张田甜
- 作品数：5 被引量：5H指数：1
- 供职机构：中国医学科学院基础医学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中央级公益性科研院所基本科研业务费专项更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 阿胶对慢性阻塞性肺疾病大鼠肺功能及肺组织病理损伤的影响被引量：4
- 2021年
- 目的探究阿胶(CCA)对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠肺功能及肺组织病理损伤的影响。方法将25只大鼠随机分成对照组、模型组、阿胶(低、中、高)剂量组(1、2、4 g/kg),每组5只。采用卷烟烟雾暴露法造模,烟雾浓度为(1100±10)mg/m3,每日1次,每次90 min,连续48周。造模结束次日起,每日灌胃治疗。连续治疗28 d后,用动物肺功能仪检测肺功能,HE染色观察肺组织病理。结果与对照组相比,模型组大鼠潮气量(TV)、每分钟呼气量(EV)、呼气持续时间(Te)、松弛时间(RT)、呼气末期停顿(EEP)和支气管收缩程度(Penh)显著增加(P<0.05),而呼气峰流速(PEF)、吸气峰流速(PIF)、每分钟通气量(MV)、呼出50%潮气量时呼气流速(EF50)和呼吸频率[f(B)]显著降低(P<0.05);模型组大鼠出现肺气肿和炎性病理性改变;肺组织病变加重。与模型组相比,阿胶高剂量组Te、RT、Penh显著下降(P<0.05),MV、PIF、EF50显著增加(P<0.05);肺部炎性细胞浸润减少;肺泡扩张减轻;肺大泡减少;肺气肿程度减轻;肺组织病理损伤明显缓解。结论CCA可以改善COPD大鼠肺功能、减轻肺组织炎性反应。
- 那扎开提·艾尼瓦尔胡广张田甜宋美月赵红梅靳洪涛王婧
- 关键词：阿胶慢性阻塞性肺疾病肺功能肺损伤
- 组蛋白H4第20位赖氨酸突变阻滞细胞周期
- 2018年
- 目的研究组蛋白H4第20位赖氨酸突变对细胞可能存在的影响并探究其分子机制,期望寻找作用于该位点的特异性蛋白,比如H4K20me3去甲基化酶。方法建立能够表达羧基(C)末端带Flag-HA标签的组蛋白H4及其突变体H4K20M(赖氨酸突变为蛋氨酸),H4K20A(赖氨酸突变为丙氨酸)的HeLa S3细胞系。通过病毒感染法获得能够表达目的蛋白的细胞,碘化丙啶(PI)染色后进行流式细胞(FACS)周期分析。制备单个核小体(mono nucleosome,mono-N),通过免疫共沉淀的方法得到相互作用蛋白复合物成分,银染观察蛋白组分的差异,将差异蛋白条带切割后进行质谱分析。结果在病毒感染大约72h过表达K20M的HeLa S3细胞表型异常,主要表现为细胞体积和细胞核体积明显增大,并停止生长,不再分裂。FACS结果显示过表达H4K20M的细胞被阻滞在G_2/M期,质谱结果表明在过表达K20M的细胞中RBBP4/7的表达量增高。结论组蛋白H4第20位赖氨酸突变为蛋氨酸会阻滞细胞周期,而这种阻滞很可能由RBBP4/7所引起。
- 槐焕想张田甜
- 关键词：细胞周期阻滞
- 细胞质基质中macroH2A分子伴侣的筛选
- 2016年
