于继云 作品数:185 被引量:261 H指数:7 供职机构: 军事医学科学院基础医学研究所 更多>> 发文基金: 国家高技术研究发展计划 国家自然科学基金 广西壮族自治区卫生厅重点科研课题 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 农业科学 更多>>
结核疫苗研究进展 被引量:11 2012年 卡介苗(BCG)的免疫保护作用存在争议,多重耐药结核杆菌(MDR-TB)的出现,以及艾滋病(AIDS)的流行,导致结核病(TB)的发病率呈现回升趋势,给TB防治提出了新的挑战。因此,发展新的TB疫苗成为TB防治的迫切需要。本文综述结核疫苗研究的最新进展。 吴昊 王浩 于继云关键词:卡介苗 疫苗 以hTERT为靶点的肿瘤治疗性腺病毒疫苗 本发明公开了一种以hTERT为靶点的肿瘤治疗性腺病毒疫苗。本发明是先将hTERT复合基因eTERTFcGB插入pShuttle-CMV穿梭载体中CMV启动子的下游,得到携带hTERT复合基因eTERTFcGB的重组穿梭载... 于继云 阎瑾琦 肖毅 徐元基 姜云波 张巍 王宇 刘宁 杜芝燕文献传递 4-1BBL胞外区cDNA的克隆及鉴定 2003年 目的 研究共刺激分子4-1BBL对T淋巴细胞的作用,并进一步研究肿瘤的免疫治疗。方法 按照4-1BBL的基因序列,设计合成了可扩增4-1BBL胞外区的引物序列,用RT-PCR方法从急性B淋巴白血病Raji细胞系细胞中提取总RNA,扩增出4-1BBL胞外区片段,并克隆到载体中,经酶切鉴定后再进行序列分析。结果 所克隆的目的片段经EcoRI和XhoI双酶切和序列分析证明正确。结论 已成功地钓取4-1BBL胞外区基因并克隆到pMD-18载体上。 程绍辉 于继云 陈兴 许红莲关键词:胞外区 4-1BBL CDNA 克隆 共刺激分子 T淋巴细胞 小鼠树突状细胞的体外培养与鉴定 被引量:6 2006年 目的探索、优化体外诱导和扩增小鼠树突状细胞(DC)的方法,并进行形态学观察和生物学鉴定.方法应用环磷酰胺200mg/kg经尾静脉注射Balb/c小鼠,8d后处死小鼠,常规培养脾细胞,第3日加入含有IL-4,GM-CSF细胞因子的条件培养液,第5日补加TNF-α,第8日制备标本进行相差显微镜、扫描电镜、透射电镜观察,并分别在培养第3,5,7日经流式细胞仪检测成熟细胞表面标志.结果刺激培养细胞经相差显微镜、扫描电镜、透射电镜观察,具有典型的DC形态,流式细胞仪检测发现细胞表面表达CD11c,CD86,ⅠAb,H2D6标志物.结论在小鼠脾脏细胞培养中加入IL-4,GM-CSF,TNF-α等刺激,可获得足量、较高纯度的DC,为DC的基础研究与临床应用奠定了基础. 田蓉 李巍 于继云 刘玉峰关键词:树突细胞 细胞因子 SARS病毒不同基因区抗原与SARS患者血清反应性的研究 2004年 目的 研制非典型肺炎病毒 ( SARS病毒 )不同基因区抗原 ,探讨 SARS病毒感染机体不同基因区抗体免疫应答。方法 根据目前已知 SARS病毒的基因组序列及其编码的蛋白质 ,运用计算机抗原表位预测技术 ,筛选 4种 SARS病毒主要抗原表位。合成抗原表位基因 ,克隆到表达载体 p BVIL1 ,在 E.coli中表达 S蛋白和 N-蛋白 ,E-蛋白和 M-蛋白为合成肽。结果 用 SARS病毒编码的 S( Spike)蛋白、M-蛋白、N-蛋白和 E-蛋白分别与 46份 SARS患者恢复血清反应 ,检测血清中 Ig G抗体 ,结果 S蛋白、N-蛋白、E-蛋白和 M-蛋白检出率分别为 71 .7% ( 33/4 6) ,89.1 3% ( 4 1 /4 6) ,30 .43% ( 1 4/4 6) ,5 2 .1 7% ( 2 4 /4 6)。结论 感染 SARS病毒病人血清中 S蛋白、M-蛋白、N-蛋白和 陈坤 张贺秋 王国华 宋晓国 于继云 邱艳 朱翠侠 凌世淦关键词:SARS病毒 反应性 准噶尔小胸鳖甲抗冻蛋白MpAFP698在真核细胞中的表达与鉴定 被引量:1 2011年 目的:构建真核表达质粒pEGFP-N1-mpafp698,转染人胚肾293T细胞,并表达准噶尔小胸鳖甲抗冻蛋白MpAFP698。