喻芳 作品数:7 被引量:8 H指数:2 供职机构: 广州医科大学 更多>> 发文基金: 广州市医药卫生科技项目 广东省科技计划工业攻关项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
RNA干扰沉默USP22基因对人鼻咽癌裸鼠移植瘤生长的影响 被引量:3 2015年 目的探讨USP22基因表达沉默对人鼻咽癌裸鼠移植瘤生长的影响。方法将9只BALB/C祼鼠随机分为阴性对照组、CNE-2空载体细胞株组(Scrambled组)、USP22表达下调稳定细胞株组(sh-USP22组),每组3只裸鼠。绘制各组肿瘤生长曲线;移植瘤中USP22 m RNA及蛋白的表达情况通过RT-PCR、免疫组织化学法检测。结果 sh-USP22组肿瘤重量[(0.54±0.07)g]明显小于阴性对照组[(1.58±0.24)g]和Scrambled组[(1.46±0.23)g],差异均有统计学意义(均P<0.05);RT-PCR结果表明,以阴性对照组表达量为参照(1),sh-USP22组肿瘤组织中USP22m RNA相对表达量(0.14±0.09)低于阴性对照组和Scrambled组(0.92±0.11),差异均有统计学意义(均P<0.05);而阴性对照组和Scrambled组(0.92±0.11)比较,差异无统计学意义(P>0.05);免疫组化结果表明,sh-USP22组肿瘤组织中USP22阳性细胞所占比率[(12.45±1.16)%]明显低于阴性对照组[(97.25±1.94)%]和Scrambled组[(91.28±2.75)%],差异均有统计学意义(均P<0.05);阴性对照组[(97.25±1.94)%]和Scrambled组[(91.28±2.75)%]比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论慢病毒载体sh-USP22能有效抑制USP22基因表达,并有效抑制CNE-2细胞的裸鼠成瘤能力,USP22有望成为鼻咽癌基因治疗新靶点。 廖志伟 庄雅靖 余宏伟 喻芳 刘孟忠 周同冲关键词:鼻咽癌 CNE-2 细胞 RNA干扰 裸鼠移植瘤 尼妥珠单抗联合顺铂和三维适形放疗治疗鼻咽癌的临床研究 2014年 目的观察尼妥珠单抗联合三维适形和顺铂同步放化疗治疗鼻咽癌的疗效及其毒副作用。方法对照组24例采用三维适形放疗和顺铂方案同步放化疗,实验组20例在对照组放化疗的基础上加用尼妥珠单抗治疗。比较两组疗效及不良反应等。结果实验组近期疗效优于对照组(P<0.05),实验组和对照组治疗有效率分别为75.00%、50.00%,两组不良反应发生率无差异(P>0.05)。结论尼妥珠单抗联合顺铂和三维适形放疗治疗鼻咽癌患者疗效良好,并未增加放化疗相关不良反应。 余宏伟 庄雅靖 喻芳 廖志伟 周同冲关键词:鼻咽癌 尼妥珠单抗 顺铂 三维适形放射治疗 泛素特异性肽酶22基因与肿瘤发展和预后的研究进展 被引量:1 2014年 泛素特异性肽酶22(ubiquitin—specificprocessingpeptidase22,USP22)是一种新型的去泛素化酶家族基因,是hSAGA复合物的亚单位。越来越多的实验研究结果证明泛素特异性肽酶22(USP22)是癌干细胞标记物中的一种,在肿瘤形成及发展的病理过程中扮演关键的角色,并与不良预后有着密切的关系。 庄雅靖 喻芳 周同冲关键词:不良预后 USP22 ShRNA慢病毒载体的构建及鉴定 被引量:1 2014年 目的构建并鉴定USP22基因Sh RNA慢病毒载体,为进一步研究USP22基因在鼻咽癌中的作用机制奠定基础。方法针对USP22基因的编码序列设计并合成2条特异性干扰序列,序列两端含有限制性内切酶位点HpaⅠ和XhoⅠ。