贾双双
- 作品数:4 被引量:5H指数:1
- 供职机构:中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所更多>>
- 发文基金:国家科技重大专项国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 柯萨奇病毒A组16型感染性滴度检测用国家参考品的制备及标定被引量:2
- 2016年
- 目的 制备柯萨奇病毒A组16型(coxsackievirus A16,CA16)感染性滴度检测用国家参考品,为CA16疫苗生产过程中的病毒滴度控制和CA16疫苗的免疫效果评价提供国家参考品.方法 将验证合格的CA16(C1亚型)培养液分装(0.5 ml/支)制成候选参考品.3个独立实验室分别对候选参考品进行协作标定,用细胞培养法检测CA16感染性滴度,用Behrens-K(a)rber法计算半数细胞感染量(50% cell culture infective does,CCID50).同时,将CA16参考品分别置于-20、4、22~25(室温)和37℃条件下或反复冻融,进行热稳定性、长期稳定性和冻存稳定性研究.结果 制备的CA16参考品的病毒滴度为(6.80±0.95) lgCCID50/ml.CA16参考品于-60℃保存12个月、-20℃保存6个月和4℃保存28 d后的病毒滴度无显著下降,表明稳定性较好;在22~25℃(室温)和37℃条件下,CA16参考品每天的病毒滴度损失率分别为3.4%和4.4%,而且分别保存27和21 d后病毒滴度无明显下降;对CA16参考品反复冻融的病毒滴度损失率为4.8%/次.结论 成功制备了CA16感染性滴度检测用候选国家参考品,将CA16参考品赋值确定为(6.80±0.95) lgCCID50/ml.
- 杜加亮刘悦越于晓方张文艳贾双双刘艳赵岩国泰
- 关键词:肠道病毒属国家参考品
- 基于Arlequin软件的HLA单倍型分析研究被引量:1
- 2016年
- 目的应用Arlequin软件进行HLA单倍型的分析。方法将HLA-A和B两基因座位的等位基因分型数据进行格式转换,编辑成.arp格式输入文件,导入Arlequin软件进行分析计算。结果用Arlequin软件进行HLA单倍型分析,直接得出各单倍型及等位基因的频率和统计表,分析得出19种HLA-A等位基因、39种HLA-B等位基因和128种A-B单倍型。结论 Arlequin软件可用于HLA单倍型的计算,该方法具有简便、快速、广谱、可操作性强的特点。
- 刘悦越贾双双袁娟丽杜加亮陈红兵国泰
- 关键词:人类白细胞抗原单倍型等位基因基因多态性
- 柯萨奇病毒A16型灭活疫苗保护效果研究被引量:1
- 2016年
- 目的:研究柯萨奇病毒A 16型候选疫苗株(CA 16-KM)经灭活后免疫小鼠,对病毒攻击的保护效果。方法:用Vero细胞进行CA 16-KM株培养,病毒收获后经浓缩、蔗糖密度梯度离心进行纯化及β-丙内酯灭活,用酶联免疫吸附法(ELISA法)对灭活后的CA 16-KM病毒液进行抗原含量的测定并在Vero细胞上盲传3代对灭活后CA 16-KM毒株的残余毒力进行检测。灭活后的病毒加入氢氧化铝佐剂(质量浓度为1 mg·mL^(-1)),经离心及PBS重悬,制成实验性灭活疫苗。分别于第0天和第14天经肌肉注射免疫8周龄ICR母鼠,对照组用等体积PBS代替。分娩后24 h内的新生乳鼠用100 LD_(50)的CA 16强毒株(CA16-CC)经颅内注射进行攻毒,攻毒后连续21 d观察其临床症状,研究该灭活疫苗对新生乳鼠的保护效果。结果:经β-丙内酯灭活后的CA 16-KM在Vero细胞上盲传3代均无细胞病变效应(CPE)出现,灭活后的CA 16-KM抗原含量为320 EU·mL^(-1)。经注射实验性疫苗的乳鼠攻毒后全部存活,表明CA 16-KM株制备的灭活疫苗诱导的免疫反应可对新生乳鼠产生100%的保护作用。结论:β-丙内酯对CA 16-KM毒株的灭活效果较好;CA 16-KM疫苗候选株灭活后具有良好的免疫原性,可以保护新生乳鼠抵抗CA 16病毒的攻击,也许是研制CA 16灭活疫苗的理想毒株。
- 贾双双刘悦越杜加亮赵荣荣刘艳国泰孙茂盛
- 关键词:灭活疫苗新生乳鼠
- EV71-CA16联合灭活疫苗免疫保护效果研究
- 目的:利用肠道病毒71型-柯萨奇病毒A组16型(EV71-CA16)联合灭活疫苗,对动物体内和体外的保护效果进行研究。尝试用致敏的T淋巴细胞通过腹腔过继回输的方法建立过继免疫乳鼠模型,对细胞免疫反应与保护作用之间的关系进...
- 贾双双
- 关键词:灭活疫苗肠道病毒71型柯萨奇病毒A组16型