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段红霞
作品数:
1
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供职机构:
华中科技大学同济医学院基础医学院免疫学系
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发文基金:
国家自然科学基金
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相关领域:
医药卫生
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合作作者
李庆
华中科技大学同济医学院基础医学...
郝娟
华中科技大学同济医学院基础医学...
吴雄文
华中科技大学同济医学院基础医学...
翁秀芳
华中科技大学同济医学院基础医学...
钟茂华
华中科技大学同济医学院基础医学...
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李庆
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段红霞
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华中科技大学...
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2009
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共价连接β2m的HLA-A2/IgG1二聚体的构建、表达与纯化
2009年
目的HLA-A2/IgG1二聚体经蛋白A(SPA)亲合层析柱浓缩纯化时容易发生β2 m解离,为了解决这个问题,研究构建与表达β2 m-HLA-A2/IgG1融合蛋白。方法利用基因重组技术构建β2 m-HLA-A2/IgG1融合基因真核表达载体pcDNA3.1(+)-[β2 m-HLA-A2/IgG1],将其转染721.221细胞系,筛选高表达β2 m-HLA-A2/IgG1融合蛋白的细胞株;收集细胞培养上清,SPA亲合层析柱浓缩纯化,检测该蛋白的纯化效率。结果β2 m-HLA-A2/IgG1融合基因转染721.221细胞后可表达正确构象的β2 m-HLA-A2/IgG1二聚体,Western blot显示β2 m-HLA-A2/IgG1融合蛋白的分子量与预期大小一致;经SPA亲合层析柱纯化后,β2 m-HLA-A2/IgG1融合蛋白较HLA-A2/IgG1融合蛋白的纯化效率约高5倍。结论共价连接β2 m的HLA-A2二聚体有助于HLA-A2二聚体在低pH值的环境下保持构象完整。
郝娟
段红霞
李庆
孙伟
钟茂华
翁秀芳
吴雄文
关键词:
真核表达
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