秦喆
- 作品数：5 被引量：25H指数：3
- 供职机构：中国人民武装警察部队后勤学院附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金天津市应用基础与前沿技术研究计划重点项目天津市应用基础与前沿技术研究计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 基于iTRAQ联合2D LC-MS/MS分析PM2.5对人类胎盘滋养细胞的影响被引量：2
- 2017年
- 目的:利用蛋白组学方法初步筛选PM2.5通过影响人类胎盘滋养细胞造成不良妊娠率增加可能涉及的蛋白分子和生物进程。方法:用0、30、60、120和200μg/mL的PM2.5分别染毒HTR-8/SVneo细胞24 h与48 h后观察细胞增殖情况,最终确定以120μg/mL PM2.5染毒细胞24 h和48 h进行后续实验。提取胞内蛋白,酶解消化后,同位素标记相对和绝对定量(isobaric tags for relative and absolute quantitation,iTRAQ)标记联合二维液相色谱串联质谱(2D LC-MS/MS)技术分析肽段,鉴定HTR-8/SVneo细胞内的差异表达蛋白,并进行生物信息学分析。结果:120μg/mL PM2.5染毒24 h和48 h后的存活率分别为86.09%和52.36%,与对照组(0μg/mL PM2.5染毒组)相比,细胞存活率显著下降(P<0.05)。120μg/mL PM2.5 24 h染毒组和48 h染毒组细胞中分别鉴定出182个和486个差异蛋白,涉及细胞生物进程22条和217条。结论:PM2.5对HTR-8/SVneo细胞的影响涉及大量细胞生物进程的改变;iTRAQ联合2D LC-MS/MS技术是一种对染毒后细胞内差异表达蛋白高敏感度、高通量筛选的有效途径,为今后对PM2.5增加不良妊娠结局风险的深入机制研究奠定基础。
- 秦喆符锋徐忠伟侯海燕陈亚琼
- 关键词：空气污染物串联质谱法
- PM2.5对HTR8-SVneo细胞的毒性作用被引量：1
- 2016年
- 目的:探讨大气中的PM2.5对HTR8-SVneo细胞的毒性作用。方法:采用0,30,60,120和200μg/m L5个浓度的PM2.5对HTR8-SVneo细胞染毒24 h,以0μg/m L浓度为对照组,其余浓度为不同剂量PM2.5染毒组,通过CCK-8细胞增殖毒性检测试剂盒测定细胞存活率;激光全息细胞分析及成像系统观察细胞3D形态及动态监测24 h内各组细胞数量变化;流式细胞仪检测细胞生长周期;彗星试验检测细胞DNA损伤水平;活性氧簇(ROS)检测试剂盒测定细胞内ROS水平。结果:60,120和200μg/m L浓度组细胞存活率及增殖能力低于对照组(P<0.05或P<0.01);PM2.5可使HTR8-SVneo细胞的生长周期阻滞在G_2/M期(P<0.05或P<0.01);不同浓度PM2.5染毒组彗尾DNA百分比均高于对照组(P<0.01),且呈剂量依赖性。各浓度染毒组细胞中ROS的产生均高于对照组(P<0.05或P<0.01)。结论:PM2.5对HTR8-SVneo细胞有一定毒性作用,造成DNA的损伤,阻碍细胞生长周期,这种毒性作用可能与氧自由基的产生增多有关。
- 秦喆侯海燕徐忠伟张利文韩斌吴思雨陈亚琼
- 关键词：空气污染物滋养细胞细胞毒性
- MMP-2和MMP-9参与多种因素对胎盘滋养细胞侵袭力的调控被引量：12
- 2017年
