宋小军
- 作品数：5 被引量：17H指数：3
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- 一种用于艰难梭菌分离培养的新型显色培养基的性能评价被引量：5
- 2019年
- 目的评价自主研发的艰难梭菌显色培养基(CDCA)性能。方法选用艰难梭菌及其他细菌的标准株进行CDCA显色的特异性评价;将艰难梭菌标准菌株梯度稀释后测定BD公司CDSA、生物梅里埃公司CDIF和CDCA的灵敏度。收集临床120份粪便样本分别采用3种培养基进行艰难梭菌分离培养,并对生长菌落进行质谱鉴定和tpi基因检测,以3种平板中任1种能培养出艰难梭菌的样本定义为真阳性。结果在CDCA平板上除了梭形梭菌、双酶梭菌、第三梭菌、脆弱拟杆菌等菌种能够少量生长并显色外,对其他实验菌种均有抑制作用。CDSA、CDIF和CDCA检测艰难梭菌的灵敏度分别为2.0×10~5 CFU/mL、8.0×10~1 CFU/mL和4.0×10~2 CFU/mL。120份标本中检出艰难梭菌31份(25.8%),CDSA、CDIF和CDCA培养阳性标本分别为25份(20.8%)、28份(23.3%)和26份(21.7%),3种显色培养基对临床腹泻标本检测阳性率差异无统计学意义(χ~2=0.418,P=0.811)。3种显色培养基的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值分别为:CDCA 83.8%、100%、100%、94.7%;CDIF 90.3%、98.9%、96.6%、96.7%;CDSA 80.6%、100%、100%、93.7%。结论本实验室研发的CDCA的特异性和灵敏度较高,可用于临床艰难梭菌的初步分离。
- 边俏罗芸许星星宋小军叶菊连蒋健敏金大智
- 关键词：艰难梭菌显色培养基性能评价
- 4种用于产毒型艰难梭菌核酸检测的粪便基因组提取试剂的性能评价被引量：1
- 2019年
- 目的对4种粪便基因组提取试剂进行比较,评价适用于艰难梭菌临床诊断的试剂盒。方法随机选取100份临床腹泻样本,分别采用QIAGEN、天根、美宁康诚和新百基4种试剂提取粪便DNA,采用本实验室研发的艰难梭菌毒素基因检测方法进行检测。结果4种提取试剂的特异度均较好(>95%),敏感度、特异度、阳性预测值和阴性预测值差异均无统计学意义(P>0.05)。而QIAGEN试剂盒的最低检测限(10^3 cfu/ml)高于其他3种试剂盒。4种试剂盒的变异系数均<5%。美宁康诚试剂盒同时操作10份标本的平均用时(30 min)远少于其他3种(F=483.18,P<0.01)。结论4种提取试剂盒均能用于艰难梭菌分子诊断的样本前处理。但美宁康诚试剂盒提取操作时间短,敏感度和特异度均符合检测要求,结果准确,较适合待检艰难梭菌的临床粪便标本的前处理。
- 杨筠叶菊连罗芸宋小军吴俊金大智
- 关键词：艰难梭菌
- 两种产毒型艰难梭菌分子诊断方法的临床应用评价被引量：1
- 2018年
- 目的通过与Xpert C．difficile/Epi检测临床粪便样本中艰难梭菌毒素基因方法的对比，系统评价实验室研发的艰难梭菌毒素基因多重荧光PCR检测方法的性能。方法2016年8月1日至12月30日采集杭州市余杭区第一人民医院和宁波市鄞州人民医院临床腹泻患者粪便样本176份，平行采用Xpert C．difficile/Epi和实验室研发的检测方法进行检测，同时进行艰难梭菌分离培养和PCR毒素鉴定。采用SPSS 20.0软件对检测结果进行交叉表分析。结果以Xpert C．difficile/Epi检测结果为标准，本实验室研发方法的敏感度为91.7%（22/24）、特异度为100%（152/152）、阳性预测值为100%（22/22）、阴性预测值为98.7%（152/154），两种方法检测结果的一致性好（Kappa＝0.950，P〈0.001）。