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刘淑敏: 作品数：11 被引量：47H指数：5; 供职机构：郑州市中心医院更多>>; 发文基金：河南省高等学校创新人才培养工程河南省科技攻关计划国家标准化管理委员会项目更多>>; 相关领域：医药卫生农业科学更多>>

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新型H7N9流感病毒双重荧光定量RT-PCR方法的建立及初步应用: 2019年; 目的建立特异敏感的荧光定量PCR (FQ-PCR)方法,用于新型H7N9流感病毒的快速检测。方法针对GenBank中新型H7N9流感病毒(2016年以后)的血凝素基因和神经氨酸酶基因序列的保守区域分别设计两对特异性引物和两条探针,经优化反应条件,建立一种基于TaqMan MGB探针技术的FQ-PCR方法,验证方法的敏感性、特异性和稳定性,对2017年采集的临床疑似感染样品进行检测,并与普通PCR方法进行比较分析。结果本研究成功建立的新型H7N9FQ-PCR检测方法在101～106拷贝/μl模板范围内有很好的线性关系,所得相关系数为0.999;对人工合成的H7和N9基因出现阳性扩增信号,但对鸡传染性法氏囊病病毒、鸡传染性支气管炎病毒、H1N2、H3N2、H6N2、H9N2流感病毒等病原对照未出现扩增;批内、批间试验变异系数在0.02%～0.05%;对H7和N9的最低检测模板浓度均为10拷贝/μl,比普通PCR方法的灵敏度高100倍;自30份疑似样品中检出4份阳性样品,与国家禽流感参考实验室复核结果一致。结论本研究成功建立了H7N9流感病毒双重FQ-PCR检测方法,为禽相关临床样本的新型H7N9早期检测提供了特异、敏感、快速的方法。; 刘淑敏王淑娟班付国赵明扬王东方赵雪丽谢彩华马震原刘梅芬闫若潜; 关键词：流感病毒

重组猪α干扰素-白细胞介素-2复合蛋白在猪体内抗高致病性PRRSV活性的研究被引量：5: 2013年; 为了评价猪α干扰素-白细胞介素-2重组复合蛋白(rPoIFN-α-linker-PoIL-2)在猪体内抗高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HP PRRSV)的效果,采用重组猪α干扰素(rPoIFN-α)-重组猪白细胞介素-2(rPoIL-2)等量混合物、单一rPoIFN-α蛋白、单一rPoIL-2蛋白、rPoIFN-α-linker-PoIL-2复合蛋白等以注射方式进行HP PRRSV的攻毒保护试验,通过分析试验猪体温变化、HP PRRS典型症状维持时间、死亡率、月增重率、病毒血症维持时间等指标,采用RT-PCR和间接ELISA检测攻毒后带毒及抗体产生情况,以评价这些制剂对攻毒猪的保护效果。结果显示,rPoIFN-α-linker-PoIL-2蛋白、rPoIFN-α-rPoIL-2蛋白等量混合物、rPoIFN-α蛋白均可有效抑制HP PRRSV在猪体内的增殖和持续性感染,明显降低发病猪体温,缩短HP PRRS典型症状维持时间,减缓发病症状,降低死亡率;rPoIFN-α-linker-PoIL-2蛋白对HP PRRSV的抑制作用优于单一rPoIFN-α蛋白,稍优于rPoIFN-α-rPoIL-2蛋白等量混合物,显著优于单一rPoIL-2蛋白。上述结果为进一步选取以rPoIFN-α-linker-PoIL-2复合蛋白为主要成分的猪基因工程复合抗病毒制剂研究奠定了基础。; 刘淑敏闫若潜吴志明李桂喜王东方刘梅芬安春霞赵明军; 关键词：高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒抗病毒活性

消毒供应中心的职业暴露与防护: 消毒供应中心作为医院无菌物品的供应科室,每天都要收集和处理大量临床科室的污染器械和物品。这种工作决定了消毒供应中心成为职业暴露的高危科室,工作中意外被病原体感染的血液、体液沾污或含有病原体的血液、体液污染的针头及其他锐器...; 刘淑敏; 文献传递