- 成功妊娠有赖于滋养细胞对子宫内膜的适度侵袭。侵袭功能出现异常,可导致滋养细胞对子宫内膜侵入过深或过浅、子宫螺旋动脉重塑障碍、胎盘缺氧缺血及母体全身血管内皮细胞损伤,导致多种不良妊娠结局以及妊娠相关疾病的发生。明胶酶基质金属蛋白酶2(matrix metallopeptidase 2,MMP-2)和MMP-9因可降解Ⅳ型胶原参与对滋养细胞侵入子宫内膜能力的调控。研究表明,激素、细胞因子、转录因子、环境污染物以及其他多种物理刺激等均可以影响滋养细胞的侵袭力,并且在探讨其影响机制时都最终以MMP-2和MMP-9表达水平的变化来解释。对影响滋养细胞侵袭力的多种因素进行综述,有助于以MMP-2和MMP-9为靶点的不良妊娠以及妊娠相关疾病的预防或治疗。
- 秦喆侯海燕史海霞徐忠伟陈亚琼
- 关键词：滋养层基质金属蛋白酶2基质金属蛋白酶9侵袭力
- 早期胚胎停育绒毛组织的蛋白质组学分析被引量：6
- 2017年
- 目的:应用蛋白质组学方法研究胎儿染色体正常早期胚胎停育患者与胎儿染色体正常且正常妊娠行人工流产患者绒毛组织蛋白表达情况,寻找早期胚胎停育发病机制的可能线索。方法:选取10例胎儿染色体正常早期胚胎停育患者及5例胎儿染色体正常且正常妊娠行人工流产患者为研究对象,应用蛋白质组学高效液相色谱/串联质谱联用技术(LC-MS/MS)检测绒毛组织蛋白质谱,应用Maxquant软件、Uniprot人类参考蛋白质数据库、DAVID Analysis数据库分析质谱数据,找出并分析差异蛋白。结果:质谱共鉴定3 950个蛋白,定量3 879个蛋白,早期胚胎停育患者与对照组比较共筛选出220个差异蛋白,其中162个蛋白上调,58个蛋白下调,这些差异蛋白主要参与免疫反应、活性氧代谢、血管生成等生物过程,另外C1R、C3、C4A、C4B、C7表达上调,与补体系统激活有关;TPSO表达上调,与活性氧代谢有关。结论:建立了绒毛组织中早期胚胎停育相关的差异表达蛋白质谱。胎盘组织补体系统的过度激活及氧化还原反应失衡可能参与了早期胚胎停育的发病机制。
- 姚婷刘国忠侯海燕秦喆陈娟刘健陈亚琼
- 关键词：蛋白质组学补体激活活性氧
- PM2.5对人绒毛膜外滋养层细胞HTR8-SVneo迁移与侵袭力的影响及机制研究被引量：6
- 2016年
- 目的:探讨PM2.5对人绒毛膜外滋养细胞HTR8-SVneo存活率以及迁移与侵袭能力的影响,寻找PM2.5致不良妊娠结局可能的机制。方法:不同浓度PM2.5染毒HTR8-SVneo细胞建立实验模型,CCK8(Cell Counting Kit-8)法分析细胞增殖情况,最终选取0、30、60、120和200μg/m L 5个浓度进行后续实验,其中以0μg/m L染毒组为对照组。激光全息细胞分析及成像系统分析细胞迁移力;Transwell侵袭实验分析细胞侵袭力;q PCR和Western Blot分别检测基质金属蛋白酶2(MMP2)、MMP9及其组织抑制剂TIMP1、TIMP2的m RNA和蛋白表达水平;明胶酶谱法检测细胞分泌的明胶酶MMP2和MMP9活性。结果:PM2.5对HTR8-SVneo细胞增殖有显著抑制作用(P<0.05);PM2.5使HTR8-SVneo细胞迁移距离和穿膜细胞数均减少(P<0.05);q PCR和Western Blot结果显示,PM2.5使HTR8-SVneo细胞MMP2、MMP9、TIMP1及TIMP2的m RNA及蛋白表达水平升高(P<0.05),且MMPs升高程度低于TIMPs;明胶酶谱结果显示,HTR8-SVneo细胞MMP9活性在30、60、120和200μg/m L染毒组均升高(P<0.05)。结论:PM2.5在造成HTR8-SVneo细胞损伤的同时,可能通过打破MMPs/TIMPs的动态平衡影响人绒毛膜外滋养细胞HTR8-SVneo的迁移与侵袭力,从而造成不良妊娠结局,而具体信号机制有待深入研究。
- 秦喆侯海燕徐忠伟张立文韩斌陈亚琼吴思雨姚婷
- 关键词：滋养层金属蛋白酶1组织抑制剂金属蛋白酶2组织抑制剂
