王琳
- 作品数：4 被引量：2H指数：1
- 供职机构：军事医学科学院基础医学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 响应面法优化工程菌E.coli HBVA发酵培养基被引量：2
- 2013年
- 目的:对携带乙型肝炎DNA疫苗质粒pSVK-HBVA的工程菌发酵培养基进行优化。方法:采用单因素法比较不同碳源、氮源以及无机盐对发酵产量的影响;利用响应面法对各因素最佳水平及交互作用进行进一步研究。结果:单次单因子法优化结果显示,LB为最适基础培养基,最佳碳源和氮源分别是甘油和国产的眎蛋白胨;PB实验结果表明,影响质粒产量的3个主要影响因子为眎蛋白胨、甘油、NH4Cl,经过最陡爬坡和CCD优化后的发酵培养基,质粒的容积产率达到13.61 mg/L,是基础培养基LB发酵产量的2倍以上。结论:优化了工程菌E.coli HBVA的发酵培养基,提高了质粒pSVK-HBVA的产量。
- 王宇吴昊朱晓明张亮徐元基张巍杜芝燕肖毅王琳王琳李盼侯沙沙于继云
- 关键词：DNA疫苗发酵培养基优化响应面
- 基于载体pSVK的乙肝治疗性质粒DNA疫苗的发酵生产方法及其专用工程菌及高产发酵培养基
- 本发明公开了一种乙肝治疗性质粒DNA疫苗pSVK-HBV的发酵生产方法及其专用工程菌及高产发酵培养基。所述工程菌是转化有乙肝治疗性质粒DNA疫苗pSVK-HBV的大肠杆菌XL10-Gold，命名为E.coli XL10-...
- 于继云阎瑾琦王宇张巍徐元基张亮王琳朱晓明杜芝燕
- 文献传递
- 基于载体pSVK的乙肝治疗性质粒DNA疫苗的发酵生产方法及其专用工程菌及高产发酵培养基
- 本发明公开了一种乙肝治疗性质粒DNA疫苗pSVK-HBV的发酵生产方法及其专用工程菌及高产发酵培养基。所述工程菌是转化有乙肝治疗性质粒DNA疫苗pSVK-HBV的大肠杆菌XL10-Gold，命名为E.coli？XL10-...
- 于继云阎瑾琦王宇张巍徐元基张亮王琳朱晓明杜芝燕
- 文献传递
- 人G250真核表达载体pIRES-neo-G250的构建及表达
- 2013年
- 目的构建包含人的G250真核表达载体,并将该载体转导入293 T细胞检测其表达,为构建以G250为靶点的肾癌模型提供研究基础。方法通过聚合酶链反应获得G250基因,将其连接至PMD18T过渡载体,然后克隆到载体pIRES-neo中。把构建后的重组质粒pIRES-neo-G250转染到293 T细胞,用流式细胞仪、免疫荧光和RT-PCR检测其表达。结果 PCR扩增出的G250基因测序正确,酶切鉴定重组质粒pIRES-neo-G250正确,说明质粒构建成功;流式细胞术、免疫荧光和RT-PCT检测结果表明,重组质粒pIRES-neo-G250在293 T细胞中得到表达。结论该实验成功构建了重组质粒pIRES-neo-G250,并且在293T细胞中能够有效表达,为后续构建转染人G250的基因细胞株工作奠定了基础。
- 李云奇朱晓明肖毅王伟李盼王宇王琳王琳徐元基阎瑾琦张巍于继云
- 关键词：G250真核表达质粒293T细胞肾肿瘤
