林云雄
- 作品数：3 被引量：6H指数：2
- 供职机构：华南农业大学兽医学院更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 猪乳铁蛋白N叶(PLF-N)在毕赤酵母中的表达及抑菌活性鉴定被引量：2
- 2011年
- 根据猪乳铁蛋白N叶(PLF-N)的蛋白序列和毕赤酵母(Pichia pastoris)密码子的偏嗜性,通过全基因合成法合成改造后的PLF-N基因片段,将其克隆到pGAPZα-A质粒中构建分泌型重组酵母表达载体pGAPZα-A-PLF。pGAPZα-A-PLF通过限制性内切酶AvrⅡ酶切线性化后,经电穿孔法转入毕赤酵母细胞SMD1168内。PCR检测结果发现,PLF-N基因与毕赤酵母染色体稳定结合,Zeocin抗性筛选,得到高拷贝转化子。在GAP启动子调控下,PLF-N重组蛋白获得分泌表达,其分子质量约为38ku,上清表达量约为364μg/mL。琼脂糖孔穴扩散法检测结果显示,该表达产物对革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌均具有较好的抑菌活性,且对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌最小抑菌浓度(MIC)分别为12.5、25.0μg/mL。
- 何俊刘德辉林云雄张春红黄毓茂
- 关键词：毕赤酵母分泌表达抑菌活性
- 环状抗菌肽cyclopsychotride在毕赤酵母X-33中的表达及其活性鉴定被引量：3
- 2011年
- 为提高重组外源蛋白在毕赤酵母中的高效表达,试验采用毕赤酵母(Pichia pastoris)偏嗜性密码子改变抗菌肽cyclopsychotride的碱基序列,通过SOEing法合成后连接到pPICZα-C质粒上,从而获得分泌型重组酵母表达载体pPICZα-C-cyclopsychotride,再通过限制性内切酶BlnⅠ线性化,经电穿孔法转入毕赤酵母细胞X-33中。结果表明:经PCR检测后及Zeocin抗性筛选,获得高拷贝转化子;通过琼脂孔穴扩散法检测,酵母表达上清液对革兰阳性菌和革兰阴性菌有抑菌活性;抗菌肽cy-clopsychotride经沸水、酸碱及胃蛋白酶处理后仍具有抗菌活性。
- 林云雄刘德辉何俊张承勇黄毓茂
- 关键词：毕赤酵母抑菌试验
- 猪胰高血糖素样肽-2在毕赤酵母中的表达被引量：1
- 2011年
- 胰高血糖素样肽-2（glucagon-like peptide-2,GLP-2）,是胰高血糖素原基因在小肠上皮组织中由L内分泌细胞表达翻译后并处理加工的产物之一。它作为一个促进小肠黏膜生长修复物质,通过促进绒毛高度和隐窝深度的增长,从而增加肠道营养吸收的面积,同时GLP-2具有恢复和维持小肠黏膜上皮屏障的完整性、促进小肠损伤后的修复等作用。因此,GLP-2在动物营养上的应用前景广阔。
- 张承勇梁梓森刘德辉何俊林云雄黄毓茂
- 关键词：胰高血糖素样肽-2毕赤酵母隐窝深度绒毛高度营养吸收黏膜上皮
