夏虎
- 作品数:18 被引量:95H指数:7
- 供职机构:中国人民解放军第一军医大学第二附属医院更多>>
- 发文基金:广东省自然科学基金国家自然科学基金广州市科技攻关项目更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 在分子克隆中用PCR进行定点突变被引量:8
- 2002年
- 目的 在视蛋白基因启动子上增加一个XbaI酶切位点。方法 设计突变引物 ,用致突变PCR的条件引入突变 ,然后对产物作酶切鉴定并测序。结果 除人工引入突变的地方产生预期突变外 ,其它的碱基序列无改变。结论 定点突变成功。
- 李振林夏虎刘克荣安靓
- 关键词:聚合酶链反应分子克隆
- 人内皮抑素在毕赤酵母中的表达、纯化及其对小鼠肺腺癌LA795生长和转移抑制的初步研究
- 血管内皮抑素/(endostatin,ES/)是由0’Reilly等于1997年从小鼠血管内皮瘤细胞株/(EOMA/)的培养基中纯化获得的分子量为20KD的一种蛋白质。经证实其为胶原18C末端的一个内源性片段,并能特异性...
- 夏虎
- 关键词:内皮抑素T739小鼠
- 文献传递
- 红色诺卡菌细胞壁骨架加顺铂胸腔内注射治疗恶性胸腔积液36例被引量:3
- 2005年
- 目的:探讨国产红色诺卡菌细胞壁骨架(胞必佳)加顺铂对恶性肿瘤患者胸腔积液的疗效和安全性。方法:68例患者随机分为治疗组36例和对照组32例。治疗组于胸腔积液引流后用胞必佳600μg,顺铂40~60mg,地塞米松10mg,利多卡因10mL,生理氯化钠溶液40mL,胸膜腔内注射,每周1~2次,连续2~6次。对照组除不用胞必佳外外,其他治疗同治疗组。给药后每周查血、尿常规及肝肾、心功能,详细记录胸腔内给药前后的有关症状;给药后3d和2周、4周分别作B超检查。结果:治疗组有效率94.4%,对照组有效率46.9%,治疗组疗效明显优于对照组(P<0.01)。两组药物不良反应均表现为呕吐、胸痛、发热和白细胞减少等,对照组发生率较低,但与治疗组比较无显著差异。结论:胞必佳加顺铂胸腔内注射治疗恶性胸腔积液明显优于单用顺铂组,方法较为简便、安全,适用于临床推广。
- 刘梦秋何芳志徐萍夏虎晏明生林洪茂颜燕虹谢春媛
- 关键词:恶性胸腔积液胸腔内化疗红色诺卡菌细胞壁骨架顺铂
- 乙型肝炎病毒重组多表位抗原诱发的小鼠免疫应答被引量:6
- 2005年
- 目的:对乙型肝炎病毒重组多表位抗原基因在大肠杆菌中表达的融合蛋白P/BPT进行免疫原性分析,以期为HBV预防/治疗性疫苗的研制奠定实验基础。方法:构建重组质粒pWR450-1/BPT,在大肠杆菌中诱导表达并纯化蛋白P/BPT,免疫BALB/c小鼠,乳酸脱氢酶释放法检测该融合蛋白诱导小鼠的细胞毒T淋巴细胞(CTL)应答,ELISA法检测小鼠血清抗-P/BPT抗体水平,流式细胞仪检测小鼠CD4+、CD8+T淋巴细胞亚群比例,用RT-PCR方法半定量检测细胞因子特异性mRNA,MTT法测淋巴细胞增殖效应。结果:P/BPT蛋白免疫后,效靶比为100:1时,可有效诱发特异性CTL应答(P<0.05);ELISA方法测出小鼠血清抗-P/BPTIgG明显升高(P<0.05);P/BPT蛋白免疫后,可显著刺激小鼠脾淋巴细胞增值(P<0.05);CD4+T淋巴细胞和细胞因子IFN-γ的增殖和分泌水平亦有明显升高。结论:该融合蛋白可有效诱导小鼠体液免疫和细胞免疫应答,为进一步研制乙肝预防治疗性疫苗奠定了初步基础。
- 骆利敏李明夏虎董文其黄建生陈百虹
- 关键词:乙型肝炎病毒治疗性疫苗多表位
- 人内皮抑素在毕赤酵母中的表达、纯化及其对小鼠肺腺癌LA795细胞生长的抑制被引量:7
- 2002年
- 目的通过基因重组技术获得能高效分泌表达人内皮抑素的毕赤酵母菌株;观察纯化的重组人内皮抑素(rhES)对小鼠肺腺癌LA795生长的抑制作用。方法 利用氯化锂转化法将人内皮抑素基因整合入毕赤酵母基因组,获得可分泌表达人内皮抑素(endostatin)的菌株。用肝素亲和层析的方法纯化目的蛋白。观察人内皮抑素对碱性纤维生长因子(bFGF)刺激的人血管内皮细胞系ECV-304细胞增殖的作用。将接种LA795肺腺癌细胞的T739小鼠随机分成2组,分别给予rhES和磷酸缓冲盐液(PBS)皮下注射,每日1次,连续14d。观察2组小鼠肿瘤生长情况。结果经筛选获得表达量较高的转化菌株,其表达的rhES能明显抑制bFGF刺激的人血符内皮细胞系ECV-304细胞的增殖,与对照组比较具有显苫差异(P<0.001),动物实验表明其有效抑制小鼠肺腺癌LA795的生长(P<0.001)。结论用毕亦酵母作为宿主分泌表达的rhES具有良好的生物学活性,能有效抑制小鼠肺腺癌LA795的生长。
