张博伟
- 作品数:1 被引量:1H指数:1
- 供职机构:西北农林科技大学动物科技学院更多>>
- 相关领域:生物学农业科学更多>>
- ω-3脂肪酸脱氢酶基因Fat-1的真核表达载体构建与表达被引量:1
- 2011年
- 培养线虫(Caenorhabditis elegans),提取RNA并通过PT-PCR获得其ω-3脂肪酸脱氢酶基因Fat-1,整合入真核表达载体,构建了哺乳动物细胞表达载体pFat-IRES2-GFP,转染牛胎儿成纤维细胞系并对其进行G418筛选获得稳定转染细胞株。对稳定转染Fat-1细胞株的RT-PCR分析及脂肪酸组成的HPLC分析结果表明,Fat-1基因已经整合入牛基因组中,并能够表达和发挥其ω-3脂肪酸脱氢酶的作用,促使-ω6PUFAs转变为相应的-ω3 PUFAs。ω-6脂肪酸总量从35.60%下降到25.47%,-ω3 PUFAs总量从5.75%上升到12.33%,多不饱和脂肪酸的比值从正常细胞中的6.19下降到阳性细胞中的2.07,说明Fat-1基因整合是成功的,能够在细胞中以相应的-ω6 PUFAs为底物合成-ω3 PUFAs。
- 战丽萍刘军郑聪颖张博伟张涌
- 关键词:不饱和脂肪酸真核表达载体牛胎儿成纤维细胞