方法:PCR扩增出mpafp698序列,将其克隆入本室保存的真核表达载体pEGFP-N1中,转染293T细胞;利用RT-PCR、流式细胞仪、免疫荧光、Western印迹检测蛋白表达。结果:构建了真核表达载体pEGFP-N1-mpafp698,在转染后24 h可检测到绿色荧光的表达,而对照组则没有检测到荧光蛋白;Western印迹结果显示表达蛋白的相对分子质量约37 000。结论:为准噶尔小胸鳖甲抗冻蛋白的细胞表达及功能研究奠定了基础。 姜敏 于继云 李晨晨 马纪关键词:准噶尔小胸鳖甲 抗冻蛋白 细胞表达 一种玻璃电极固定存放瓶 本实用新型公开了一种玻璃电极固定存放瓶,包括盖有瓶盖的瓶身,卡接环水平固定在瓶身内部,卡接环沿内径向外径方向开有卡缝,卡缝在卡接环上径向均匀分布,卡缝末端开有卡接孔。本实用新型设计的玻璃电极固定存放瓶,解决了实验室使用玻... 翁谢川 于继云 董灵芝文献传递 一次性正压通气呼吸隔离系统 王金国 赵吉生 单纯玉 王沙维 于继云 张连生 时亚明 孙晓莉 曹宏 陈灵 孙大军 本研究从加强抗击SARS人员的呼吸系统防护入手,采用正压通气、呼吸系统与工作环境中的空气隔绝的原理,利用价格低廉而又隔离效果良好的材料,制作了适合于在我国普及推广的可用于应对突发公共卫生事件中呼吸系统防护需要的装置。以清...关键词:关键词:正压通气 真核表达质粒pcDNA3.1(+)-h/mCD44v6的构建和鉴定 2009年 目的构建含人/鼠嵌合粘附分子CD44拼接变异体6(chimeric human and mouse CD44 splice variant 6,h/mCD44v6)基因真核表达质粒pcDNA3.1(+)-h/mCD44v6,并进行表达。方法通过PCR扩增h/mCD44v6的全基因cDNA,将扩增的cDNA克隆至PGM-Teasy,测序后插入pcD-NA3.1(+)真核表达质粒,构建重组真核表达质粒pcD-NA3.1(+)-h/mCD44v6,经限制内切酶酶切分析及测序鉴定后,用脂质体转染B16细胞,通过RT-PCR扩增出B16/pcDNA3.1(+)-h/mCD44v6细胞株中h/mCD44v6全段基因cDNA。结果经4轮PCR,成功扩增出h/mCD44v6的cD-NA全长基因,成功构建了真核表达质粒pcDNA3.1(+)-h/mCD44v6,通过RT-PCR方法证实该质粒能在B16真核细胞中正确表达;建立了稳定的细胞株B16/pcDNA3.1(+)-h/mCD44v6。结论成功克隆和构建了h/mCD44v6的真核表达质粒pcDNA3.1(+)-h/mCD44v6,为进一步研究h/mCD44v6的新功能和免疫治疗奠定了基础。 许铁峰 夏立平 陈兴 阎瑾琦 于继云关键词:质粒 真核表达 细胞株 克隆 PI3K在肿瘤坏死因子诱导L929细胞程序性坏死过程中的调控作用研究 被引量:2 2017年 目的探讨磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol-3-kinase,PI3K)在肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor alpha,TNFα)诱导细胞程序性坏死过程中的调控作用与机制。方法利用慢病毒介导的RNA干涉技术构建PI3K催化亚基p110α敲低、RIP1敲低及RIP1与p110α双敲低的L929细胞株,Western印迹或RT-PCR验证敲低效果。同时,利用Western印迹检测AKT和混合系激酶区域样蛋白(MLKL)磷酸化及MLKL多聚化。流式细胞术和显微拍照术检测细胞死亡。结果 PI3K和AKT抑制剂及p110α敲低都可降低AKT磷酸化水平,并阻断TNFα诱导的L929细胞程序性坏死。敲低RIP1并不抑制TNFα与Z-VAD联合诱导的L929细胞程序性坏死,但这种RIP1非依赖性细胞程序性坏死能为p110α敲低抑制。此外,p110α敲低可抑制TNFα与Z-VAD联合诱导的MLKL活化及其介导的细胞程序性坏死。结论 PI3K是调控细胞程序性坏死的重要靶点,可通过RIP1依赖及非依赖性方式激活,进而活化AKT与MLKL,启动TNFα诱导的细胞程序性坏死。 常喜喜 胡世平 王宇 王丽丽 武帅 王籽橙 杜芝燕 于继云 张毅 陈国柱关键词:磷脂酰肌醇3-激酶 肿瘤坏死因子Α 蛋白激酶B