于洪涛 作品数:23 被引量:93 H指数:5 供职机构: 长春生物制品研究所 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 农业科学 更多>>
人用狂犬病脂质体疫苗的免疫效果 被引量:5 2007年 目的对狂犬病脂质体疫苗进行免疫效果评价。方法用狂犬病脂质体疫苗和无佐剂疫苗分别免疫小鼠,以NIH法检测保护效力,RFFIT法检测中和抗体,流式细胞仪检测淋巴细胞表面标记,体外实验法检测淋巴细胞增殖能力,乳酸脱氢酶释放法检测NK细胞活性,ELISA检测试剂盒检测免疫后小鼠IL-2和IFN水平。结果狂犬病脂质体疫苗与无佐剂疫苗相比,可提高效力2—3倍,脂质体疫苗组中和抗体水平明显高于无佐剂疫苗组,两组之间差异有显著意义。狂犬病脂质体疫苗可增强细胞免疫,小鼠CD4^+/CD8^+比例、淋巴细胞增殖指数、NK细胞活性、IL-2及IFN活性与无佐剂疫苗相比,差异均有显著意义。结论狂犬病脂质体疫苗可同时增强细胞免疫和体液免疫。 郭秀侠 杨倩 刘岩 苑志刚 孟时 孙宏亮 福泉 于洪涛 盛军关键词:狂犬病毒 脂质体 细胞免疫 体液免疫 乳鼠心肌细胞的原代培养方法的改进 被引量:10 2006年 目的 对乳鼠的心肌细胞进行原代培养方法的改进.方法 参照乳鼠心肌细胞原代培养方法,并进行改进,选用Ⅱ型胶原蛋白酶及IMDM培养液进行消化和培养,减少了消化及离心时间,差速贴壁分离纯化后,加入5-溴脱氧核苷抑制成纤维细胞污染.结果 本方法培养的心肌细胞存活率为95.6%,培养2~5 d观察,视野中绝大多数为已搏动的心肌细胞和心肌细胞团,成纤维细胞无明显增殖.结论 本方法是一种较为理想的乳鼠心肌细胞原代培养方法. 陈妍 王振远 郭秀侠 于洪涛 邓英杰关键词:心肌细胞 原代培养 4种疫苗脂质体合成方法的研究 王群 白新卿 于洪涛 刘景涛 崔玉梅关键词:疫苗 脂质体 文献传递 不同毒株制备的人用狂犬病疫苗免疫原性比较 被引量:1 2002年 目的:比较3种毒株(aG、CTN、CaG)制备疫苗的免疫原性及抗狂犬病毒攻击的能力。方法:应用ELISA法测定3种毒株制备的疫苗免疫家兔、豚鼠、地鼠所获的免疫血清效价;并通过用上述的地鼠免疫血清中和3种病毒后进行小鼠的中和试验。结果:在家兔、豚鼠两组内,细胞适应株毒种制备的疫苗(CaG和CTN株)血清免疫效价明显高于豚鼠脑毒种(aG株)。细胞适应株毒种制备的疫苗免疫地鼠所获得的免疫血清中和3株病毒的能力高于豚鼠脑毒种。结论:使用细胞适应株毒种生产狂犬病疫苗较豚鼠脑毒种具有更好的免疫原性。 于洪涛 李淑兰 胡晓明 黄永诚 张莹 郭海英 荣爱红关键词:狂犬病毒 狂犬病疫苗 免疫原性 人血管抑素K1-3在毕赤酵母胞内表达的研究 2006年 目的:构建人血管抑素K1-3的重组酵母胞内表达质粒PH IL-D2/K1-3,获得重组目的蛋白。方法:从胎儿肝脏组织用RT-PCR方法扩增人血管抑素K1-3目的基因,克隆至酵母胞内表达质粒PH IL-D2中,线性化后转化到毕赤酵母GS115胞内,经PCR和Sourthern杂交筛选出阳性转化子,并用甲醇诱导表达。表达产物进行SDS-PAGE(12%)和W estern b lot检测,经赖氨酸亲和层析柱纯化后,用Lowry法测定蛋白含量,并进行生物活性测定。结果:SDS-PAGE和W estern b lot结果显示,表达蛋白质的相对分子量为30kd左右,低糖基化。Lowry法测定蛋白表达量为6.8mg/L。活性测定实验表明重组血管抑素能特异抑制人血管内皮细胞的增殖。结论:在毕赤酵母GS115胞内成功表达了人血管抑素K1-3重组蛋白。 张利芳 胡娴娴 于洪涛 吕军 王惠琴关键词:毕赤酵母GS115 吸附百白破乙肝(CHO)四联疫苗接种反应及血清学效果观察 被引量:4 2004年 目的 考察百日咳、白喉、破伤风、乙肝四联疫苗的接种反应及血清学效果。