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邓小艺
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供职机构:
军事医学科学院微生物流行病研究所
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相关领域:
医药卫生
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合作作者
朱千政
军事医学科学院微生物流行病研究...
杨佩英
大连医科大学
朱千政
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欧武
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军事医学科学...
年份
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1998
1篇
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HCV NS3丝氨酸蛋白酶分子间及与其辅助因子NS4A分子间相互作用的研究
1998年
丙型肝炎病毒(hepatitisCvirus,HCV)非结构蛋白NS3丝氨酸蛋白酶位于NS3N端,对病毒前体蛋白的加工和病毒成熟具有重要作用。目的:用近年来发展起来的检测蛋白分子间相互作用的酵母双杂交系统,证实NS3分子间及与其辅助因子NS4A分子间存在相互作用。为进一步建立酵母三杂交系统,用以检测针对NS3的寡肽小分子对NS3丝氨酸蛋白酶活性的竞争抑制作用奠定基础;并用计算机系统分析NS3及NS4A参与分子间相互作用的可能区段,为抗HCV的寡肽小分子药物的研究提供依据。方法:用异硫氰酸胍一步法提取病毒RNA,经RT-PCR扩增NS4A基因片段。目的基因片段双酶切后定向克隆构建双杂交质粒pGPT9-NS3、pGAD424-NS3和pGBT9-NS4A,然后转化酵母双杂交系统,分别以X-gal和ONPG为底物对蛋白相互作用作定性和定量检测。蛋白疏水性和二级结构分析采用计算机软件进行。统计学处理采用t检验。结果:NS3/NS3及NS3/NS4A均出现蓝色反应,表明NS3/NS3分子间及NS3/NS4A分子间的确存在相互作用,定量分析表明前者相互作用强于后者(P<0.05)。计算机分析结果显示,NS3参与分子间相?
欧武
朱千政
朱千政
邓小艺
于曼
杨翠红
于曼
关键词:
NS3
丝氨酸蛋白酶
NS4A
相互作用
丙型肝炎病毒NS3丝氨酸蛋白酶基因的克隆和表达
1996年
丙型肝炎病毒NS3丝氨酸蛋白酶基因的克隆和表达邓小艺朱千政杨佩英军事医学科学院微生物学流行病学研究所北京100850丙型肝炎病毒(hepatitisCvirus,HCV)是输血后非甲非乙肝炎的主要病原体,约有40%~50%的丙型肝炎病人可发展成为慢性...
邓小艺
朱千政
杨佩英
关键词:
丙型肝炎病毒
丝氨酸
蛋白酶
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