郭岩
- 作品数:10 被引量:32H指数:3
- 供职机构:长春生物制品研究所更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学化学工程农业科学更多>>
- 低pH孵放法对人免疫球蛋白中病毒的灭活效果及制品质量的影响被引量:2
- 2003年
- 目的 :探讨低 pH孵放法对人免疫球蛋白制品中加入的指示病毒的灭活效果及对其主要质量指标的影响 ,以完善生产工艺 ,使制品更安全有效。方法 :取经低温乙醇法制备的人免疫球蛋白原液作样品 ,分为 2组 ,分别调 pH至 4 .1±s 0 .3和6.90±0 .10 ,经除菌 ,分别按与样品体积比 1∶9的比例加入Sindbis病毒 (滴度 8.5LogTCID·mL- 1)与VSV病毒 (滴度 8.67LogTCID·mL- 1)培养液 ,孵放 (2 4 .0± 1.0 )°C ,并于 0 ,7,14,2 1d取样检测 2种指示病毒滴度 ,同时检测制品单体 +二聚体含量、HBs抗体、白喉抗体效价、制品纯度及观察制品热稳定性。结果 :经低 pH孵放法〔pH 4 .1± 0 .3,(2 4 .0±1.0 )°C〕 ,孵放 2 1d)灭活 ,VSV病毒及Sindbis病毒滴度下降均达 6.5logTCID5 0·0 .1mL- 1以上 ,且制品主要几项质量指标未见影响。结论 :低 pH孵放法对人免疫球蛋白制品病毒灭活效果好 。
- 聂荣国尹文杰杨红育陈书亮陈维金郭岩谢欣李德琦刘淑英
- 关键词:免疫球蛋白类病毒
- 应用反相HPLC法测定生物制品中苯酚含量被引量:2
- 2005年
- 目的 采用反相高效液相色谱法测定 3种生物制品中苯酚含量。方法 以C18化学键合硅胶为固定相 ,以乙腈 /水 (70∶30 ,V/V)为流动相 ,UV检测波长 2 78nm进行测定。结果 平均回收率为 98. 5 % (n =6 ) ,3种生物制品 6次独立测定的相对标准偏差分别为伤寒ViRSD =0 . 77% ,PPDRSD =1 6. 1% ,气管炎疫苗RSD =1 4. 4 % ,苯酚在 0 . 0 5~ 0 . 5mg/ml范围内 ,浓度与吸收面积呈良好的线性关系。结论 本法操作简单 ,结果准确 ,重复性好 ,可用于实际检测分析。
- 辛暨华聂荣国颜淑芹司阳乐郭岩周丽微孟东方薛海青
- 关键词:RSD生物制品反相HPLC法气管炎PPD
- 狂犬病毒融合糖蛋白DNA疫苗及免疫效果的研究被引量:2
- 2005年
- 目的:构建含两种狂犬病毒疫苗株的融合糖蛋白基因DNA疫苗并对小鼠的免疫效果进行评价.方法:用RT-PCR法分别扩增和分离出SRV9株和CTN株的狂犬病毒糖蛋白部分表位的基因(SRV9毒株的1~252氨基酸和CTN毒株253~524氨基酸),构建含融合G蛋白基因的DNA疫苗质粒VR1055-SRV9CTN.碱裂解法大量提取重组质粒并经Sepharose 4FF柱层析纯化后直接肌肉注射免疫NIH小鼠,用ELISA法和淋巴细胞转化实验分别检测质粒DNA疫苗诱导小鼠产生抗狂犬病毒的体液免疫和细胞免疫效果.CTLL-2依赖细胞株/MTT比色法进行IL-2活性测定.结果:VR1055-SRV9CTN DNA疫苗具有较好的诱生狂犬病毒抗体能力.诱导细胞免疫方面,质粒VR1055-SRV9CTN DNA疫苗和空载体对照组的ConA刺激指数存在显著性差异(t=7.201,P=0.000).小鼠血清中的IL-2活性测定表明DNA疫苗组显著高于空载体组(t=21.616,P=0.000).CVS株RV脑内攻击保护实验中,疫苗组和对照组小鼠存活率分别为63%、25%,二者间差异具有显著性(t=7.065,P=0.008).结论:含狂犬病毒糖蛋白基因VR1055-SRV9CTN DNA疫苗既能诱导体液免疫又能诱导细胞免疫,具有较好的免疫保护效果.
