陆青
- 作品数：7 被引量：21H指数：3
- 供职机构：上海市普陀区人民医院更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 定量测定HCG的斑点金免疫渗滤试验的临床评价被引量：3
- 2004年
- 目的 评价斑点金免疫渗滤试验 (DGIFA)定量测定血清和尿液人绒毛膜促性腺激素 (HCG)的可靠性。方法 分别用化学发光免疫分析法 (CLIA)和DGIFA定量测定HCG试剂盒 (HCG DOT)及DGIFA定量仪测定 4 0份血清样品的HCG含量 ,分别用胶体金免疫层析定性试验 (GICA)和HCG DOT及DGIFA定量仪测定2 70份尿液样品的HCG水平 ;作回收试验和不精密度试验。结果 CLIA和DGIFA定量测定血清样品HCG的相关性好 ;GICA检测阴性的 16 2份尿液样品用HCG DOT测定有 9份为背景红色所致的假阳性 ,1份为血尿导致的假阳性 ,另 2份为阳性 ;GICA检测阳性的 95份和可疑阳性的 13份尿液样品用HCG DOT测定 ,结果均为阳性 ;HCG DOT定量测定高、低浓度HCG血清样品和HCG尿液样品的变异系数 (CV)分别为 5 .38%、4 .13%和 4 .73%、6 .0 1% ;HCG DOT定量测定血清和尿液的HCG回收率分别为 94 .7%和 89.9%。结论 DGIFA定量测定尿液HCG ,对尿液GICA结果可疑者可在妊娠早期作出明确的判断 ;DGIFA定量检测血清和尿液HCG的精密度良好 ,回收率较高 ,适合门急诊应用。
- 杨海敏陆青朱晴晖杨晶陈琦
- 关键词：HCG斑点金免疫渗滤试验化学发光免疫分析法
- 结直肠癌C-erbB-2基因启动子CpG岛甲基化状态及其与C-erbB-2蛋白表达的关系被引量：4
- 2008年
- 目的了解结直肠癌组织C-erbB-2基因启动子区CpG岛甲基化状态、C-erbB-2蛋白表达水平及两者之间的关系。方法取经病理确诊的43例结直肠癌组织和相应癌旁组织,分别用甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)和免疫组织化学法(IHC)检测C-erbB-2启动子区CpG岛的甲基化和C-erbB-2蛋白表达水平。结果癌组织和癌旁组织中C-erbB-2启动子区CpG岛甲基化率分别为44.2%和74.4%,差异具有统计学意义(P=0.004)。癌组织和癌旁组织中C-erbB-2蛋白过度表达率分别为67.4%和27.9%,差异具有统计学意义(P=0.000)。C-erbB-2蛋白表达水平与肿瘤分期相关。结直肠癌组织C-erbB-2启动子区CpG岛甲基化状态与C-erbB-2蛋白表达水平呈显著相关(r=0.331,P=0.03)。结论结直肠癌中C-erbB-2基因启动子区CpG岛的低甲基化可能在C-erbB-2蛋白过度表达中起一定作用,有望成为有用的肿瘤分子诊断标记和治疗靶点。
- 金中淦袁亚陆青杨惠黎朱晴晖
- 关键词：C-ERBB-2基因CPG岛甲基化甲基化特异性聚合酶链反应结直肠癌
- 检测细胞内细胞因子的生物素-链霉亲和素免疫细胞化学法的建立及初步应用
- 2006年