消毒供应中心开展优质护理服务示范工程的体会: 医院消毒供应中心是医院内承担各科室所有重复使用诊疗器械、器具和物品清洗消毒、灭菌以及无菌物品供应的部门，是院感的心脏科室。某医院从2010年1月卫生部启动全国优质护理服务工程活动，至今已在临床各科室全面展开，消毒供应中心...; 刘淑敏; 关键词：医院管理消毒供应中心服务质量

高致病性与低致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒二重RT-PCR检测方法的建立及应用被引量：8: 2013年; 为建立高致病性与低致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HP/LP-PRRSV)快速鉴别诊断方法,本研究根据GenBank已登录的HP-PRRSV与LP-PRRSV的Nsp2基因序列,分别设计了特异性的上游引物(HP-Upper-p1/LP-Upper-p2)和共用下游引物(Co-Lower-p3)。以HP-PRRSV和LP-PRRSV混合物总RNA为反转录模板,建立了HP-PRRSV和LP-PRRSV的二重RT-PCR检测方法;并进行了特异性、敏感性和重复性试验;利用所建立的检测方法对临床疑似样品进行了检测。结果显示,本试验成功建立了HP-PRRSV和LP-PRRSV二重RT-PCR检测方法,该方法灵敏度高,最低检出限均为100拷贝/μL;重复性好,特异性强,可特异性地扩增HP-PRRSV细胞培养物和LP-PRRSV疫苗毒,但对Marc-145细胞和其他8种病原对照扩增不出任何条带;自25份临床疑似PRRSV感染病料中共检测出了21份PRRSV阳性样品,其中HP-PRRSV阳性样品共计20份,LP-PRRSV阳性样品4份。结果表明,本研究成功建立了HP-PRRSV和LP-PRRSV二重RT-PCR检测方法,可适用于高致病性与低致病性猪繁殖与呼吸综合征的快速鉴别诊断。; 安春霞闫若潜吴志明赵明军赵雪丽王东方刘淑敏; 关键词：高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒

猪圆环病毒2型ORF2/猪白介素2嵌合表达质粒在猪体内诱导的保护性免疫反应被引量：9: 2014年; 为探讨猪圆环病毒2型(PCV2)ORF2/猪白介素-2(PoIL-2)嵌合重组表达质粒(rpcDNA3.1/PCV2-linker-PoIL-2)在猪体内的免疫效果和免疫保护效果进而研制高效PCV2核酸疫苗,将35只10日龄健康仔猪平均分成7组分别以rpcDNA3.1/PCV2-linker-PoIL-2重组表达质粒或PCV2ORF2基因原核表达的rCap蛋白进行免疫及免疫保护试验。共进行4次肌肉注射免疫,每次间隔2周;于第4次免疫后3周通过口腔和鼻腔途径感染PCV2细胞强毒。分别于第4次免疫后和攻毒后不同时间通过检测免疫猪血清抗体水平和外周血T淋巴细胞增殖活性、辅助性T细胞(Th)和细胞毒性T细胞(Tc)亚群的百分含量、排毒率和病毒血症阳性维持时间等指标以评价其免疫和免疫保护效果。结果表明,各免疫组猪均产生了抗PCV2特异性ELISA免疫抗体,但rCap蛋白免疫组猪抗体水平较低;rpcDNA3.1/PCV2-linker-PoIL-2质粒对猪体的免疫和免疫保护效果显著优于rpcDNA3.1/ORF2质粒;在rpcDNA3.1/PCV2-linker-PoIL-2质粒或rpcDNA3.1/ORF2质粒中添加rCap蛋白对重组质粒免疫及免疫保护效果无明显影响。因此,选取rpcDNA3.1/PCV2-linker-PoIL-2质粒为下一步研制PCV2核酸疫苗的主要成分。; 闫若潜王东方吴志明李桂喜刘淑敏刘梅芬赵明军王淑娟赵雪丽; 关键词：猪圆环病毒2型猪白细胞介素2

