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表面活性剂对活跃链霉菌产那西肽发酵的影响被引量：2: 2015年; 目的研究Triton X-100、Ca Cl2、DMSO、山梨醇、SDS、Tween-80、CTAB等表面活性剂对活跃链霉菌发酵产那西肽的影响。方法采用单因素实验研究活跃链霉菌的基础代谢以及表面活性剂加入时间对那西肽效价的影响;采用响应面法对表面活性剂添加浓度进行优化。结果基础代谢研究表明,活跃链霉菌产那西肽合成相对滞后于菌体生长。多种表面活性剂均显著影响那西肽的生物合成,整体表现为低浓度促进、高浓度抑制。表面活性剂依其类型及加入时机的不同,对那西肽产量的影响表现出组间类型差异性及组内时间依赖性。结论 DMSO、Ca Cl2、Triton X-100在低浓度范围内对那西肽产量的促进效果最为显著;分别在24、24和48h以DMSO 0.808mg/m L、Ca Cl2 0.799mg/m L和Triton X-100 0.574mg/m L的浓度为最佳添加浓度,该条件下那西肽效价达到931.493μg/m L,比优化前提高了7.73%。; 赵世光李德才薛正莲吴安宁周扬华骏; 关键词：那西肽表面活性剂发酵响应面

24孔板培养活跃链霉菌合成那西肽条件的优化被引量：2: 2015年; 目的优化24孔板培养活跃链霉菌XW产那西肽的发酵条件。方法采用单因素实验和响应面法对24孔板的发酵条件进行优化。结果得到活跃链霉菌XW 24孔板发酵产那西肽的最优发酵条件为:种子培养基装液量2.55 m L,发酵培养基装液量0.93m L,发酵时间121h。结论通过对发酵条件的优化,可以明显提高24孔板发酵产那西肽的效价达到882.25μg/m L,实验值与模型预测值较接近,吻合度较高,较初始效价675.63μg/m L提高了30.58%。研究结果表明24孔板发酵与摇瓶发酵之间有良好的相关性,相关系数R为0.883。; 周扬薛正莲秦艳飞赵世光刘艳; 关键词：那西肽响应面优化

常压室温等离子体(ARTP)诱变及高通量筛选那西肽高产菌株被引量：24: 2015年; 采用新型常压室温等离子体(ARTP)诱变活跃链霉菌(Streptomyces actuosu),并应用抑菌圈和48孔板培养方法高通量筛选高产那西肽菌株。研究表明抑菌圈径的大小与48孔板效价之间以及48孔板效价与摇瓶效价之间均有较好的相关性,系数R分别达到0.534和0.896。通过多轮ARTP诱变及高通量筛选最终获得了3株相对效价提高50%以上的遗传性能稳定的突变株。ARTP诱变技术作为获得那西肽高产菌株的有效途径,与传统摇瓶发酵筛选相比,48孔板及抑菌圈法能显著提高那西肽高产菌株的筛选效率。; 周扬薛正莲夏俊夏俊张翀; 关键词：那西肽高通量筛选

酶标仪法测定γ-氨基丁酸被引量：14: 2014年; 通过诱变所获得的乳酸菌突变株较多,经96孔板发酵后用传统的分光光度计法测定γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid,GABA)的含量效率低、成本高。为快速、高效地测定GABA的含量,基于Berthelot反应,该实验采用酶标仪法测定GABA含量并对影响该方法的主要因素进行优化。确定了在测定GABA的适宜反应体系中0.2 mol/L pH10.0硼酸盐缓冲液为0.75 mL,6%的重蒸苯酚为2.5 mL,有效氯5.2%的NaClO溶液为2 mL时,酶标仪测定可获得较高的GABA含量,同时进行了精密度试验。最后,通过对诱变后的75株突变株经96孔板发酵后,分别使用分光光度计与酶标仪测定发酵液中GABA的含量并进行拟合,以验证该方法的可行性。得出2种方法的相关系数R=0.949 3,显示2种测定方法具有很好的一致性。该实验结果表明酶标仪法能简便、快速、准确地测定发酵液中GABA的含量,为后续高通量选育GABA乳酸菌奠定了基础。; 梁慧薛正莲周扬汪冬冬叶杨; 关键词：Γ-氨基丁酸分光光度计酶标仪

