张哲
- 作品数：1 被引量：0H指数：0
- 供职机构：西安交通大学医学院第一附属医院更多>>
- 发文基金：陕西省“13115”科技创新工程重大科技专项更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 人食管癌细胞cDNA表达文库的构建和鉴定
- 2016年
- 目的 构建人食管癌细胞cDNA噬菌体表达文库。方法 从食管癌细胞中提取总RNA,利用磁珠吸附法分离其中的mRNA,逆转录合成cDNA第一链,再通过碱基互补配对原则合成第二链,对双链cDNA进行末端修饰,连接EcoRⅠ适配子,磷酸化EcoRⅠ适配子5′端,除去不合要求的cDNA片段,将符合要求的与载体（噬菌体T7Select10-3b）连接,然后进行体外包装建成初步的cDNA文库,并对文库进行鉴定。结果 食管癌细胞cDNA原始表达文库的滴度为2.01×106 pfu/mL,重组率高达100%,插入片段的大小范围在300~1 500bp之间。结论本实验成功构建了人食管癌T7噬菌体展示cDNA表达文库,并经过了初步鉴定,为下一步利用重组表达cDNA克隆的血清学分析技术（SEREX技术）鉴定食管癌相关抗原奠定基础。
- 张哲武翔宇冯璐黄尚科罗敏娜邵珊赵新汉
- 关键词：食管癌噬菌体CDNA
