王转花
- 作品数：143 被引量：947H指数：16
- 供职机构：山西大学更多>>
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- 相关领域：生物学医药卫生农业科学轻工技术与工程更多>>
- 重组荞麦胰蛋白酶抑制剂诱导肝癌细胞H_(22)凋亡的作用及其机制被引量：7
- 2009年
- 为了研究重组荞麦胰蛋白酶抑制剂(rBTI)诱导癌细胞凋亡的作用及其机制,采用细胞培养技术,以肝癌细胞系H22为靶细胞,以不同浓度的rBTI体外处理细胞不同时间后,采用MTT检测、DNA电泳分析、细胞核形态学观察、细胞色素c检测、caspases活性检测等方法测定rBTI在体外诱导肝癌细胞H22凋亡的作用。结果显示rBTI能够在体外特异性地抑制H22细胞的生长,诱导H22细胞凋亡,随着rBTI浓度及作用时间的增加,呈现剂量和时间依赖性效应。经rBTI处理的细胞可导致细胞色素c从线粒体释放到细胞质中,并能增强caspase-3、caspase-8、caspase-9的活性。结果表明,rBTI能特异性地诱导H22细胞凋亡,其机制与caspase-3依赖性凋亡调节信号通路有关。
- 白崇智李玉英李芳张政王转花
- 关键词：荞麦胰蛋白酶抑制剂肝癌凋亡CASPASES
- 双抗夹心酶联免疫吸附法检测荞麦过敏蛋白被引量：3
- 2015年
- 提取制备荞麦过敏原蛋白（TBt）并免疫动物,分别制备鼠多克隆抗体和兔多克隆抗体,建立了双抗夹心酶联免疫吸附检测法（ELISA）用于检测食品中的荞麦过敏原。SDS-PAGE结果表明,纯化的TBt纯度达到98%以上,鼠抗血清效价为1∶6400。建立的双抗夹心ELISA法对荞麦过敏原蛋白的最低检测限为0.16μg/m L,线性范围为0.16~16μg/m L。并采用建立的双抗夹心ELISA法对市场出售的15种食品中荞麦过敏成分进行了检测。结果显示,该方法对绝大多数食品中的荞麦过敏原都有很好的特异性及灵敏性,说明该法可用于食物过敏原的诊断及食品中微量荞麦过敏成分的检测。
- 张新瑀崔晓东杨欢葛川王转花
- 关键词：荞麦多克隆抗体酶联免疫吸附法
- TBa过敏原表位区段的融合表达及免疫活性分析被引量：5
- 2006年
- 为了确定苦荞过敏原TBa(tartarybuckwheatallergen)的抗原表位及进一步了解荞麦过敏反应机制,本实验以苦荞过敏原TBacDNA序列为模板,设计引物,克隆苦荞过敏原TBa表位区段基因,分别构建TBa及两个表位区段原核表达载体,在大肠杆菌BL21(DE3)中进行表达并纯化,采用竞争ELISA对其免疫活性进行分析与比较。SDS-PAGE及WesternBlot鉴定和检测结果表明,目的蛋白在E.coliBL21(DE3)中可高效表达,其N端带有6个组氨酸标签。Ni2+-NTA琼脂糖柱亲和纯化得到了纯度较高的目的片段。ELISA实验结果显示,表达产物与荞麦食品过敏病人血清中的IgE具有特异的结合活性。本研究为揭示苦荞过敏蛋白结构与功能的关系奠定了基础。
- 蔡桂红李玉英张政王转花
- 关键词：表位免疫活性
- 利用昆虫表达系统生产芦丁水解酶并制备槲皮素的方法
- 本发明公开一种利用昆虫表达系统生产芦丁水解酶并制备槲皮素的方法。本发明利用RT‑PCR方法获得FtRHE基因，与pFastBac Dual载体进行连接，获得重组的pFastBac Dual‑FtRHE质粒，并将该质粒转化...
- 崔晓东王转花 杜程
- rBTI联合紫杉醇通过激活NFκB/p65促进MCF-7细胞凋亡
- 2014年
- rBTI、紫杉醇均有抑制肿瘤细胞增殖、促进肿瘤细胞凋亡等作用,但两者联合用药对肿瘤细胞的影响尚不明确.本文通过MTT比色法检测rBTI与紫杉醇联合作用对MCF-7细胞增殖的影响;采用流式细胞术分析,对MCF-7细胞凋亡以及ROS水平进行检测;利用qRT-PCR和Western印迹方法,检测rBTI与紫杉醇联合作用后凋亡因子表达情况.结果表明,rBTI（2.5μmol/L）与紫杉醇（0.05~0.5μmol/L）联合作用于MCF-7细胞后,能显著抑制其增殖.将rBTI与紫杉醇进行联合协同用药,诱导了MCF-7细胞凋亡及ROS的产生;同时与rBTI单独作用时相比,联合作用明显上调了p53、Bax的表达,促进了IκBα蛋白的磷酸化以及NFκB/p65的核转位;与rBTI组和紫杉醇单独作用组相比,两者联合用药明显下调了Bcl-2和CyclinD1的表达.本研究证实,rBTI联合紫杉醇通过诱导ROS的产生,激活NFκB/p65信号转导途径,协同促进MCF-7细胞的凋亡.