产γ-氨基丁酸乳酸菌的发酵优化被引量：1: 2015年; 为显著提高γ-氨基丁酸的产量,对发酵培养基的装液量、接种量、碳源、氮源、L-谷氨酸(L-Glu)的添加量进行了单因素优化,在单因素基础上进行响应面优化,利用Plackett-Burman得出对产γ-氨基丁酸影响最大的因素分别为:葡萄糖、玉米浆、接种量以及发酵时间,用最陡爬坡试验逼近关键因素的最大响应区域。在此基础上,采用Box-Behnken试验设计对培养基组分进行进一步优化,得出4种显著因子葡萄糖、玉米浆、接种量以及发酵时间的最佳结果分别为22.0g·L-1、15.0g·L-1、19%和48h。采用优化培养基后,γ-氨基丁酸的产量可达到12.030g·L-1,较原始培养基的产量增加了5.602g·L-1。; 梁慧薛正莲王洲周扬; 关键词：发酵优化响应面 Γ-氨基丁酸

那西肽产生菌高通量选育: 那西肽(nosiheptide)是一种主要由活跃链霉菌(Streptomyces actuosus)产生且对革兰氏阳性菌有明显作用的一种含硫多肽类抗生素,是一种动力体内不残留、对环境影响小的饲料添加剂,目前工业发酵总体水...; 周扬; 关键词：那西肽高通量筛选微孔板; 文献传递

原生质体诱变及融合选育那西肽高产菌株被引量：10: 2016年; 目的提高工业发酵那西肽生产水平,获得那西肽高产菌株。方法利用溶菌酶剥离菌体细胞壁制备原生质体,通过等离子(ARTP)诱变与双亲灭活原生质体融合技术选育那西肽高产菌株。结果通过对原生质体制备参数甘氨酸浓度,溶菌酶浓度以及酶解时间优化,确定了甘氨酸最适浓度0.6%,溶菌酶最适浓度50mg/m L,酶解时间70min。通过ARTP诱变筛选出突变株AH-12产量提高18%。亲本最佳紫外灭活时间为4min,最佳热灭活条件为65℃水浴50min。对融合子进行摇瓶选育,得到了GSM-4,GSM-5两株效价提高15%以上菌株。结论利用原生质体诱变及融合方法可获得那西肽高产菌株。; 公维亮薛正莲周扬张勇张奥沈强; 关键词：那西肽原生质体制备原生质体诱变原生质体融合

一种那西肽活跃链霉菌高产菌株的高通量筛选方法: 本发明提供了一种那西肽活跃链霉菌高产菌株的高通量筛选方法，利用新型ARTP育种系统诱变那西肽活跃链霉菌，通过响应面法优化24深孔板发酵条件，并且利用24深孔板培养法建立高通量筛选突变体的方法，获得高产稳产那西肽突变株。本...; 薛正莲周扬秦艳飞赵世光王洲; 文献传递

基于添加物调控提高那西肽发酵效价: 2015年; 研究不同添加物对活跃链霉菌产那西肽发酵过程的影响,以提升那西肽发酵效价.以单因素实验考察7种添加物对那西肽发酵效价的影响,研究其各自的较优添加水平及添加时间;综合单因素实验结果,以那西肽效价为指标,采用响应面法对硫酸锰、硝酸镧、硝酸铈的添加浓度进行优化.供试添加物均不同程度提升了那西肽发酵水平,提升效果依次为EDTA>硫酸锰>硝酸铈>橄榄油>硝酸镧>壳聚糖>制霉素.分别在发酵24h添加9.27μg/L硫酸锰,96h添加5.15μmol/L硝酸镧和0.9mmol/L硝酸铈,那西肽发酵效价达到948.08μg/mL,比优化前提高了30.97%.基于添加物调控策略可有效提升那西肽发酵效价.; 李德才华骏周扬赵世光薛正莲; 关键词：那西肽响应面法

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周扬