杨鹏
- 作品数：4 被引量：3H指数：1
- 供职机构：苏州大学医学部基础医学与生物科学学院免疫学系更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省“青蓝工程”基金苏州市科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 人CD13基因克隆及其基因转染细胞株的构建
- 2012年
- 目的克隆人CD13全长cDNA，构建稳定表达人CD13分子的基因转染细胞株。方法提取人外周血单个核细胞总RNA，通过RT-PCR克隆人CD13基因，将人CD13基因重组入逆转录病毒表达载体pEGZ-Term。将重组逆转录病毒载体pEGZ-Term／CD13和辅助病毒载体用脂质体法共转染包装细胞293T，收集含有完整重组逆转录病毒颗粒的293T细胞培养上清感染L929细胞，筛选获得Zeocin抗性的基因转染细胞。结果成功克隆人CD13基因和构建逆转录病毒载体pEGZ。Term／CD13，并成功获得稳定表达人CD13的基因转染细胞株L929／CD13。结论成功克隆了人CD13基因及其逆转录表达载体，成功制备了稳定表达人CD13的基因转染细胞株，为研究CD13生物学功能奠定了基础。
- 杨鹏葛彦陆婷邓云蒋林华殷丽丽居颂文居颂光
- 关键词：CD13APN基因转染细胞株
- 人CD244基因转染细胞株的构建被引量：1
- 2011年
- 目的构建稳定表达人CD244分子转基因细胞株。方法通过RT-PCR克隆人CD244基因,将人CD244基因重组入逆转录病毒表达载体pEGZ-Term。将重组逆转录病毒载体pEGZ-Term/CD244和辅助病毒载体用脂质体法共转染包装细胞293T,收集含有完整重组逆转录病毒颗粒的293T细胞培养上清感染L929细胞,筛选获得Zeocin抗性的基因转染细胞。结果成功克隆人CD244基因,并稳定表达人CD244的基因转染细胞株L929/CD244。结论本研究成功构建了稳定表达人CD244的基因转染细胞株,为研究CD244生物学功能奠定了基础。
- 袁桦葛彦杨鹏蒋林华殷丽丽张弛孙雪薇居颂文居颂光
- 关键词：基因转染细胞
- 人CD48基因转染细胞株的构建被引量：2
- 2011年
- 目的克隆人CD48基因,构建稳定表达CD48分子的基因转染细胞株。方法提取人外周血单个核细胞总RNA,通过RT-PCR克隆获得人CD48基因,将人CD48基因重组入逆转录病毒载体pEGZ-term,通过293T细胞的包装获得具有感染力的完整重组病毒载体,进而感染L929细胞,构建稳定表达人CD48分子的基因转染细胞株。结果成功克隆人CD48基因和构建PGEZ/CD48逆转录病毒表达载体,进而成功获得稳定表达人CD48的基因转染细胞株L/CD48。结论成功克隆了人CD48基因及其逆转录表达载体,并构建了稳定表达CD48分子的基因转染细胞株,为探讨CD48生物学功能的研究奠定了物质基础。
- 田辛辛葛彦袁桦蔡文治杨鹏蒋林华殷丽丽张弛孙雪薇居颂文居颂光
- 关键词：基因转染细胞株
- miR-570对胃癌细胞B7-H1蛋白表达的抑制作用
- 2012年
- B7-H1是一种重要的负性共刺激分子,在肿瘤免疫逃逸中发挥重要作用,而微小RNA具有直接的转录后调控作用。本文研究miR-570对B7-H1表达的调控作用。首先将miR-570及其抑制剂anti-miR-570分别转染B7-H1表达阳性的人胃癌细胞SGC-7901和B7-H1表达阴性的人乳腺癌细胞MDA-MB-435,以流式细胞术检测B7-H1分子表达情况;然后构建pcDNA/B7-H1表达质粒与miR-570共转染CHO细胞,以流式细胞术检测CHO细胞上B7-H1分子的表达情况;最后分别构建含B7-H1基因3-UTR片段和含miR-570作用靶点序列的荧光素酶表达载体与miR-570共转染CHO细胞,用双荧光素酶报告系统检测荧光素酶活性。结果显示miR-570能显著抑制SGC-7901细胞和B7-H1基因转染细胞膜上B7-H1蛋白的表达,并能显著抑制荧光素酶表达载体表达的荧光素酶蛋白,而且anti-miR-570能上调MDA-MB-435细胞上B7-H1表达。本研究证明miR-570能显著抑制B7-H1蛋白表达,为通过抑制B7-H1信号通路以增强机体抗肿瘤免疫力的治疗途径奠定了基础。
- 杨鹏朱健洁孙静李锐汪维鹏张学光
- 关键词：重组质粒
