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hVEGF_(121)与βhCG融合蛋白的克隆、分离纯化与初步鉴定被引量：2: 2014年; 构建一种新型抗肿瘤融合蛋白疫苗,包含hVEGF121和βhCG抗原表位,并探索融合蛋白的纯化条件和方法。采用PCR方法,克隆VEGF和βhCG基因,并通过限制性内切酶NcoⅠ、EcoRⅠ和HindⅢ将两个基因逐个插入pET-28a(+)质粒中,利用质粒自带的卡那霉素抗性筛选出阳性克隆,获得重组基因的表达载体。对重组菌进行乳糖诱导表达后,通过超声破碎,硫酸铵分级沉淀,阴离子交换层析等方法进行融合蛋白的分离纯化,Western-blot鉴定。测序结果表明成功构建重组载体pET-28a-VEGF-M2-X10-βhCG-CTP37,重组基因长993 bp,编码331个氨基酸残基。SDS-PAGE显示,经乳糖诱导,Escherichia coli BL21(DE3)重组菌表达hVEGF121-M2-X10-βhCG-CTP37多肽,约占菌体总蛋白量的35%。融合蛋白经分离纯化后纯度可达到电泳纯,约占蛋白冻干粉的80%。结论:克隆、测定了融合蛋白基因,并在Escherichia coli BL21(DE3)中诱导表达hVEGF121-M2-X10-βhCG多肽,同时成功分离纯化此多肽。; 曹荣月宦晓军孙翁李盼郑梅赵鹤杨梦琪龙军张晓红; 关键词：ΒHCG 克隆分离纯化融合蛋白

hVEGF121与βhCG融合蛋白的表达载体构建与初步表达: 为了构建一种新型抗肿瘤融合蛋白疫苗,包含hVEGF121和βhCG抗原表位,并探索融合蛋白的纯化条件和方法.采用PCR方法,克隆VEGF和βhCG基因,并通过限制性内切酶NcoⅠ、EcoR Ⅰ和HindⅢ将两个基因逐个插...; 曹荣月宦晓军孙翁李盼郑梅赵鹤肖芳杨梦琪龙军; 关键词：ΒHCG 克隆融合蛋白

真核表达载体pcDNA3.1(+)-GFP-M2的构建及在小鼠骨髓树突状细胞中的表达被引量：1: 2014年; 为了构建含有绿色荧光蛋白(Green fluorescent protein,GFP)报告基因的M2真核表达载体pcDNA3.1(+)-GFP-M2(2段热休克蛋白70表位序列407-426,mHSP70407-426,M2),探讨M2基因转染小鼠骨髓树突状细胞(Dendritic cell,DC)的表达情况。采用4轮PCR方法从pcDNA3.1(+)-GFP载体中将GFP编码序列扩增出来,并在其上游引入Kozak序列,下游引入M2序列,使用限制性内切酶HindIII和BamHI将目的片段插入到pcDNA3.1(+)中,利用质粒自带的氨苄青霉素抗性筛选出阳性克隆,获得重组基因的表达载体。重组载体通过转染试剂Lipofectamine2 000转染至DC中,通过倒置荧光显微镜观察绿色荧光蛋白在细胞内的表达。构建的pcDNA3.1(+)-GFP-M2经双酶切、PCR和测序鉴定和预期结果一致。荧光显微镜观察显示在转染pcDNA3.1(+)-GFP-M2基因的树突状细胞中,荧光均匀地分布于整个细胞。成功构建含有绿色荧光蛋白报告基因的M2真核表达载体pcDNA3.1(+)-GFP-M2。M2基因成功转染至树突状细胞中。; 曹荣月孙翁陈檬杨梦琪宦晓军肖芳李盼龙军; 关键词：真核表达载体树突状细胞绿色荧光蛋白 KOZAK序列

创新实验中ICR小鼠部分参数探索: 小鼠是药理试验中最常使用的实验动物，了解小鼠的体重变化、脏器系数、血糖值的高低对实验有很重要的参考意义。本实验通过对24只雄性ICR小鼠体重变化数据的分析，得到了小鼠的体重增长率；测定120只雄性ICR小鼠在非禁食状态下...; 肖芳李盼郑梅赵鹤杨梦琪宦晓军曹荣月; 关键词：ICR小鼠血糖值体重脏器系数

数理统计在胰岛素类似物生物活性测定中的应用被引量：1: 2015年; 创新实验大学生利用数理统计学的相关知识,按照《中国药典》2010年版附录Ⅻ中的要求,测定胰岛素类似物的生物活性。通过交叉设计的方差分析及假设检验,评判胰岛素标准品与胰岛素类似物供试品引起小鼠血糖下降的作用,对实验中同批小鼠的给药时间间隔、胰岛素类似物母液储备时间进行探索,并计算胰岛素类似物的效价。创新实验大学生通过此次胰岛素类似物生物活性测定实验增强实验技能,合理利用数理统计解决了实际问题,并培养了严谨求实的科学态度。; 李盼袁玉婷孟雨菡黄立曹荣月; 关键词：创新性实验胰岛素类似物中国药典生物活性

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李盼