- 目的 建立检测细胞内细胞因子的生物素-链霉亲和素免疫细胞化学法（BSA—ICC）并作临床初步应用。方法 从健康人外周血单个核细胞（PBMC）中富集CD4细胞，加入莫能霉素，用不同浓度的佛波醇酯（PMA）和钙离子载体（A23817）诱导CD4细胞不同时间，比较其胞内表达白细胞介素-2（IL-2）／白细胞介素-4（IL-4）的细胞百分率，确定最适诱生条件；用不同稀释度的IL-2McAb、IL-4McAb、不同浓度的生物素化羊抗鼠IgG（bio-SAMIgG）和辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素（HRP-SA）作棋盘配比试验，确认McAb、bio-SAMIgG和HRP—SA的最适浓度，根据上述结果建立了检测细胞内细胞因子的BSA—ICC法。用所建方法检测20名健康献血员、16例妇科良性疾病和18例妇科恶性肿瘤患者CD4细胞中表达IL-2／IL-4细胞的百分率。结果 诱导CD4细胞胞内表达IL-2和IL-4的细胞最高百分率的PMA和A23817浓度分别为100μg/L和2．0μmol／L，诱导高峰时间分别为5和7h，BSA-ICC法中所用IL-2McAb、IL-4McAb最适稀释度分别为1：20和1：40，bio—SAMIgG和HRP-SA浓度分别为10～15μg/ml和15μg/ml。20名健康献血员、16例妇科良性疾病和18例妇科恶性肿瘤患者CD4细胞中分泌IL-2的细胞百分率分别为（45．90±4．39）％、（37．28±2．67）％和（25．19±3．49）％，分泌IL-4的细胞百分率分别为（10．5±1．50）％、（9．94±1．06）％和（16．13±2．50）％，IL-2^＋CD4^＋／IL-4^＋CD4^＋比值分别为3．65±0．94、3．55±0．76和1．27±0．26。结论 所建方法可用于T辅助（Th）细胞亚型的测定，从而判断Th细胞的极化状态。妇科恶性肿瘤患者Th细胞功能失衡极化，呈Th2反应，可能与恶性肿瘤的发生有关。
- 朱晴晖陆青刘德琮
- 关键词：细胞内细胞因子生物素-链霉亲和素免疫细胞化学法妇科恶性肿瘤
- B淋巴细胞的活化标志及其在慢性肾衰竭的临床意义被引量：1
- 2003年
- 目的 以CD2 3分子作为B淋巴细胞活化的标志 ,观察慢性肾衰 (CRF)维持性血液透析 (HD)患者B淋巴细胞激活状态。方法 以金黄色葡萄球菌CowanI株菌体 (SAC)与健康人外周血单个核细胞 (PBMC)数 5 0∶1的比例 ,以终浓度 5 0 μg/L的佛波醇酯 (PMA)分别培养PBMC 12h、2 4h和 5 0h ;用生物素链霉亲和素免疫细胞化学法 (BSA ICC)检测CD2 3 +细胞百分率 ;以速率散射比浊法检测SAC或PMA刺激 5 0h的上清液中IgG水平 ;以双抗体夹心ELASA检测血清可溶性CD2 3 (sCD2 3 )。结果 未经刺激的健康人和CRF HD患者PBMC中CD2 3 +细胞百分率分别为 ( 6.6± 0 .9) %和 ( 17.9± 3 .7) %差异有显著性 (P <0 .0 1)。健康人PBMC经SAC刺激12h、2 4h、5 0h后CD2 3 +细胞百分率分别为 ( 8.8± 1.7) %、( 13 .0± 1.6) %和 ( 16.2± 1.9) % ,与无药对照管比较差异有显著性 (P <0 .0 1) ;经PMA刺激 12h、2 4h后CD2 3 +细胞百分率分别为 ( 17.0± 2 .3 ) %、( 3 1.5± 2 .9) % ,与无药对照管比较差异有非常显著性 (P <0 .0 0 1) ;经SAC或PMA刺激 5 0h培养上清液IgG含量分别为 ( 9.1± 4.6) g/L和 ( 14.6± 5 .7)g/L ,后者与无药对照管 ( 7.3± 3 .7g/L)差异有显著性 (P <0 .0 1)。健康人和CRF HD患者血清sCD2 3含量分别为 ( 1.8± 0 .