以厌氧分离培养和PCR毒素检测结果为标准，本实验室研发方法的敏感度为90.0%（18/20）、特异度为97.0%（152/156）、阳性预测值为81.8%（18/22）、阴性预测值为98.7%（152/154）（Kappa＝0.838，P〈0.001）；Xpert C．difficile/Epi的敏感度为90.0%（18/20）、特异度为96.0%（150/156）、阳性预测值为75.0%（18/24）、阴性预测值为98.7%（150/152）（Kappa＝0.792，P〈0.001）。结论实验室研发的艰难梭菌毒素基因多重荧光PCR检测方法与Xpert C．difficile/Epi检测性能基本一致，可直接用于临床腹泻标本中产毒型艰难梭菌检测。该方法的临床应用为国内临床艰难梭菌感染病例的诊断提供一种国产化的检测方法。
- 庄国华宋小军许星星罗芸黄忱叶菊连蔡剑王丽倩许向军王贤军汪一萍金大智
- 关键词：艰难梭菌分子诊断
- 杭州市富阳区住院腹泻患者艰难梭菌感染及菌株分子特征分析被引量：6
- 2019年
- 目的了解浙江省杭州市富阳地区住院腹泻患者艰难梭菌感染情况,研究感染患者临床危险因素及分离菌株的分子特征。方法收集2017年5月至2018年2月就诊于第一人民医院的228例腹泻患者的粪便标本,通过厌氧培养进行艰难梭菌菌株分离和鉴定,进行多位点序列基因分型,以琼脂稀释法测定菌株耐药性,对患者临床资料进行统计分析。结果 228份标本共检测出产毒型艰难梭菌41株,其中31株为医院获得性腹泻;阳性患者平均年龄67.8岁,主要来自消化内科(34.1%)和肾内科(19.5%)。ST2、ST3和ST54为主要基因型。所有菌株对万古霉素、甲硝唑、四环素、哌拉西林敏感。临床资料统计分析显示,>60周岁、患基础性疾病和有抗生素用药史的阳性患者数量远高于阴性患者比例(χ2=4.229、9.022、5.767,P=0.023、0.001、0.009)。结论杭州市富阳区住院腹泻患者艰难梭菌感染患者主要来源于院内感染。患有基础性疾病、8周内有抗生素用药史的老年患者为感染的危险因素;在院内感染防控中需进一步加强监测。
- 黄有平金旭华叶菊连罗芸李珺宋小军黄忱金大智
- 关键词：艰难梭菌腹泻分子特征
- 一种艰难梭菌毒素基因检测方法的临床应用评价被引量：7
- 2017年
- 目的 通过与BD MAX试剂盒检测临床粪便标本中艰难梭菌毒素基因的比对,评价本实验室前期研发的艰难梭菌毒素基因检测方法.方法 本研究为临床应用研究.2014年7月1日至9月30日采集浙江中医药大学附属杭州市第一医院的腹泻患者粪便标本147份,分别采用BD MAX和本实验室前期研发的艰难梭菌毒素基因检测方法进行检测.BD MAX试剂盒采用自动化核酸提取和PCR检测;实验室前期研发方法通过提取粪便DNA后进行荧光定量PCR检测,最后采用SPSS10.0软件进行分析.结果 147份标本中,两方法均检出艰难梭菌毒素B基因阳性33份,阴性114份,其中有4份标本的结果不一致.以BD MAX试剂盒的结果为标准,得出本实验室前期研发的艰难梭菌毒素基因检测方法的敏感度为93.94%（31/33）,特异度为98.25%（112/114）,阳性预测值为93.94 %（31/33）和阴性预测值为98.25 %（112/114）.且上述两种方法检测结果的一致性较好（Kappa值为0.922,P〈0.01）.结论 本实验室前期研发的艰难梭菌毒素基因检测方法与BD MAX试剂盒性能相似,敏感度高、特异度强,同时该方法成本低并可直接对腹泻标本进行测定,无需配套提取仪器,更适合我国临床开展常规艰难梭菌毒素基因检测.
- 王丽倩罗芸黄忱叶菊莲宋小军金大智王贤军
- 关键词：难辨梭菌细菌毒素类分子诊断技术
