李玉英
- 作品数:72 被引量:232H指数:10
- 供职机构:山西大学更多>>
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- 相关领域:生物学医药卫生理学农业科学更多>>
- 苦荞麦主要过敏蛋白N端基因片段的克隆及序列分析被引量:14
- 2006年
- 为了获得苦荞麦主要过敏蛋白全长基因并深入开展苦荞过敏蛋白的研究,本实验在先前获得的苦荞麦主要过敏蛋白C端(TBa)基因序列的基础上,设计不同的引物,以开花20d左右的苦荞麦果实为材料提取总RNA,并以此RNA为模板,通过RT-PCR和5'-RACE等方法,扩增,克隆获得苦荞麦主要过敏蛋白N端(命名为TBb)cDNA序列。序列分析结果表明,该序列由1005bp组成,开放阅读框为960bp,可编码一个由320个氨基酸残基组成的功能蛋白。同源性分析显示,此核苷酸序列与甜荞麦过敏性贮藏蛋白及豆球类蛋白的同源性达到90%。由此核苷酸序列推导出的氨基酸序列与甜荞麦13S贮藏蛋白有84%的同源性,与甜荞麦主要过敏蛋白有76%的同源性。苦荞麦主要过敏蛋白N端基因的获得为该蛋白的重组表达及其生物学活性等研究建立了前期基础。
- 赵小珍张政景巍李玉英王转花
- 关键词:苦荞麦克隆
- 苦荞麦黄酮对人食管癌细胞EC9706增殖的影响被引量:24
- 2010年
- 目的研究苦荞麦黄酮在体外对EC9706细胞增殖的影响。方法 MTT法观察苦荞麦黄酮对EC9706细胞的毒性,荧光染色法观察细胞核的改变,流式细胞术观察细胞周期和细胞内活性氧水平,Western blotting分析凋亡蛋白表达。结果苦荞麦黄酮明显抑制EC9706细胞的增殖,其抑制率与药物浓度和作用时间呈正相关。经DAPI染色,电镜观察细胞核,可见多个凋亡小体的形成。流式细胞仪检测发现,苦荞麦黄酮使细胞发生G2/M期周期停滞,细胞内活性氧水平明显增加,且呈浓度依赖效应。Western blotting分析表明,苦荞麦黄酮能上调细胞内的促凋亡蛋白Bax,并下调抗凋亡蛋白Bcl-2的表达量。结论苦荞麦黄酮对人食管癌细胞株EC9706增殖具有明显的抑制作用,使细胞发生周期阻滞,并能通过调节活性氧水平及改变凋亡蛋白的表达量诱导其发生凋亡。
- 闫斐艳崔晓东李玉英王转花
- 关键词:苦荞麦黄酮细胞增殖
- 重组荞麦胰蛋白酶抑制剂理化性质的研究被引量:6
- 2006年
- 荞麦胰蛋白酶抑制剂(BuckwheatTrypsinInhibitor,BTI)是存在于荞麦种子中的一种抗营养因子。本文经过原核表达及两步层析纯化得到高纯度的重组荞麦胰蛋白酶抑制剂rBTI。通过分析表明,重组荞麦胰蛋白酶抑制剂与天然荞麦胰蛋白酶抑制剂的性质类似。rBTI的相对分子质量约为11kDa,等电点约为6.2。rBTI对胰蛋白酶有较强的抑制作用,抑制摩尔比(以BApNA为底物)为1:1.5。rBTI的最适pH值为8.0,在pH3.0~8.0之间有较好的热稳定性,100℃加热120min仍保持70%的胰蛋白酶抑制活性。
- 李晨张政李玉英王转花
- 一种胰蛋白酶抑制剂及其制备方法和应用
- 本发明提供了一种胰蛋白酶抑制剂,是从黑豆中提取纯化得到,其分子量为20.3kD,PI为4.6。该抑制剂不仅具有抑制胰蛋白酶活性,而且具有几丁质酶活性。其制备方法是将黑豆种子粉碎,脱脂,使用缓冲液抽提,硫酸铵盐析后获得粗蛋...