- 李宇辉谷丽萍崔颖杰代长海袁彦宝郭岩周明岩胡晓明王进于洪涛
- 关键词:狂犬病病毒糖蛋白DNA疫苗体液免疫
- 胸腺肽纯化工艺的改进被引量:6
- 2003年
- 目的 建立高效、快速、简便的纯化胸腺肽方法,以便提高胸腺素α1含量及活性,减少过敏反应。方法 采用 DEAE Sepharose FF、CM-Sephrose两种串联柱层析纯化。结果 纯化后的胸腺肽电泳结果出现明显的胸腺素α1带、玫瑰花结率可达33%(绝对值)以上,相对分子质量明显在3 100左右,无过敏反应。结论 建立了高效、规模化的胸腺肽纯化方法,提高了胸腺肽质量。
- 李光谱迟春萍张秀霞关晓峰王志武盛军郭岩
- 关键词:胸腺肽纯化工艺胸腺素Α1活性过敏反应
- 黄芪多糖对人用狂犬病疫苗免疫原性的影响被引量:6
- 2006年
- 目的研究黄芪多糖对狂犬病疫苗免疫应答的影响。方法将BALB/c小鼠和昆明小鼠各自随机分为2组,即试验组与对照组,分别于0、7d接种冻干人用狂犬病疫苗(Vero细胞)。对照组疫苗用灭菌注射用水稀释,试验组疫苗用10%黄芪多糖(APS)溶液稀释,每只腹腔免疫0·5ml。BALB/c小鼠于15d无菌取脾,进行淋巴细胞转化实验;昆明小鼠在免疫前和第1针免疫后4、7、14、30、45和60d眶静脉采血,分别进行外周血淋巴细胞CTL试验和小鼠中和抗体水平测定。结果试验组疫苗诱导小鼠产生的中和抗体和细胞免疫水平均高于对照组疫苗,二者差异有显著意义。结论黄芪多糖能提高狂犬病疫苗的免疫原性。
- 崔颖杰吴晓娟郭岩袁延宝代长海鲁文艳于洪涛
- 关键词:黄芪多糖狂犬病疫苗免疫原性
- HEV ORF_2重组菌菌种的稳定性及融合蛋白的应用被引量:1
- 2002年
- 对HEVORF2 (HumanHepatitisEopenreadingframe)重组菌菌种进行稳定性研究并将其表达的融合蛋白用于酶标试剂。将重组菌种传 10 0代次 ,每隔 10代取样检测蛋白表达、质粒性状、遗传稳定性、染色特性、菌落形态及电镜检查。将其表达的融合蛋白经层析纯化用于酶标试剂中。经传代的各代菌体与菌种多项指标差异不显著 ,酶标试剂有敏感度及特异性 ,此菌种可作为表达融合蛋白ORF2 组装酶标试剂而长期使用。
- 郭岩王玉梅张桂英薛海卿
- 关键词:戊型肝炎重组菌稳定性
- 狂犬病毒糖蛋白DNA疫苗的构建及免疫效果的研究
- 2005年
- 目的构建狂犬病毒糖蛋白基因DNA疫苗,并检测其免疫小鼠的免疫应答。方法用RT-PCR法扩增和分离CTN株狂犬病毒糖蛋白基因,测序后克隆入VR1055载体中,构建重组质粒VR1055-CTN,经碱裂解法提取质粒,并经Sepharose4FF柱层析纯化后免疫NIH小鼠,用ELISA法检测体液抗体,用MTT法检细胞免疫,并进行常规效力试验。结果VR1055-CTNDNA疫苗具有较好的诱导狂犬病毒抗体的能力,在诱导细胞免疫中,刺激脾淋巴细胞转化指数和小鼠血清中的IL-2活性均高于空白载体对照,差异有显著意义(P=0.000)。效力试验的小鼠存活率分别为73%和25%。结论该疫苗既能诱导体液免疫,又能诱导细胞免疫,并具有较好的免疫保护效果。
- 代长海李宇辉袁彦宝郭岩周明岩张莹胡晓明王进于洪涛
- 关键词:DNA疫苗狂犬病毒免疫效果病毒糖蛋白SEPHAROSE
- 白介素-2佐剂狂犬病疫苗的免疫学效果被引量:3
- 2007年
- 目的研究白介素-2佐剂狂犬病疫苗的免疫学效果。方法将人用纯化Vero细胞狂犬病疫苗原液与基因工程白介素-2按一定比例混合,制成白介素-2佐剂狂犬病疫苗,另将疫苗原液加氢氧化铝,制成铝佐剂狂犬病疫苗。将白介素-2佐剂疫苗、氢氧化铝佐剂疫苗和无佐剂疫苗分别于0、7d经腹腔免疫昆明小鼠,0.5ml/只,并在免疫前和免疫后4、6、10、17、2、31、45和59d,眶静脉采血,用快速免疫荧光灶抑制试验检测小鼠血清中和抗体。同时于0、7d经腹腔免疫BALB/c小鼠,0.5ml/只,第15天取脾检测淋巴细胞转化率。结果白介素-2佐剂疫苗与氢氧化铝佐剂疫苗和无佐剂疫苗淋巴细胞转化率差异均有显著意义。与铝佐剂疫苗和无佐剂疫苗相比,白介素-2佐剂疫苗诱导产生中和抗体的时间早,抗体滴度高。结论白介素-2佐剂狂犬病疫苗具有良好的免疫学效果。
- 袁彦宝郭岩代长海李宇辉张莹李光谱胡晓明于洪涛
- 关键词:狂犬病白介素-2佐剂免疫学效果
- 预防性疫苗用于治疗的研究被引量:1
- 2004年
- 预防性疫苗在治疗各种疾病过程中的作用取决于其剂量的大小 ,大剂量疫苗主要优先诱导Th2型体液免疫 ,小剂量疫苗或者利用Th1型佐剂主要优先诱导Th1型的细胞免疫 ,充分利用Th1型免疫产生的IL 2、IFN γ和TNF β等细胞因子 ,来发挥细胞免疫作用 ,清除胞内病原体。
- 李光谱郭岩史久华
- 关键词:疫苗体液免疫细胞免疫
- 应用磺基水杨酸法测定蛋白含量被引量:9
- 2001年
- 目的 建立既能排除硫柳汞的干扰,又可微量测蛋白质含量的方法。方法 采用碘基水杨酸沉淀 比浊法测定生物制品中的蛋白质含量。结果 以人血白蛋白为标准,其标准曲线的回归方程为y=252.69x- l.0013,相关系数r=0.9998。对两种制品用该法进行方法学检验,重复性试验SD分别为0.7406和0.4096,CV分别 为4.63%和2.11%。回收率分别为95.03%和105.73%。结论 该法快速简捷,结果准确,具有可行性。
- 张耀廷郭岩辛暨华周莉微曾卫郑晓丽
- 关键词:蛋白质含量