寡核苷酸链退火生成寡核苷酸双链,5′端磷酸化后将含有酶切位点的寡核苷酸双链克隆到p LL3.7慢病毒表达载体。连接产物经转化、培养,提取其质粒,提取出来的质粒经HpaⅠ和XhoⅠ酶切电泳鉴定,鉴定正确的质粒进行测序。构建成功的慢病毒表达载体p LL-USP22-sh RNA与包装载体质粒混匀共转染于293T细胞。通过荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白(GFP)情况,对病毒滴度和感染效率进行检测。结果成功构建慢病毒表达载体p LL-USP22-sh RNA。与包装载体质粒共转染293T细胞后测定慢病毒滴度为4×107 TU/ml。结论本实验应用相关技术成功构建USP22 Sh RNA慢病毒载体,为进一步研究USP22基因的生物学功能奠定了基础。 余宏伟 廖志伟 庄雅靖 喻芳 周同冲关键词:慢病毒载体 p300RNA干扰慢病毒载体的构建及其在CNE-2细胞中的表达 2015年 目的构建p300基因RNA干扰慢病毒载体获得稳定感染的人鼻咽癌CNE-2细胞株,以观察CNE-2细胞中p300的表达及其功能。方法设计p300基因特异性RNA干扰靶序列,与经Hpa I和Xho I酶切后的载体连接,产生重组慢病毒质粒p LL-GFP-Puro-shp300,筛选阳性克隆,测序鉴定,与慢病毒包装载体共转染293T细胞,包装产生慢病毒,对病毒滴度和感染效率进行检测。结果 p LL-GFP-Puro-shp300慢病毒RNA干扰载体经酶切和测序鉴定证实准确连接测序正确,且包装出来的病毒纯化后滴度达107TU·m L-1。RT-q PCR、Western blot结果显示感染后p300 mRNA及蛋白水平显著下降,证明重组慢病毒对CNE-2细胞p300基因表达有明显沉默作用。结论成功构建靶向p300基因RNA干扰慢病毒载体,为进一步研究p300在鼻咽癌发生过程中的作用奠定基础。 廖志伟 罗键雄 喻芳 余宏伟 庄雅靖 周同冲 刘孟忠关键词:P300 鼻咽癌 慢病毒载体 鼻咽癌患者治疗前外周血α-羟基丁酸脱氢酶水平与其预后的相关性分析 被引量:3 2015年 目的研究鼻咽癌患者治疗前外周血α-羟基丁酸脱氢酶(α-HBDH)水平与其预后的相关性。方法选择2008年5月至2011年10月广州医科大学附属肿瘤医院初诊的335例鼻咽癌患者作回顾性分析。收集患者在治疗前外周血旺一羟基丁酸脱氢酶数值。通过Kaplan—Meier、X2检验分析比较血α-羟基丁酸脱氢酶与鼻咽癌患者总生存率和无进展生存率的相关性。采用Cox比例风险模型来确定预后因素。结果通过X2检验发现治疗前α-HBDH水平与N分期存在相关性(P=0.03),与年龄(P=0.528)、性别(P=0.802)、T分期(P=0.619)、临床分期(P=0.519)无相关性。通过Kaplan—Meier分析和Ⅳ。检验发现,治疗前高α-HBDH组〉107.5U/L在总生存率(OS)上小于治疗前低α-HBDH组≤107.5U/L(P=0.014)。COX比例风险回归模型显示,年龄〉48岁、T3+4期、N3期、治疗前高α-HBDH水平均与患者总生存率相关(P=0.042)。结论治疗前外周血饯一羟基丁酸脱氢酶(α-HBDH)水平与鼻咽癌总生存率相关。 喻芳 廖志伟 黄文瑾 余宏伟 艾亮梅 周同冲关键词:鼻咽癌 乳酸脱氢酶 预后 鼻咽癌患者外周血α-羟基丁酸脱氢酶水平与其预后的相关性分析 目的:探讨鼻咽癌患者外周血α-羟基丁酸脱氢酶水平与其预后的相关性。 方法:选择2008年5月至2011年10月在广州医科大学附属肿瘤医院初诊的335例鼻咽癌患者作回顾性分析。收集患者在治疗前一周内的外周血,运用生化分析... 喻芳关键词:鼻咽癌 乳酸脱氢酶 预后机制