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陈浩
作品数:
1
被引量:3
H指数:1
供职机构:
华中科技大学同济医学院
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发文基金:
国家自然科学基金
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相关领域:
医药卫生
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合作作者
刘亮
华中科技大学同济医学院
龚建平
华中科技大学同济医学院
李小兰
华中科技大学同济医学院
胡俊波
华中科技大学同济医学院
陶德定
华中科技大学同济医学院
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2015
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野生型p53调控结肠癌细胞代谢转换的研究
被引量:3
2015年
目的观察野生型p53基因在结肠癌细胞系中能量代谢转换中的作用。方法利用流式细胞学方法检测p53在结肠癌细胞系HCTl16中对荧光标记的葡萄糖类似物:2-N[7-硝基苯-2-乙二酸,34羟氨基]-2.脱氧葡萄糖(2-NBDG)摄取的影响,进一步采用Westernblot、实时定量聚合酶链反应(Real.timePCR)等方法检测其可能的下游调控关键酶三磷酸腺苷(ATP)柠檬酸裂解酶(ACLY)、糖酵解的关键酶葡糖糖6-磷酸脱氢酶(G6PD)、乳酸脱氢酶(LDHA)、醛缩酶(ALDOA)及M2型丙酮酸激酶(PKM2)的蛋白及转录水平的表达变化。结果比较于p53缺失型(KO)HCT116细胞,p53野生型(WT)的HCT116细胞对葡萄糖的摄取能力下降41%(P〈0.05)。进一步利用Westernblot法检测能量代谢关键基因进行蛋白水平的比较及半定量分析后发现,相对于p53KO的HCT116细胞,调控细胞脂质代谢关键酶ACLY下调0.3984(t=7.154,P〈0.025)、糖酵解的关键酶G6PD下调0.3578(t=10.99,P〈0.叭)、LDHA下调0.2227(t=7.182,P〈0.05),证明上述基因在p53wT细胞中表达受抑制,而另外两个糖酵解关键酶ALDOA及PKM2的表达则无明显变化(P〉0.05)。进一步检测mRNA水平后发现p53wT的HCT116细胞中ACLY基因下调6.61倍(t=43.18,P〈0.01)、G6PD基因下调6.75倍(t=85.90,P〈0.01)及LDHA基因下调0.99倍(t=32.42,P〈0.01),而ALDOA及PKM2则无明显变化(P〉0.05)。结论野生型p53作为抑癌基因参与肿瘤能量代谢的调控过程,其可能通过抑制多种关键酶发挥作用。
刘亮
陈浩
余超然
陶德定
冷彦
胡俊波
龚建平
李小兰
关键词:
结肠肿瘤
P53
能量代谢
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