戴沛娟
- 作品数:3 被引量:2H指数:1
- 供职机构:南方医科大学更多>>
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- 氧化应激对Hsp90α、ARF1细胞内定位和相互作用的影响
- 2012年
- 目的:探讨氧化应激对热休克蛋白90α(Hsp90α)与ADP-核糖基化因子1(ARF1)细胞内定位、相互作用的影响。方法:应用500μM H2O2处理HepG2细胞,建立氧化应激模型,MTT比色法检测细胞活力,Western blotting检测Hsp90α和ARF1水平,细胞免疫荧光法、免疫共沉淀检测上述蛋白在氧化应激下的分布、共定位变化和相互作用。结果:MTT比色法结果提示,随氧化应激时间延长,细胞存活力降低;Western blotting结果显示,氧化应激可提高胞内Hsp90α和ARF1蛋白水平;免疫共沉淀结果显示,随氧化应激作用时间延长,Hsp90α与ARF1相互结合增多;细胞免疫荧光结果显示,随氧化应激作用时间延长,Hsp90α与ARF1荧光强度增强,并趋于沿胞膜分布。结论:提示氧化应激影响Hsp90α和ARF1的水平、胞内分布及相互作用。
- 马晓姣陈雪梅戴沛娟段丹萍邹飞
- 关键词:氧化应激HSP90Α
- Hsp90α抑制与HepG2细胞氧化还原状态变化及cyclinB1蓄积相关的G2/M期阻滞关系探讨
- 研究背景热休克蛋白(heat shock protein,Hsp)是在原核和真核生物中广泛存在的一类热应激蛋白,是机体受到高温、辐射、化学等刺激下合成的一种高度保守的蛋白质分子。HSP在细胞中主要起保护作用,如作为分子伴...
- 戴沛娟
- 关键词:HSP90Α氧化还原状态蛋白酶体
- 文献传递
- 人肝癌细胞氧化应激模型中热休克蛋白90α对20S蛋白酶体功能的影响被引量:2
- 2012年
- 目的观察人肝癌细胞氧化应激模型中细胞内Hsp90α和20S蛋白酶体的表达的变化以及Hsp90α表达下调后对20S蛋白酶体功能的影响;明确热休克蛋白90α对20s蛋白酶体功能的影响。方法以500μMH2O2建立氧化应激HepG2细胞模型;通过ROS探针法观察细胞在不同氧化应激条件下ROS的分布和含量,通过MTT比色法观察氧化应激对细胞存活的影响;以免疫印迹方法检测氧化应激对细胞内Hsp90α及20S蛋白酶体的合成的影响;以pSilencer2.1-U6neo载体,用电穿孔法建立稳定的Hsp90α抑制表达细胞株,通过检测糜蛋白酶活性观察氧化应激和降低Hsp90α表达对蛋白酶体活性的影响。结果氧化应激后细胞内ROS的含量增多,且分布从胞浆向胞核转移;随着作用时间延长,H2O2对HepG2细胞增殖的抑制程度增强;氧化应激导致胞内Hsp90α表达量先增加后降低,20S蛋白酶体表达量明显降低;siRNA干扰组蛋白酶体活性显著下降。结论氧化应激可影响细胞内Hsp90α和20S蛋白酶体的表达并改变其细胞内分布;氧化应激及降低Hsp90α的表达均可影响蛋白酶体的活性;Hsp90α对蛋白酶体功能维持起保护性的作用。
- 陈雪梅戴沛娟段丹萍王晓捷尹强兵马晓姣邹飞
- 关键词:氧化应激HSP90ΑSIRNA干扰