陈苗
- 作品数：4 被引量：9H指数：2
- 供职机构：军事医学科学院放射与辐射医学研究所蛋白质组学国家重点实验室更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- PON2单克隆抗体的制备与初步鉴定被引量：2
- 2009年
- 目的:制备PON2(paraxonase2)单克隆抗体(mAb),并进行初步鉴定。方法:利用生物信息学方法分析人类PON2蛋白序列,选取与小鼠同源性低,而免疫原性与亲水性均较强的片段,构建重组表达质粒pGEX-4T-1-PON2和PET-32a-PON2,GST-PON2和HIS-PON2融合蛋白在大肠杆菌中进行表达,以HIS-PON2作为免疫原制备鼠mAb,以GST-PON2作为筛选抗原。采用Western blot、间接免疫荧光鉴定mAb的特异性。结果:GST-PON2和HIS-PON2融合蛋白均在大肠杆菌中获得高效表达,经常规的细胞融合和筛选获得2株可稳定分泌抗PON2的杂交瘤细胞株,这2株抗体可以识别HepG2细胞中的靶蛋白。结论:成功制备出2株抗PON2的mAb,并通过免疫荧光技术检测了该蛋白在HepG2细胞中的分布,为进一步进行PON2蛋白的的研究提供了有效的工具。
- 于占红杨金菊刘静迟俊陈苗柳晓兰刘莹高建恩孙启鸿
- 关键词：原核表达单克隆抗体
- 兔抗人PON2抗体的制备与初步应用被引量：5
- 2008年
- 目的:制备兔抗人PON2(paraoxonase-2)的多克隆抗体并进行初步鉴定。方法:生物信息学方法分析人PON2蛋白序列,选取人兔同源性较低,亲水性及免疫原性较强的片段,通过大肠杆菌原核表达系统进行重组表达,获得GST-PON2融合蛋白用于免疫新西兰大耳白兔获得多克隆抗体,通过XX方法分离纯化得到的抗PON2多克隆抗体,用West-ernblot、间接免疫荧光对其进行特异性及灵敏度鉴定。结果:成功获得了高表达的相对分子质量(Mr)为46000的PON2重组融合蛋白;Westernblot鉴定结果显示此多克隆抗体可特异识别肝脏总蛋白、HeLa细胞及U937细胞中Mr为39000的天然PON2蛋白;间接免疫荧光结果显示此多克隆抗体所识别的蛋白定位于SY5Y细胞胞质中。结论:抗人PON2的多克隆抗体特异识别肝总蛋白、HeLa细胞及U937细胞中的天然蛋白,可用于PON2的研究及临床检测。
- 陈苗杨金菊李淑珍柳晓兰刘莹张林杰高建恩孙启鸿
- 关键词：多克隆抗体重组抗原
- 抗PLA2G13多克隆和单克隆抗体的制备与鉴定被引量：2
- 2008年
- 目的:制备分泌型的磷脂酶A2 G13(group XIII se-cretedphos pholipaseA2,PLA2G13)的多克隆抗体(pAb)和单克隆抗体(mAb),并对抗体进行特性鉴定。方法:以人正常肝cDNA文库为模板,构建重组表达质粒pGEX-4T-1-PLA2G13(即PLA2G13-GST)和pET-32a-PLA2G13(即PLA2G13-His)。PLA2G13-GST融合蛋白作为免疫原制备兔pAb和鼠mAb。采用Western blot鉴定兔抗人PLA2G13 pAb的特异性。采用Western blot和Immunohistochemistry鉴定鼠抗人PLA2G13 mAb的特异性。结果:PLA2G13-GST和PLA2G13-His融合蛋白在均大肠杆菌中以包涵体形式大量表达。Western blot鉴定表明,兔抗人PLA2G13 pAb可特异地识别HepG2细胞系中相对分子质量(Mr)约19700的蛋白,与文献报道中PLA2G13的实际Mr相符。通过筛选共获得8株可稳定分泌抗PLA2G13的杂交瘤细胞株,Western blot鉴定表明6株可识别重组人PLA2G13蛋白,免疫组织化学鉴定显示2株可特异性识别正常肝组织中的PLA2G13蛋白。结论:成功地制备了抗人PLA2G13兔pAb和鼠mAb,为进一步研究PLA2G13的功能提供了特异性检测工具。
- 李淑珍刘莹陈苗柳晓兰唐小波高建恩朱大岭孙启鸿
- 关键词：原核表达融合蛋白抗体制备
- 血小板因子-4与Neuropilin-1（NRP1）相互作用位点的鉴定
- 背景:Neuropilin-1 /(NRP1/)是细胞表面相对分子量/(Mr/)为102,000Da的Ⅰ型跨膜糖蛋白,通过杂交瘤技术在欧洲蟾蜍的神经系统内首次被发现。进一步研究证明NRP1通常表达在内皮细胞及一些肿瘤细胞...
- 陈苗
- 关键词：NRP1单克隆抗体PF4
- 文献传递
