刘亮
- 作品数：3 被引量：5H指数：2
- 供职机构：华中科技大学同济医学院附属同济医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 野生型p53调控结肠癌细胞代谢转换的研究被引量：3
- 2015年
- 目的观察野生型p53基因在结肠癌细胞系中能量代谢转换中的作用。方法利用流式细胞学方法检测p53在结肠癌细胞系HCTl16中对荧光标记的葡萄糖类似物：2-N[7-硝基苯-2-乙二酸，34羟氨基]-2．脱氧葡萄糖（2-NBDG）摄取的影响，进一步采用Westernblot、实时定量聚合酶链反应（Real．timePCR）等方法检测其可能的下游调控关键酶三磷酸腺苷（ATP）柠檬酸裂解酶（ACLY）、糖酵解的关键酶葡糖糖6-磷酸脱氢酶（G6PD）、乳酸脱氢酶（LDHA）、醛缩酶（ALDOA）及M2型丙酮酸激酶（PKM2）的蛋白及转录水平的表达变化。结果比较于p53缺失型（KO）HCT116细胞，p53野生型（WT）的HCT116细胞对葡萄糖的摄取能力下降41％（P〈0．05）。进一步利用Westernblot法检测能量代谢关键基因进行蛋白水平的比较及半定量分析后发现，相对于p53KO的HCT116细胞，调控细胞脂质代谢关键酶ACLY下调0．3984（t=7．154，P〈0．025）、糖酵解的关键酶G6PD下调0．3578（t=10．99，P〈0．叭）、LDHA下调0．2227（t=7．182，P〈0．05），证明上述基因在p53wT细胞中表达受抑制，而另外两个糖酵解关键酶ALDOA及PKM2的表达则无明显变化（P〉0．05）。进一步检测mRNA水平后发现p53wT的HCT116细胞中ACLY基因下调6．61倍（t=43．18，P〈0．01）、G6PD基因下调6．75倍（t=85．90，P〈0．01）及LDHA基因下调0．99倍（t=32．42，P〈0．01），而ALDOA及PKM2则无明显变化（P〉0．05）。结论野生型p53作为抑癌基因参与肿瘤能量代谢的调控过程，其可能通过抑制多种关键酶发挥作用。
- 刘亮陈浩余超然陶德定冷彦胡俊波龚建平李小兰
- 关键词：结肠肿瘤P53能量代谢
- DAB2IP调控盐霉素对结肠癌细胞增殖影响的研究被引量：2
- 2022年
- 目的探讨DAB2IP在盐霉素对结肠癌细胞增殖影响中的作用。方法利用细胞计数试剂盒8(cell counting kit 8,CCK8)检测盐霉素对结肠癌HT29和SW480细胞的半数抑制浓度。采用慢病毒转染的方法分别转染pGIPZ-DAB2IP-shRNA质粒和pGIPZ-con-shRNA质粒构建稳定敲减DAB2IP表达的结肠癌细胞和对照组细胞,采用Lipofectamine3000分别转染pCI-DAB2IP质粒和pCI-neo质粒构建外源性高表达DAB2IP的结肠癌细胞和对照组细胞,再采用CCK8检测盐霉素对稳定敲减或高表达DAB2IP后结肠癌细胞增殖的影响,进一步采用实时定量PCR法检测结肠癌细胞中肿瘤干细胞标志分子CD44、CD24和CD133的表达变化。结果盐霉素对结肠癌细胞HT29和SW480具有明显的增殖抑制作用,其半数抑制浓度分别为20.0和10.0μmol/L。在HT29细胞中稳定敲减DAB2IP表达后,盐霉素对HT29细胞增殖的抑制作用较对照组细胞明显增强(细胞活力均数38%比51%,t=2.98、P=0.031);在SW480细胞中外源性高表达DAB2IP后,盐霉素对SW480细胞增殖的抑制作用较对照组细胞明显减弱(细胞活力均数62%比50%,t=18.13、P<0.0001)。进一步通过实时定量PCR法检测发现,稳定敲减HT29细胞中DAB2IP表达后,HT29细胞中肿瘤干细胞标志分子CD44、CD24和CD133表达较对照组细胞明显升高(P<0.05);外源性高表达SW480细胞中DAB2IP表达后,SW480细胞中CD44、CD24和CD133表达较对照组细胞明显降低(P<0.05)。结论从本研究初步研究结果提示,盐霉素可以抑制结肠癌细胞的增殖,DAB2IP可能是通过抑制结肠癌细胞中肿瘤干细胞标志分子表达而减弱盐霉素对结肠癌细胞增殖的抑制作用。
- 申杰贾唯艺黄庆文冯圣杰刘亮
- 关键词：结肠癌盐霉素肿瘤干细胞
- 原发性胃肠道淋巴瘤的诊断与治疗(附30例报告)
- 2022年
- 目的总结原发性胃肠道淋巴瘤的诊断和治疗体会。方法回顾性分析华中科技大学同济医学院附属同济医院胃肠外科2013年9月至2016年4月收治的30例原发性胃肠道恶性淋巴瘤病人的临床症状、诊断、治疗、病理及随访资料。结果临床症状主要为腹痛(63.3%,19/30)、腹部包块(20.0%,6/30)、消化道出血(13.3%,4/30)、肠梗阻(6.7%,2/30);18例行内镜及活检,其中5例确诊为原发性胃肠道淋巴瘤(确诊率为27.8%);腹部增强CT诊断率为20.0%(5/25);术前诊断率为33.3%(10/30)。手术治疗26例,化疗21例;总体5年存活率为50.0%(15/30),其中ⅠE期者5年存活5例,Ⅱ期存活5例,ⅡE期存活2例,Ⅳ期存活3例。治疗效果方面:单纯化疗病人的5年存活率为100.0%,手术+化疗病人的5年存活率为66.7%,单纯手术的病人5年存活率为0。结论原发性胃肠道恶性淋巴瘤术前诊断率较低,误诊率较高;手术切除是明确诊断、临床分期和治疗的重要方法,单纯化疗或手术联合化疗具有较好的治疗效果。
- 刘亮徐向上曹志新
- 关键词：原发性胃肠道淋巴瘤结外淋巴瘤
