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林云熊

作品数:1 被引量:16H指数:1
供职机构:华南农业大学兽医学院更多>>
发文基金:广东科技计划项目更多>>
相关领域:农业科学更多>>

文献类型

  • 1篇中文期刊文章

领域

  • 1篇农业科学

主题

  • 1篇活性鉴定
  • 1篇基因
  • 1篇基因设计

机构

  • 1篇华南农业大学

作者

  • 1篇刘德辉
  • 1篇黄毓茂
  • 1篇何俊
  • 1篇林云熊

传媒

  • 1篇中国预防兽医...

年份

  • 1篇2010
1 条 记 录,以下是 1-1
排序方式:
抗菌肽LL-37在毕赤酵母SMD1168中的高效表达及活性鉴定被引量:16
2010年
为获得高效表达的抗菌肽LL-37,根据人源抗菌肽LL-37的氨基酸序列,选择毕赤酵母(Pichia pastoris)密码子的偏嗜性,通过SOEing法改造合成LL-37基因片段,克隆到pGAPZαA质粒中,获得分泌型重组酵母表达载体pGAPZαA-LL-37。pGAPZαA-LL-37通过限制性内切酶AvrII酶切线性化后,经电穿孔法转入毕赤酵母细胞SMD1168。经Zeocin抗性筛选,得到高拷贝转化子,PCR检测表明LL-37基因与毕赤酵母染色体稳定结合。在GAP启动子调控下,LL-37蛋白获得分泌表达,其上清表达量约为237mg/L。表达产物耐热性强,在100℃条件下30min内仍保持一定的抗菌活性。表达产物对大肠杆菌DH5α、大肠杆菌D31和猪链球菌的最小抑菌浓度(MIC)分别为1.56μg/mL、3.12μg/mL和6.25μg/mL。
刘德辉何俊林云熊黄毓茂
关键词:基因设计活性鉴定
共1页<1>
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