郑聪颖
- 作品数:4 被引量:9H指数:2
- 供职机构:西北农林科技大学动物科技学院更多>>
- 发文基金:国家科技重大专项更多>>
- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- 山羊胎儿成纤维细胞的培养鉴定及其转基因核移植效率的研究
- 实验一:本实验主要利用了SRY-PCR技术对四株奶山羊胎儿成纤维细胞系进行了性别鉴定,并检测了细胞周期抑制剂roscovitine,DMSO对山羊供体细胞的同期化作用,以确定它们是否可用于山羊供体细胞的同期化处理。SRY...
- 郑聪颖
- 关键词:性别鉴定细胞周期核移植
- 文献传递
- 序贯培养液G1/G2对山羊核移植胚胎发育和质量的影响被引量:2
- 2011年
- 为了优化山羊核移植胚胎体外培养体系,提高核移植效率,本研究检测了山羊体细胞核移植(SCNT)胚胎在序贯培养液G1/G2中的发育率和囊胚细胞凋亡,以及核移植胚胎移植后的妊娠率,以传统mSOF-FBS培养液作为对照组,评估序贯培养液G1/G2支持山羊核移植胚胎的发育能力。结果显示,与对照组相比,G1/G2组的囊胚发育率差异不显著((27.7±3.1)%vs(25.3±1.0)%,P>0.05),囊胚细胞数和囊胚细胞凋亡率显著降低(分别为(93.2±4.5)vs(109.1±6.2)和(4.9±0.2)%vs(11.3±0.1)%,P<0.05),但移植后的妊娠率显著增高(21.4%vs 8.0%,P<0.05)。结果表明,与传统的培养液mSOF-FBS相比,序贯培养液G1/G2能更好地支持山羊核移植胚胎的发育。
- 刘军郑聪颖李长雷杜珊李亮亮马保华张涌
- 关键词:山羊胚胎培养体细胞核移植
- ω-3脂肪酸脱氢酶基因Fat-1的真核表达载体构建与表达被引量:1
- 2011年
- 培养线虫(Caenorhabditis elegans),提取RNA并通过PT-PCR获得其ω-3脂肪酸脱氢酶基因Fat-1,整合入真核表达载体,构建了哺乳动物细胞表达载体pFat-IRES2-GFP,转染牛胎儿成纤维细胞系并对其进行G418筛选获得稳定转染细胞株。对稳定转染Fat-1细胞株的RT-PCR分析及脂肪酸组成的HPLC分析结果表明,Fat-1基因已经整合入牛基因组中,并能够表达和发挥其ω-3脂肪酸脱氢酶的作用,促使-ω6PUFAs转变为相应的-ω3 PUFAs。ω-6脂肪酸总量从35.60%下降到25.47%,-ω3 PUFAs总量从5.75%上升到12.33%,多不饱和脂肪酸的比值从正常细胞中的6.19下降到阳性细胞中的2.07,说明Fat-1基因整合是成功的,能够在细胞中以相应的-ω6 PUFAs为底物合成-ω3 PUFAs。
- 战丽萍刘军郑聪颖张博伟张涌
- 关键词:不饱和脂肪酸真核表达载体牛胎儿成纤维细胞
- 山羊克隆胎儿不同组织中H19基因CpG岛甲基化模式及表达量检测被引量:5
- 2010年
- 表观重编程异常是核移植胚胎发育异常的重要原因。为了研究克隆山羊胎儿不同组织中H19基因CpG岛甲基化水平和相对表达量,本实验运用亚硫酸盐法和荧光实时定量PCR法分别检测了死亡克隆山羊胎儿和同期普通山羊胎儿(对照组)肝脏、胎盘、肾脏、肺脏和心脏组织中H19基因CpG岛甲基化水平和mRNA的相对表达量。结果表明,克隆山羊胎儿胎盘组织中H19基因第5个CpG岛的甲基化水平显著高于对照组(70%vs49.41%,P<0.05),H19基因相对表达量显著低于对照组(883.3vs1264.5,P<0.05);肺脏组织甲基化水平显著低于对照组(63.53%vs88.24%,P<0.05),相对表达量显著高于对照组(1003.4vs515.5,P<0.05);其他各组差异不显著(P>0.05)。结果说明,H19基因在克隆山羊胎儿部分组织中DNA甲基化重编程异常,而且这种异常影响H19基因的正常表达,这也可能是导致克隆动物死亡的重要因素之一。
- 李长雷郑聪颖刘军兰杰李文哲张涌
- 关键词:克隆山羊CPG岛MRNA表达