- 李玉英吴燕子白崇智崔晓东王转花
- 关键词：紫杉醇核转录因子MCF-7细胞活性氧凋亡
- 荞麦同工酶多态分析被引量：16
- 1998年
- 从已收集到的200份样品中，选出具有代表性的甜荞和苦荞各10份，采用聚丙烯酰胺凝胶电泳法对其中的4种酶进行了分析。结果表明，在供试的20个样品中，甜荞超氧化物歧化酶（SOD）出现3条强活性谱带，苦荞仅有1条强活性谱带。酯酶（EST）在不同样品中表现出较大差异，存在快电泳变异型、慢电泳变异型和缺失电泳型3种类型。苹果酸脱氧酶（MDH）和谷氨酸脱氧酶（GDH）种内。
- 王转花马文丽
- 关键词：荞麦同功酶SODESTMDH
- 荞麦胰蛋白酶抑制剂的原核表达及纯化被引量：5
- 2007年
- 根据文献报道的荞麦胰蛋白酶抑制剂的氨基酸序列及本研究室先前已获得的部分基因序列设计引物,经过RT-PCR扩增,获得荞麦胰蛋白酶抑制剂编码区基因全序列.将该基因克隆到原核表达载体pQE-31中,并转化至大肠杆菌M15,经IPTG诱导表达获得可溶性目的蛋白,其表达量约占菌体总蛋白的25%.该目的蛋白经Ni2+-NTA柱亲和纯化,SDS-PAGE分析显示,在大约9kD处出现明显的目的条带,与预计蛋白分子量大小一致.Western blot鉴定证实,目的蛋白N端带有6个组氨酸标签.活性测定表明,目的蛋白具有专一性的胰蛋白酶抑制剂活性,抑制活性约为77U/mg纯化蛋白.本实验为进一步研究荞麦胰蛋白酶抑制剂结构与功能的关系奠定了基础.
- 李玉英张政李晨王转花
- 关键词：荞麦胰蛋白酶抑制剂抑制活性
- 苦荞麦黄酮对人食管癌细胞EC9706增殖的影响被引量：24
- 2010年
- 目的研究苦荞麦黄酮在体外对EC9706细胞增殖的影响。方法 MTT法观察苦荞麦黄酮对EC9706细胞的毒性,荧光染色法观察细胞核的改变,流式细胞术观察细胞周期和细胞内活性氧水平,Western blotting分析凋亡蛋白表达。结果苦荞麦黄酮明显抑制EC9706细胞的增殖,其抑制率与药物浓度和作用时间呈正相关。经DAPI染色,电镜观察细胞核,可见多个凋亡小体的形成。流式细胞仪检测发现,苦荞麦黄酮使细胞发生G2/M期周期停滞,细胞内活性氧水平明显增加,且呈浓度依赖效应。Western blotting分析表明,苦荞麦黄酮能上调细胞内的促凋亡蛋白Bax,并下调抗凋亡蛋白Bcl-2的表达量。结论苦荞麦黄酮对人食管癌细胞株EC9706增殖具有明显的抑制作用,使细胞发生周期阻滞,并能通过调节活性氧水平及改变凋亡蛋白的表达量诱导其发生凋亡。
- 闫斐艳崔晓东李玉英王转花
- 关键词：苦荞麦黄酮细胞增殖
- 太原市居民自备井水质状况检测研究被引量：1
- 2010年
- 介绍了太原市整体地下水水环境现状,在此基础上对位于全市14处自备井分丰水期和枯水期进行了3次取样,并完成了40个污染物项目的检测。结果显示,只有部分地区个别项目检出超标,现阶段太原市区自备井的水质卫生基本符合国家生活饮用水水质卫生要求,其中北部水质较好,西部、南部略差,水中污染物分布有区域性差异。
- 范晓军李瑶赵秋勇王转花
- 关键词：地下水污染物水质检测
- 重组荞麦胰蛋白酶抑制剂理化性质的研究被引量：6
- 2006年
- 荞麦胰蛋白酶抑制剂(BuckwheatTrypsinInhibitor,BTI)是存在于荞麦种子中的一种抗营养因子。本文经过原核表达及两步层析纯化得到高纯度的重组荞麦胰蛋白酶抑制剂rBTI。通过分析表明,重组荞麦胰蛋白酶抑制剂与天然荞麦胰蛋白酶抑制剂的性质类似。rBTI的相对分子质量约为11kDa,等电点约为6.2。rBTI对胰蛋白酶有较强的抑制作用,抑制摩尔比(以BApNA为底物)为1:1.5。rBTI的最适pH值为8.0,在pH3.0～8.0之间有较好的热稳定性,100℃加热120min仍保持70%的胰蛋白酶抑制活性。
- 李晨张政李玉英王转花
