刘洋
- 作品数：26 被引量：24H指数：3
- 供职机构：石河子大学动物科技学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国际科技合作与交流专项项目新疆生产建设兵团科技支疆计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学理学更多>>
- 布鲁氏菌不同菌株间差异蛋白的研究进展
- 2016年
- 布鲁氏菌病是一种全球流行性的人兽共患病,严重威胁着人类的健康及畜牧业的发展。随着蛋白质组学研究技术的快速发展,通过不同布鲁氏菌菌株间蛋白质组学研究,分析羊种布鲁氏菌强毒株与疫苗株间的差异蛋白,牛种布鲁氏菌与羊种布鲁氏菌间的差异蛋白,猪种布鲁氏菌强毒株与疫苗株间的差异蛋白,可为探求布鲁氏菌在致病机制、毒力因子、代谢通路、诊断标志物以及新型疫苗的研制等热点研究方面提供理论依据和解决方法。通过对布鲁氏菌的蛋白质组学研究,以期在布鲁氏菌病诊断防治研究上取得重大突破。
- 豆晓霞刘洋刘升王红红李敏荆明龙陈创夫张辉
- 关键词：布鲁氏菌蛋白质组差异蛋白双向电泳质谱
- 布鲁氏菌强毒株和疫苗株的比较蛋白质组学研究
- 豆晓霞刘洋史静雪李敏荆明龙李明启王小凤陈创夫张辉
- 牛种布鲁氏菌2308参考株Δ VceC基因缺失株的构建与鉴定被引量：2
- 2017年
- 为了研究布鲁氏菌四型分泌系统VceC蛋白的功能,构建牛种布鲁氏菌2308参考株△vceC的基因突变株,本研究以牛种布鲁氏菌参考株2308的分泌蛋白VceC为研究对象,以牛种布鲁氏菌参考株基因组为模板,高保真(pfu酶)扩增VceC基因的上下游同源臂基因;以卡那抗性基因质粒为模板高保真扩增卡那抗性基因,运用融合PCR将上下游同源臂和卡那抗性基因融合,用TA克隆的方法将融合片段连接到克隆载体上,再用电转化的方法将载体转入布鲁氏菌2308感受态细胞中,最后用卡那抗性筛选并检测其遗传稳定性。将亲本株2308缺失株2308△VceC在相同起始浓度下震荡培养,观察其生长变化趋势;侵染人胚胎滋养层细胞(HPT-8),比较其在胞内的生存能力。结果显示:利用T载体克隆和抗性替换的方法成功构建了2308的VceC的突变株,与亲本株相比,2308△VceC在体外培养生长趋势与亲本株相似,在12 h时进入对数生长期,30 h时进入平台期,胞内CFU显示侵染12 h后缺失株胞内细菌数量明显下降,亲本株2308和2308-Δ VceC缺失突变株在12 h时差异显著。本研究为布鲁氏菌Ⅳ型分泌系统的功能研究奠定了基础。
- 李敏史静雪李志强荆明龙刘洋陈创夫张辉
- 关键词：布鲁氏菌同源重组
- CK4、CK14在小鼠食管上皮的表达被引量：2
- 2015年
- 为观察细胞角蛋4(CK4)和14(CK14)表达与小鼠食管上皮发育之间的关系。采用免疫组织化学观察CK4、CK14在胚胎第11天开始到胚胎第18天、小鼠出生后(生后)第1-7天、生后第2周、生后第4周以及成年小鼠食管上皮细胞的表达情况。结果显示,CK4和CK14在小鼠食管上皮均有表达,但是CK4在胚胎第15天开始表达,而CK14在胚胎第11天开始就有表达,二者表达的相同之处在于:在小鼠胚胎第16天开始表达明显,且定位明确,以后随着胚胎发育,表达逐渐增强,但在生后第7天表达最强,其中CK4主要在食管上皮基底层以上表达,而CK14在食管上皮的基底层表达,随后在生后第2周、第4周和成年的表达又逐渐降低。由此可知:CK14可以结合干细胞标记物,共同标记食管上皮干细胞。
- 刘洋裴学莲李秋霞王玉婷慕晓玲
- 关键词：食管上皮发育小鼠
- 布鲁氏菌Ⅳ型分泌系统蛋白BMEI0742基因的原核表达及功能分析
- 2018年
