蒋林华
- 作品数：5 被引量：6H指数：2
- 供职机构：苏州大学医学部基础医学与生物科学学院免疫学系更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省“青蓝工程”基金苏州市科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 人CD13基因克隆及其基因转染细胞株的构建
- 2012年
- 目的克隆人CD13全长cDNA，构建稳定表达人CD13分子的基因转染细胞株。方法提取人外周血单个核细胞总RNA，通过RT-PCR克隆人CD13基因，将人CD13基因重组入逆转录病毒表达载体pEGZ-Term。将重组逆转录病毒载体pEGZ-Term／CD13和辅助病毒载体用脂质体法共转染包装细胞293T，收集含有完整重组逆转录病毒颗粒的293T细胞培养上清感染L929细胞，筛选获得Zeocin抗性的基因转染细胞。结果成功克隆人CD13基因和构建逆转录病毒载体pEGZ。Term／CD13，并成功获得稳定表达人CD13的基因转染细胞株L929／CD13。结论成功克隆了人CD13基因及其逆转录表达载体，成功制备了稳定表达人CD13的基因转染细胞株，为研究CD13生物学功能奠定了基础。
- 杨鹏葛彦陆婷邓云蒋林华殷丽丽居颂文居颂光
- 关键词：CD13APN基因转染细胞株
- Bestatin下调卵巢癌患者外周血Treg细胞的免疫抑制作用
- 2009年
- 目的探讨氨肽酶N抑制剂Bestatin对肿瘤患者外周血CD4^＋CD25^＋Treg的生物学效应及机理。方法将Bestatin加入PHA刺激新鲜分离的卵巢癌患者外周血Treg细胞的体外培养体系，采用流式细胞术分析Foxp3和CTLA-4的表达。进而分析Bestatin对Treg细胞抑制CD4^＋CD25T细胞活化增殖的影响。结果Bestatin可抑制Treg胞表达Foxp3和CTLA-4，并促进Treg细胞和CD4^＋CD25^＋T细胞的体外共培养体系中T细胞的增殖。结论抑制氨肽酶N可下调Treg细胞的免疫抑制作用，对肿瘤治疗具有潜在应用价值。
- 陆恬葛彦居颂文蒋林华张弛孙雪薇居颂光
- 关键词：氨肽酶NCD13BESTATINTREG
- CD137信号下调乳腺癌患者外周血Treg细胞的免疫抑制功能被引量：3
- 2009年
- 目的探讨CD137信号对CD4^+CD25^+调节性T细胞(Treg)的生物学效应及机制。方法采用激发型抗人CD137单抗加入PHA刺激的乳腺癌患者外周血T细胞培养体系及Treg细胞培养体系中,利用细胞计数及~3H-TdR掺入法分析T细胞的增殖,流式细胞术分析细胞膜分子和Foxp3表达,ELISA分析细胞因子的分泌。结果CD137分子表达于乳腺癌患者外周血CD4^+CD25^+Treg细胞膜;抗人CD137单抗加入PHA活化的乳腺癌患者T细胞培养体系后,T细胞增殖明显增加,Foxp3^+Treg细胞比例明显下降;激发CD137信号可下调CD4^+CD25^+Treg细胞的Foxp3表达,抑制Treg细胞产生TGF-β1和IL-10,以及下调Treg细胞对PHA刺激的CD4^+CD25^-T细胞增殖的抑制效应。结论CD137信号可抑制Treg细胞的免疫抑制功能,CD137可能是对Treg细胞进行免疫干预的重要靶点。
- 陆恬蒋林华张弛孙雪薇居颂光
- 关键词：CD137CD4^+CD25^+调节性T细胞乳腺癌
- 人CD244基因转染细胞株的构建被引量：1
- 2011年
- 目的构建稳定表达人CD244分子转基因细胞株。方法通过RT-PCR克隆人CD244基因,将人CD244基因重组入逆转录病毒表达载体pEGZ-Term。将重组逆转录病毒载体pEGZ-Term/CD244和辅助病毒载体用脂质体法共转染包装细胞293T,收集含有完整重组逆转录病毒颗粒的293T细胞培养上清感染L929细胞,筛选获得Zeocin抗性的基因转染细胞。结果成功克隆人CD244基因,并稳定表达人CD244的基因转染细胞株L929/CD244。结论本研究成功构建了稳定表达人CD244的基因转染细胞株,为研究CD244生物学功能奠定了基础。
- 袁桦葛彦杨鹏蒋林华殷丽丽张弛孙雪薇居颂文居颂光
- 关键词：基因转染细胞
- 人CD48基因转染细胞株的构建被引量：2
- 2011年
- 目的克隆人CD48基因,构建稳定表达CD48分子的基因转染细胞株。方法提取人外周血单个核细胞总RNA,通过RT-PCR克隆获得人CD48基因,将人CD48基因重组入逆转录病毒载体pEGZ-term,通过293T细胞的包装获得具有感染力的完整重组病毒载体,进而感染L929细胞,构建稳定表达人CD48分子的基因转染细胞株。结果成功克隆人CD48基因和构建PGEZ/CD48逆转录病毒表达载体,进而成功获得稳定表达人CD48的基因转染细胞株L/CD48。结论成功克隆了人CD48基因及其逆转录表达载体,并构建了稳定表达CD48分子的基因转染细胞株,为探讨CD48生物学功能的研究奠定了物质基础。
- 田辛辛葛彦袁桦蔡文治杨鹏蒋林华殷丽丽张弛孙雪薇居颂文居颂光
- 关键词：基因转染细胞株