- 李玉英王转花赵伟伟
- 文献传递
- 6-羟基山萘酚-3-氧-β-葡萄糖苷在制备抗癌药物中的应用
- 本发明涉及6-羟基山萘酚-3-氧-β-葡萄糖苷在制备抗癌药物中的应用。研究实验表明,6-羟基山萘酚-3-氧-β-葡萄糖苷不仅具有很好的抑制肝癌、胃癌等细胞增殖并诱导其凋亡的作用,而且对正常细胞毒性很小,可用于制备抗肝癌和...
- 李玉英张立伟王转花
- 文献传递
- 一种大黄素类蒽醌衍生物在制备抗肝癌药物中的应用
- 本发明提供了一种大黄素类蒽醌衍生物在制备抗肝癌药物中的应用。所述的大黄素类蒽醌衍生物,是1,4-二甲基-6,8-二甲氧基-9,10-蒽醌。这种衍生物不仅具有很好的抑制肝癌细胞增殖并诱导其凋亡的作用,而且对正常细胞毒性很小...
- 李玉英张立伟
- 文献传递
- 一种诱导DC细胞成熟的苦荞提取物、培养基及诱导方法
- 本发明公开了一种DC细胞成熟的苦荞提取物、凝集素、诱导DC细胞成熟的培养基及诱导方法。所述苦荞提取物的提取方法包括:提取苦荞种子所含蛋白质;Resource Q阴离子交换层析;和Sephadex G75凝胶过滤层析,获得...
- 白崇智王转花李玉英崔晓东
- 文献传递
- 一种富含连翘脂素的药物组合物及其应用
- 本发明公开了一种富含连翘脂素的药物组合物及其应用,属于生物医药技术领域,所述药物组合物包括连翘脂素和奥沙利铂,连翘脂素单独对结肠癌细胞株HCT116和结肠癌耐奥沙利铂细胞株HCT116/L‑OHP均有增殖抑制作用;连翘脂...
- 李玉英谢江张立伟
- 文献传递
- 苦荞凝集素的纯化及性质鉴定被引量:7
- 2015年
- 目的:从苦荞麦种子中提取、纯化苦荞凝集素,对其凝血及酶学活性等性质进行初步研究。方法:采用缓冲液抽提、硫酸铵沉淀、透析及DEAE-纤维素阴离子交换层析(DEAE fast flow,DEAE FF纯化凝集素;高碘酸希夫(periodic acid-Schiff,PAS染色鉴定其蛋白种类,硫酸-苯酚法测定糖含量;凝血实验和糖抑制实验检测其凝血活性和结合糖特异性;以对硝基苯磷酸二钠为底物,测定磷酸酯酶活性。结果:从苦荞麦种子中获得了一种具有凝血功能的蛋白质——苦荞凝集素(tartary buckwheat lectin,TBL)。纯化的TBL在十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE图谱上显示单一条带,根据SDS-PAGE计算其分子质量约为62 kD。PAS染色证明TBL为糖蛋白,糖含量为5.8%。凝血实验表明TBL对人的O型血红细胞具有特异性凝集作用,效价为15μmL对其他血型的红细胞没有凝血效应。血凝活性被D甘露糖和D-葡萄糖抑制,推测其是一种甘露糖结合凝集素。酶学性质鉴定显示,TBL具有磷酸酯酶活性,米氏常数Km=9.86×10-3 mol/L。结论:TBL可能是苦荞麦种子中的一种具有多种酶学功能的甘露糖凝集素。
- 申剑崔晓东李玉英王转花
- 关键词:苦荞凝集素糖蛋白磷酸酯酶
- 重组BTI的表达及其抗肿瘤活性研究
- 源作物,是我国传统的小杂粮作物.作为一种健康食品,荞麦受到越来越多人的青睐.先前我们从荞麦中分离、纯化获得荞麦胰蛋白酶抑制剂,并通过基因克隆获得其全长基因序列,本研究通过基因重组技术构建pExSecI-BTI-2原核表达...
- 郭慧崔晓东李玉英王转花
- 关键词:肿瘤细胞MTT