- 夏虎张琳文金序佟万成
- 关键词:重组人内皮抑素肺腺癌LA795细胞生长
- TNP-470联合重组人内皮抑素抑制小鼠肺腺癌生长的研究被引量:13
- 2003年
- 目的 :观察TNP 4 70和重组人内皮抑素 (recombinanthumanendostatin ,rhES)联合治疗对小鼠肺腺癌LA795肿瘤生长的抑制作用。方法 :用甲醇诱导能高效分泌表达重组人内皮抑素 (rhES)的毕赤酵母菌株分泌表达rhES ,将皮下接种LA795肺腺癌细胞的T739雄性近交系小鼠随机分成 3组 ,每组各 10只 ,分别给予PBS ,rhES及TNP 4 70 +rhES皮下注射 ,每日 1次 ,连续 14d ;观察各组小鼠肿瘤生长情况 ,游标卡尺测量肿瘤体积大小。断颈处死小鼠 ,原位肿瘤免疫组化观察肿瘤内部微血管密度 (microvesseldensity ,MVD)。结果 :经甲醇诱导 ,毕赤酵母重组菌分泌表达rhES ,并应用肝素亲和层析将其纯化 ;动物试验显示与PBS对照组比较 ,rhES治疗组及rhES +TNP 4 70治疗组均明显抑制小鼠肿瘤的生长 (P <0 .0 1) ,TNP 4 70 +rhES组与rhES组比较亦有显著性差异 (P <0 .0 1)。原位肿瘤免疫组化显示联合治疗组抑制血管生成更显著 (P <0 .0 1)。结论 :TNP 4 70联合rhES治疗对小鼠肺腺癌LA795生长的抑制效果比单独使用rhES的治疗效果更佳 ,具有良好的协同治疗作用。
- 夏虎骆利敏文金序佟万成
- 关键词:TNP-470重组人内皮抑素小鼠肺腺癌
- 乙型肝炎病毒多表位治疗性抗原基因的合成、表达及抗原性研究被引量:10
- 2003年
- 目的研究乙型肝炎病毒多表位治疗性疫苗基因的合成、表达及其产物的抗原性。方法设计、并合成乙型肝炎病毒多表位抗原基因BPT,克隆入融合表达载体pWR450-1,构建重组质粒PWR/BPT。在大肠杆菌中表达乙型肝炎多表位抗原蛋白并纯化该蛋白,并用Western-blotting方法初步检测该抗原蛋白的抗原性。结果成功构建了融合表达载体PWR/BPT,在大肠杆菌中表达出乙型肝炎多表位抗原蛋白,Western-blotting 检测显示该蛋白具有良好抗原性。结论HBV多表位治疗性抗原基因的设计是成功的,其在大肠杆菌中表达的重组融合蛋白具有良好的抗原性,可能是较理想的HBV治疗性疫苗候选物。
- 骆利敏李明夏虎黄建生陈百虹王萍
- 关键词:乙型肝炎多表位治疗性疫苗
- 血清HCV抗原检测研究进展被引量:1
- 2003年
- 目前,抗HCV检测已广泛应用于HCV感染的诊断及大规模血液筛查。但由于HCV感染窗口期的存在以及某些耐受人群未发生血清转化等,使抗HCV检测未能准确反映患者体内HCV的感染状态。而用于确诊及定量检测HCV感染的PCR、bDNA和NASBA等技术也有各自的局限性。血清HCV抗原的酶免疫检测技术(HCAgEIA)为HCV感染的早期诊断、大规模筛查、定量检测等提供了较好的技术路线。本文综述了该技术的原理、流程及其效果评估。
- 夏虎
- 关键词:血清HCV抗原HCV感染
- 急诊室内开展急性心肌梗死溶栓治疗87例疗效观察被引量:3
- 2001年
- 对急性心肌梗死(AMI)的溶栓治疗,公认的原则是发病后越早越好。国内有条件的医院都已改为急诊室内甚至院前溶栓治疗,避免患者入住专科病房后方实施该治疗措施。本文介绍了作者所在医院在急诊室内对87例AMI病人实施早期静脉溶栓治疗的效果和经验,对同级别医院比较医疗效果有一定的参考价值。
- 张琳夏虎
- 关键词:心肌梗死静脉溶栓尿激酶急诊
- 视蛋白基因启动子的克隆和鉴定
- 2003年
- 目的 克隆出视蛋白基因启动子。方法 以小鼠全基因组为模板 ,用PCR法克隆出目的大小的片断。然后连接到T -载体上作酶切鉴定 ,最后测序。结果 酶切结果与预期相符 ,测序结果与公布序列完全一致。
- 李振林夏虎周运富安靓
- 关键词:基因启动子基因克隆聚合酶链反应酶切鉴定