方法 选择足月分娩、母亲乙肝表面抗原阴性、身体健康的新生儿为接种对象。一期观察 6 0例 ,随机分为 3组 ,第 1组按 2、4、6月龄接种四联疫苗 ;第 2组按 3、4、5月龄接种四联疫苗 ;第 3组按 3、4、5月龄接种三联疫苗。二期观察 35 0人 ,随机分为3组 ,第 1组按 2、4、6月龄接种四联疫苗 ,118人 ;第 2组按 2、4、6月龄左臂接种乙肝疫苗 ,右臂接种三联疫苗 ,114人 ;第 3组按 0、1、6月龄接种乙肝疫苗 ,3、4、5月龄接种三联疫苗 ,118人。结果 一期观察 1组、2组和 3组体温弱反应分别为 5 0 %、10 %和 2 0 % ,无中强反应和局部反应。二期观察试验组体温弱反应为 4 2 4 % ,中反应 1 6 9% ,无强反应。局部弱反应为 0 85 % ,无中、强反应。血清学检测百日咳、白喉、破伤风、乙肝阳转率均大于 90 %。结论 吸附四联疫苗具有较好的安全性 ,采用 2、4、6月龄接种程序可有效诱导产生百日咳、白喉、破伤风。 张庶民 马霄 侯启明 侯启明 雷殿良 梁争论 马玉珍 雷殿良 魏顺远 杜恩慧 王鹏富 崔玉梅 于洪涛 裴晓春 刘志强关键词:白喉 联合疫苗 接种反应 血清学效果 人用狂犬病毒脂质体疫苗的制备及性质 被引量:3 2006年 目的制备人用狂犬病毒脂质体疫苗,并考察其制剂学及毒理学性质。方法以氢化大豆磷脂、胆固醇、十八胺为原料,采用反相蒸发法(REV)制备脂质体,加入纯化狂犬病毒抗原,以冻干重建法(DRV)制备狂犬病毒脂质体疫苗。在电镜下观察其形态,测定其包封率和体外释放率,用激光衍射粒度分析仪测定其粒径分布及平均粒径,并进行局部刺激性、过敏反应及异常毒性试验。结果所制备的狂犬病毒脂质体疫苗形态呈圆形或椭圆形,粒径分布均匀,平均粒径为12.25μm左右,包封率在60%以上。无刺激性,无异常毒性,过敏反应检测合格。结论所制备的狂犬病毒脂质体疫苗性质稳定,可作进一步研究。 郭秀侠 福泉 陈妍 徐军 夏滨 姜媛丽 胡晓明 于洪涛 盛军关键词:狂犬病毒 CpG对狂犬病疫苗免疫效果的影响 被引量:5 2004年 目的 研究寡脱氧核苷酸 (简称CpG)对狂犬病疫苗免疫效果的影响。方法 用狂犬病疫苗原液 +Al(OH) 3 、狂犬病疫苗原液 +CpG、狂犬病疫苗原液 +Al(OH) 3 +CpG 3种配伍方式分别免疫地鼠 ,同时用狂犬病疫苗原液作对照 ;免疫途径分为腹腔、皮下和肌肉 ,全程免疫结束后 2周采血 ,进行小白鼠中和试验。同时用NIH法对不同配伍的疫苗进行效力检测。结果 3种免疫途径以皮下和肌肉免疫效果较腹腔为好 ;3种配伍方式中以狂犬病疫苗原液 +Al(OH) 3+CpG的免疫效果最好 ;狂犬病疫苗原液 +CpG较狂犬病疫苗原液对照免疫效果好。 李宇辉 袁彦宝 李淑兰 张莹 代长海 胡晓明 于洪涛关键词:CPG 狂犬病疫苗 免疫效果 寡脱氧核苷酸 佐剂 免疫途径 应用ELISA法检测纯化狂犬病疫苗制备过程中的病毒回收率 被引量:6 2000年 应用ELISA和病毒毒力滴度测定两种方法对狂犬病疫苗纯化过程中各步样品进行检测 ,并应用NIH效力测定法对ELISA法测定的结果进行验证。结果显示 ,ELISA法具有灵敏度高、特异性强、重复性好、简便易行等优点 ,是一种较理想的病毒回收率测定方法。 于洪涛 胡晓明 荣爱红 郭海英 杨宇飞关键词:ELISA法 狂犬病毒 狂犬病毒地鼠肾细胞适应株的选育 被引量:4 1997年 将aG株豚鼠脑组织毒种于原代地鼠肾细胞传代适应后,优选出一株感染地鼠肾细胞增殖滴度高,稳定性好并保持原株抗原性的新的适应株,其生物学性状和免疫原性研究结果表明,将有可能取代豚鼠脑毒种,生产出更为安全、有效的狂犬病疫苗。 李淑兰 张莹 杨兵 郑淑媛 韩亮 于洪涛 于万龙 黄永成关键词:狂犬病 狂犬病毒 地鼠肾细胞 疫苗