜文侠张笑然郑平
- 文献传递
- 耐高温植酸酶突变体及其编码基因和应用
- 本发明公布了一种新型耐高温植酸酶突变体及其编码基因，属于生物技术领域。通过定点突变方式改造大肠杆菌植酸酶基因，并使其在毕赤酵母菌中高效表达。本发明的突变体在高温环境中表现出更优良的性能，热稳定性更高，能够更好的适应工业生...
- 张大伟盖园明
- 文献传递
- 合成钴（II）啉酸a，c-二酰胺的大肠杆菌重组菌及其构建方法与应用
- 本发明提供了一种合成CBAD的大肠杆菌重组菌及其构建方法与应用。具体地，本发明以大肠杆菌为出发菌株，构建了包含尿卟啉原III基因模块并且内源的血红素合成基因的表达被下调的工程菌，所述工程菌可以提高HBA的前体尿卟啉原II...
- 张大伟房欢
- 文献传递