猪传染性胃肠炎与流行性腹泻病毒二重RT-PCR检测方法的建立及应用被引量：15: 2012年; 为建立猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)与流行性腹泻病毒(PEDV)的快速鉴别诊断方法,本研究根据GenBank已登录的TGEV核蛋白(N)基因和PEDV膜蛋白(M)基因保守区域序列分别设计了1对特异性引物,以TGEV和PEDV混合总RNA为反转录模板,建立了TGEV和PEDV的二重RT-PCR检测方法,并进行了特异性、敏感性和重复性试验;利用所建立的检测方法对临床疑似样品进行了应用检测,并对检测到的阳性样品进行克隆测序。结果表明,成功建立了TGEV和PEDV二重RT-PCR检测方法,该方法的检测灵敏度最低极限为10TCID50/mL病毒含量,重复性好,特异性强,可特异性地扩增TGEV和PEDV细胞培养物,但对ST细胞和其他7种病原对照扩增不出任何条带;对22份临床疑似TGEV和PEDV感染样品检测结果与测序结果完全一致。本研究成功建立了TGEV与PEDV二重RT-PCR检测方法,可适用于猪传染性胃肠炎和流行性腹泻病的快速鉴别诊断。; 闫若潜安春霞刘淑敏赵雪丽郭小玲赵明军吴志明; 关键词：猪传染性胃肠炎病毒猪流行性腹泻病毒

消毒供应中心职业暴露危害因素分析与防护措施: 分析医院医院消毒供应中心(CSSD)感染性职业暴露感染源及感染途径,提出相应的防护对策,以提高CSSD工作人员防护意识,减少职业暴露。; 刘淑敏郎桂若; 关键词：消毒供应中心; 文献传递

猪巨细胞病毒TaqMan荧光定量PCR检测的建立被引量：6: 2014年; 目的建立一种特异、灵敏、快速检测猪巨细胞病毒的TaqMan荧光定量PCR方法。方法根据GenBank已登录的猪巨细胞病毒(Porcine Cytomegalovirus,PCMV)DNA序列设计合成特异性引物对和TaqMan荧光探针,经优化反应条件,建立了猪巨细胞病毒的TaqMan荧光定量PCR检测方法(fluorescent quantitative real-time PCR,FQ-PCR),进行了FQPCR检测方法的敏感性、特异性和重复性试验;对疑似PCMV感染临床样品进行了应用检测,并与常规PCR方法进行了比对;对FQ-PCR检测结果为PCMV阳性猪的不同内脏器官进行病毒含量比较检测。结果成功建立了PCMV的FQ-PCR方法,标准曲线的循环阈值(Ct值)与模板浓度有良好的线性关系,相关系数为0.998;检测灵敏度可达1拷贝/μL,是常规PCR的100倍;特异性高,对pGEM-T/PCMV重组质粒扩增呈现阳性反应曲线,而对6个对照病原的扩增曲线均呈现阴性反应;对不同浓度的pGEM-T/PCMV重组质粒分别重复扩增6次,重复结果良好;对15份临床疑似PCMV感染的组织病料进行应用检测表明,其中有9份样品为阳性,与常规PCR方法检测的阳性符合率为100%。猪的内脏器管中PCMV含量最高为扁桃体,最低的为小肠。结论成功建立了PCMV FQ-PCR方法,可用于临床上PCMV感染猪的确诊和隐性感染猪的早期检测,对PCMV的快速诊断、综合防控及净化等具有重要意义。; 拜廷阳赵德明吴志明闫若潜刘淑敏赵明军刘梅芬; 关键词：实时荧光定量PCR

核苷(酸)类药物治疗慢性乙型肝炎的耐药性研究进展被引量：6: 2018年; 慢性乙型肝炎是由乙型肝炎病毒（hepatitis B virus,HBV）感染引起的,是临床上常见的传染性疾病之一。全世界范围内无症状乙型肝炎携带者人数约2.8亿,我国HBV感染现象也较为严重^（[1]）。随着抗病毒药物的广泛使用,乙型肝炎病毒耐药变异成为困扰临床医生的重大难题,病毒耐药问题已成为当今乙型肝炎治疗领域最大的挑战。在乙型肝炎治疗过程中.; 刘淑敏方先珍; 关键词：乙型肝炎耐药性

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