- 陆青许友山刘德琮朱晴晖
- 关键词：B淋巴细胞慢性肾衰竭
- 脑血管病患者血浆同型半胱氨酸水平及MTHFR基因多态性分析
- 2005年
- 目的探讨血浆同型半胱氨酸(homocysteine Hcy)水平与脑血管病的关系及其水平升高的遗传和营养因素。方法对130例脑梗死和77例脑出血患者及65例正常对照者采用高效液相色谱(HPLC)法检测血浆Hcy水平、放射免疫法测定叶酸、VitB_(12)水平,运用多聚酶链反应-限制性内切酶片段长度多态性技术(PCR-RFLP)分析亚甲基四氢叶酸还原酶(methylenetetra-hydrofolate reductase MTHFR)基因多态性,并加以对照分析。结果脑梗死组、脑出血组血浆Hcy水平分别为19.87±11.67μmol/L、20.15±10.12 μmol/L.均显著高于对照组11.41±3.28 μmol/L(P<0.01);而脑梗死组与脑出血组间无显著差异(P>0.05)。MTHFR 有三种基因型,脑梗死组、脑出血组和对照组 C/C 型基因频率分别为0.39、0.46、0.53,C/T 型分别为0.35、0.31、0.30,T/T 型分别为0.26、0.23、0.17,T 等位基因频率分别为0.43、0.39、0.32,各基因型及等位基因频率无显著差异(P>0.05)。各组中 T/T 基因型血浆 Hcy 水平与 C/C 型比较差异有显著性(P<0.01),而病例组中C/T型血浆Hcy水平与C/C型相比亦有显著差异(P<0.01)。脑梗死组与脑出血组叶酸、VitB_(12)水平显著低于正常对照组(P<0.01)。结论血浆 Hcy 水平升高是脑血管病的主要危险因素。MTHFR基因677位点碱基 C→T突变可能是血浆Hcy水平升高的主要影响因素,但与脑血管病的直接关系有待进一步研究,而叶酸VitB_(12)与Hcy水平也有关联。
- 蔡一敏林琳周维智陆青
- 关键词：同型半胱氨酸亚甲基四氢叶酸还原酶脑血管病基因多态性
- 亚甲基四氢叶酸还原酶基因多态性及血浆同型半胱氨酸水平与脑血管病的关系被引量：12
- 2006年
- 目的探讨亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因多态性及同型半胱氨酸(Hcy)水平与脑血管病的关系。方法应用聚合酶链反应-限制性片断长度多态性(PCR-RFLP)技术分析223例脑血管病患者及100名正常对照者的MTHFR基因多态性,同时应用高效液相色谱法(HPLC)测定其血浆Hcy水平。结果MTHFR基因677位T等位基因携带频率脑血管病组(48.9%)显著高于正常对照组(30.5%,P<0.05),在脑出血患者组(53.3%)与脑梗死患者组(47.2%)之间差异无显著性(P>0.05);脑血管病组血浆Hcy水平[(20.01±8.89)μmol/L]显著高于对照组[(9.12±3.19)μmol/L,P<0.05],而脑出血患者组[(21.71±7.72)μmol/L]与脑梗死患者组[(19.35±8.51)μmol/L]间差异无显著性(P>0.05);各组中MTHFR TT型、TC型血浆Hcy浓度明显高于CC型。结论MTHFR C677T突变可引起血浆Hcy水平升高,从而增加患脑血管病的危险度。
- 肖艳群蒋玲丽陆青陆银华朱晴晖
- 关键词：亚甲基四氢叶酸还原酶基因多态性同型半胱氨酸脑血管意外
- 一种简便的固相单抗富集CD4^+细胞方法被引量：1
- 2002年
- 目的 探索建立一种富集CD4 + 细胞的方法 ,藉以提高免疫细胞化学法计数Th1/Th2细胞的准确性。方法 取 2 1份健康人外周抗凝血 ,无菌条件下分离单个核细胞 (PBMC) ,用CD4McAb包被 2 4孔细胞培养板 ,加入PBMC ,温育后吸弃未结合细胞 ,继而吸打使结合于板上的细胞脱落 ,收集细胞 (阳性选择 ) ;用CD8McAb、CD16McAb、WuBMcAb包被 2 4孔细胞培养板 ,加入PBMC ,温育后吸取未结合细胞 (阴性选择 )。用生物素 链霉亲和素免疫细胞化学法检测富集前及用两种选择方法富集所得细胞中CD4 + 细胞 ,计算百分率、活细胞率和CD4 + 细胞回收率。结果 富集前 2 1份样品的PBMC中CD4 + 细胞百分率 4 3.7%± 3.1% ,经阳性选择和阴性选择后CD4 + 细胞百分率分别为 90 .9%± 2 .8%和 76 .2 %± 2 .5 % ,经卡方检验 ,x2 >x20 .0 0 1,差异有非常显著性 ,阳性选择富集的CD4 + 细胞纯度显著高于阴性选择。经阳性选择和阴性选择后 ,CD4 + 细胞回收率分别为 6 4 .3%± 4 .9%和 6 9.7%± 5 .2 % ,经卡方检验 ,x2 >x20 .0 0 1,差异有非常显著性 ,阴性选择法的细胞回收率明显高于阳性选择法。富集后活细胞率保持在 95 %以上。结论 所建立的固相单抗方法可有效富集CD4 + 细胞并保持很高的活细胞率 ,其中阳性选择是首选方法 ;CD4 + 细?
- 朱晴晖陆青刘德琮
- 关键词：阴性选择
