胡旭东
- 作品数：2 被引量：2H指数：1
- 供职机构：安徽医科大学第二附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 猫肉瘤相关蛋白对前列腺癌细胞周期及凋亡的影响及其机制被引量：1
- 2015年
- 目的 探讨小RNA干扰技术（siRNA）沉默猫肉瘤相关蛋白（Fer）的表达对前列腺癌细胞周期及凋亡的影响及其机制.方法 设计合成3组针对Fer特异的siRNA转染人前列腺癌PC-3细胞,应用实时定量反转录聚合酶链反应（RT-qPCR）和Western blot法检测转染前后PC-3细胞中Fer mRNA及蛋白表达水平,并筛选出干扰效率最高的小干扰RNA进行后续实验,用流式细胞仪检测各组细胞的细胞周期变化并分析细胞凋亡,观察Fer基因表达抑制后细胞周期及凋亡相关基因表达水平的变化.结果 利用RT-qPCR检测siRNA-1、siRNA-2、siRNA-3组的Fer mRNA相对表达量分别为0.288、0.369、0.623,与阴性对照（NC）组比较差异均具有统计学意义（以NC组FermRNA表达量为l,P＜0.05）,Western blot方法同样证实3组小RNA干扰组显著抑制PC-3细胞的Fer蛋白的表达,其中siRNA-1干扰效率最高（P＜0.01）.流式细胞仪结果显示RNA干扰（Si）组细胞G0/G1期细胞比例为（52.340±2.049）％,显著高于NC组（40.230±2.065）％,而在S期细胞比例为（35.040 ±3.810）％,显著低于NC组（50.650±3.693）％,两者与NC组比较差异均具有统计学意义（P＜0.05）;Si组细胞的凋亡率为（33.6±3.3）％,显著高于NC组的凋亡率（7.8±1.0）％,差异有统计学意义（P＜0.05）;同时随着Fer表达的抑制,细胞周期素（Cyclin） D1,B细胞淋巴瘤/白血病-2 （bcl-2）的表达显著下调,p21和活化型半胱氨酸-3的表达显著上升,与NC组比较差异均有统计学意义（P＜0.05）.结论 Fer-siRNA可抑制Fer在前列腺癌细胞中的表达,抑制前列腺癌细胞G1/S期转化,从而诱导肿瘤细胞凋亡,其机制可能与调控细胞周期及凋亡相关基因的表达有关.
- 胡旭东于德新张志强谢栋栋王毅张涛
- 关键词：前列腺癌小干扰RNA细胞周期脱噬作用
- Cav-3/ERK信号通路在吗啡预处理减轻慢性心力衰竭大鼠心肌缺血再灌注损伤中的作用:离体实验被引量：1
- 2022年
- 目的:探讨小窝蛋白(Cav-3)/细胞外信号调节激酶(ERK)信号通路在吗啡预处理减轻慢性心力衰竭大鼠心肌缺血再灌注损伤中的作用。方法:清洁级健康雄性成年SD大鼠,体重200~250 g,结扎冠状动脉左前降支6周制备慢性心力衰竭模型。取慢性心力衰竭和Langendorff灌注模型制备成功的大鼠心脏36个,采用随机数字表法分为4组(n=9):心肌缺血再灌注组(IR组)、吗啡预处理组(MP组)、吗啡预处理+甲基-β-环糊精组(MP+MβCD组)、甲基-β-环糊精对照组(MβCD组)。采用全心停灌30 min再灌注120 min的方法建立离体心脏全心缺血再灌注损伤模型。MP组于平衡灌注15 min后灌注含1μmol/L吗啡的K-H液进行预处理,灌注5 min后改为K-H液灌注5 min,3个循环共计30 min,处理结束后全心停灌30 min再灌注120 min。MP+MβCD组于吗啡预处理前10 min灌注含200μmol/L甲基-β-环糊精的K-H液,其余操作同MP组。MβCD组:于全心停灌前40 min灌注含200μmol/L甲基-β-环糊精的K-H液,其余操作同IR组。于平衡灌注15 min(T_(0))、再灌注5 min(T_(1))、10 min(T_(2))时收集冠状动脉流出液,采用化学比色法检测LDH活性。再灌注120 min时,测定心肌梗死体积(IS)、缺血危险区体积(AAR),计算IS/AAR;采用Western blot法检测心肌组织Cav-3、ERK1/2、磷酸化ERK1/2(p-ERK1/2)表达水平,计算p-ERK1/2/ERK1/2比值。结果:与IR组比较,MP组IS和IS/AAR降低,冠状动脉流出液LDH活性降低,心肌组织Cav-3表达上调,p-ERK1/2/ERK1/2比值升高(P<0.05),MβCD组上述指标差异无统计学意义(P>0.05);与MP组比较,MP+MβCD组IS和IS/AAR升高,冠状动脉流出液LDH活性升高,心肌组织Cav-3表达下调,p-ERK1/2/ERK1/2比值降低(P<0.05)。结论:吗啡预处理减轻慢性心力衰竭大鼠心肌缺血再灌注损伤的机制可能与激活Cav-3/ERK信号通路有关。
- 郭成晓金世云金世云胡旭东胡旭东张野
- 关键词：吗啡MAP激酶信号系统