- 为构建布鲁氏菌Ⅳ型分泌系统蛋白BMEI0742基因的原核表达载体,并进行表达、鉴定。从羊种布鲁氏菌(Brucella melitensis)16M株的基因组中克隆BMEI0742基因片段,亚克隆到pMD19-T载体中并测序,克隆至表达载体pET-28a,构建重组质粒pET-28a-BMEI0742利用大肠杆菌进行表达,并进行Western-Blot检测,对该蛋白功能进行生物信息学分析。成功构建了pET-28a-BMEI0742原核表达载体,SDS-PAGE检测结果显示,重组蛋白的分子量约是50 ku,BMEI0742蛋白可与布鲁氏菌阳性血清发生特异性反应,表明其具有良好的反应原性。生物信息学分析显示,该蛋白无跨膜区结构,不存在信号肽,二级结构以α-螺旋为主并利用Phyre2服务器成功构建了该蛋白的三维模型。本研究成功表达了布鲁氏菌Ⅳ型分泌系统蛋白BMEI0742基因,并成功获得了BMEI0742蛋白,该蛋白具有与布鲁氏菌自身蛋白相同的抗原性,为布鲁氏菌翻译延伸因子Tu,为进一步研究其免疫性和保护性以及在布鲁氏菌的致病机制奠定基础。
- 豆晓霞刘洋李敏荆明龙李明奇王小凤陈创夫张辉
- 关键词：布鲁氏菌原核表达反应原性
- 鸡白痢沙门菌套式PCR检测方法的建立及初步应用被引量：3
- 2017年
- 为了建立一种快速、高效和简便的鸡白痢沙门菌套式PCR检测方法,根据沙门菌侵袭蛋白基因invA的高度保守区域,利用Primmer 5.0软件设计2对特异性的套式引物,以提取的沙门菌DNA为模板克隆invA基因,将其连入T载体并计算拷贝数作为套式PCR的模板,在对反应条件进行优化的基础上,建立最佳的套式PCR反应条件,确定其上、下游引物用量分别为0.3μL,套式PCR的第1次退火温度为57.4℃,第2次为53.5℃。应用该方法对已构建好的不同浓度的标准阳性质粒作为模板进行检测,其灵敏度为102拷贝数/20μL,远高于常规PCR的106拷贝数/20μL。用建立的套式PCR方法对从新疆石河子某鸡场采集的25样品进行检测,与传统的诊断方法比较符合率达95.00%。建立的鸡白痢沙门菌套式PCR检测方法具有快速、可行、特异性强、准确率高等特点,为鸡沙门菌病的早期诊断和研究提供了技术支撑。
- 刘志科李村院张秋雨刘洋马亚茹王月丽陈创夫
- 关键词：鸡白痢沙门菌套式PCR常规PCR灵敏性
- 给予生物信息平台分析miR-21靶基因参与食管癌病理过程可能的信号通路
- 2014年
- 目的:选择经试验验证的miR-21靶基因并分析其相关生物信息学过程,为深入研究miR-21在食管癌发生、发展过程中的分子机制提供了理论依据。方法:通过TarBase检索经实验证实的miR-21靶基因及靶基因验证的具体实验方法、靶向位点、调控方式、文献出处等注释信息,采用证实的基因簇,采用GO(GeneOntology)基因注释及KEGG基因信号通路富集的方法进行生物信息学分析。结果:(1)经检索目前经实验证实的miR-21靶基因数量为525个,其靶基因与多种疾病相关尤其是肿瘤。(2)miR-21的靶基因主要涉及调控核糖体、细胞骨架、基因转录、过渡金属离子结合、DNA结合、核苷酸结合、锌离子结合等生物过程,参与癌症信号通路、MAPK、信报因子受体互动、细胞周期、p53、分子粘附等信号通路。结论:miR-21的靶基因可能通过调控多个信号通路参与食管癌的发病机制,且这些信号同理可能以癌症相关信号通路为主。
- 付学博宋亚芹卢沐刘洋魏育涛
- 关键词：MIR-21食管癌生物信息学
- 布鲁氏菌胞内寄生过程中LncRNAs对细胞自噬/凋亡的影响
- 张辉刘来珍史静雪豆晓霞李敏荆明龙刘洋李明启王小凤
- 布鲁氏菌IV型分泌蛋白BMEI1747基因原核表达与免疫原性分析
- <正>由布鲁氏杆菌所引起的布鲁氏菌病是危害人畜生命健康的重大疫病。布鲁氏菌的分泌蛋白可作为布鲁氏菌病诊断性抗原和布鲁氏菌亚单位疫苗的候选靶标,布鲁氏菌的Ⅳ型分泌系统蛋白成为近年来研究的热点。本研究对羊种布鲁氏菌新疆流行株...
- 刘洋豆晓霞史静雪刘来珍张辉
- 关键词：布鲁氏菌免疫原性分析分泌蛋白原核表达
- 文献传递
- 循环miRNAs与冠心病的研究进展
- 2017年
- 冠心病（coronary atherosclerotic heart diseaseCAD）是人类导致死亡的主要因素之一。2011年世界卫生组织的资料显示我国CAD死亡人数已列居世界第二位。
- 刘蓉刘洋刘杰昕程江袁明
- 关键词：冠心病MIRNAS不稳定型心绞痛单链外周血单核细胞