- 目的筛查细胞质基质中组蛋白H2A变体macroH2A的分子伴侣，借此研究macroH2A在分子伴侣的协助下进入细胞核的分子机制。方法建立在羧基末端表达融合有Flag标签的macroH2A-HCD（histone core domain）（a．a．21—161）的HeLas3稳定细胞系。大规模悬浮培养细胞并利用低渗处理膨胀细胞、匀浆、离心，分离得到细胞质基质。透析后，通过免疫共沉淀技术获得macroH2A-HCD蛋白复合物，利用质谱技术鉴定macroH2A—HCD蛋白复合物的成分，分析质谱数据筛选macroH2A分子伴侣。结果通过PCR扩增macroH2A-HCDDNA片段，并将之连人感染用载体pWPXL—C1-Flag。酶切、测序鉴定正确的pWPXL-macroH2A-HCD-Cl-Flag质粒经包装转染HEK293T产生的慢病毒，对HeLas3进行感染。通过Westernblot法及免疫荧光实验，证明稳定表达羧基末端融合Flag标签的macroH2A-HCD的HeLas3细胞系构建成功。悬浮培养后收集的细胞，经过低渗溶液处理后体积膨胀为原来体积的2倍，经匀浆、离心，匀浆液自上而下依次分为4层，分别为脂膜层、细胞质基质层、细胞器层、核层，最后获得纯净的细胞质基质。细胞质基质中加入Flag-M2珠子，经过免疫共沉淀实验得到蛋白复合物。经质谱分析后发现，复合物中含有macroH2A-HCD及多种已知的分子伴侣。结论细胞质基质中的macroH2A可能在多种分子伴侣的协助下进入细胞核。
- 林娜张田甜
- 关键词：分子伴侣免疫共沉淀
- 沉默Fcgr3降低SiO_(2)诱导的小鼠肺泡巨噬细胞系MH-S炎性因子表达被引量：1
- 2023年
- 目的探讨沉默免疫球蛋白G Fc段受体Ⅲ(FcγRⅢ)对SiO_(2)诱导的小鼠肺泡巨噬细胞系MH-S炎性因子表达的影响。方法构建Fcgr3 shRNA的慢病毒质粒;人胚肾细胞系293T培养包装产生慢病毒;慢病毒感染沉默MH-S中的FcγRⅢ,并筛选稳定感染的细胞。定量多聚酶链反应(qPCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot)检测MH-S巨噬细胞系中FcγRⅢ的mRNA和蛋白表达。将MH-S细胞分为MH-S+sh-NC、MH-S+SiO_(2)+sh-NC、MH-S+sh-Fcgr3和MH-S+SiO_(2)+sh-Fcgr3,其中SiO_(2)处理条件为100 mg/L连续刺激12 h。通过qPCR检测炎性因子转录水平,酶联免疫吸附测定(ELISA)检测细胞培养上清中的炎性因子的含量,包括肿瘤坏死因子(TNF-α)、白介素1β(IL-1β)和白介素6(IL-6)。结果包装慢病毒并感染细胞后建立稳定沉默Fcgr3的MH-S细胞系,稳定转染细胞中FcγRⅢ的转录与蛋白表达水平较对照组降低(P<0.05)。与对照组相比,SiO_(2)刺激后Tnf、Il1b和Il6的转录水平明显升高(P<0.05),沉默Fcgr3后炎症因子转录水平显著下降(P<0.05);与对照组相比,SiO_(2)刺激后TNF-α和IL-6的分泌量明显升高(P<0.05),沉默Fcgr3后炎症因子分泌水平显著下降(P<0.05)。结论沉默Fcgr3能够降低SiO_(2)诱导的肺泡巨噬细胞炎性因子的表达。
- 李晓娜齐先梅张田甜王婧
- 关键词：炎性因子
- 脂肪酸代谢重编程在肺纤维化中的研究进展
- 2024年
- 肺纤维化是一类进行性间质纤维化性肺部疾病,死亡率高。其发病机制复杂,涉及脂肪酸的代谢重编程,包括脂肪酸的从头合成、摄取、氧化以及衍生物的改变。脂肪酸代谢重编程参与调控肺泡上皮细胞的生存状态、巨噬细胞极化类型以及成纤维细胞活化情况,发挥促进或者抑制肺纤维化的作用。通过判断或干预脂肪酸代谢重编程相关过程可以有效预防、诊断和治疗肺纤维化。
- 白璐王佳新王雪曾巍宋美月张田甜王婧
- 关键词：脂肪酸肺纤维化
