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外源glnA基因干扰大肠杆菌的代谢: 2009年; 采用分子生物学的方法构建了含Bacillus subtilis glnA基因的重组菌株Escherichia coli DH5α(pMD19-glnA),用毛细管电泳和核磁共振对重组菌株的转化谷氨酸的产物进行定性鉴定,并进一步通过荧光定量RT-PCR测定谷氨酰胺合成酶基因(glnA)mRNA水平的相对表达量,最后用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳对蛋白的相对表达情况进行了分析。结果表明重组菌株并没有增加谷氨酰胺的产量,而是明显增加了γ-氨基丁酸(GABA)的产量。实验表明重组菌株中的glnA基因可以正常转录,但是谷氨酰胺合成酶的蛋白表达量并没有增加。这种外源基因干扰大肠杆菌代谢的现象值得进一步研究。; 杜娟吴健戴桂馥王春阳周新钦宋明辉李珏李季伦; 关键词：谷氨酰胺合成酶毛细管电泳荧光定量RT-PCR SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳

微生物转化法高产γ-氨基丁酸工艺研究: 戴桂馥吴健韩静王卫富韩少印李季伦马文艳周新钦杜鹃王春阳谭印成樊伟丽张泽斌杜习强杜明荦; （1）任务来源：“微生物转化法高产γ-氨基丁酸工艺研究”项目是自选项目，并得到郑州大学博士启动基金的支持。　　（2）技术原理及性能指标：技术原理是采用从自然界中筛选得到的高谷氨酸脱羧酶活性的微生物，利用静息细胞转化法，以...; 关键词：; 关键词：Γ-氨基丁酸生物转化

高产γ-氨基丁酸的大肠杆菌菌株及其γ-氨基丁酸生产方法: 本发明公开了一株安全、高产γ-氨基丁酸的大肠杆菌(Escherichia coli) ZS-07菌株以及利用其合成γ-氨基丁酸的方法，属生物化学领域。该大肠杆菌菌株保藏编号为CGMCC No.3562，利用其含有的谷氨酸...; 戴桂馥吴健周新钦王卫富马文艳王廷王春阳谭印成蒋盛耀李季伦

志贺菌耐多药外排泵emrE基因作用分析被引量：4: 2009年; 目的对临床耐多药志贺菌株H24的1种小多重耐药性家族(SMR)外排泵emrE基因进行定向分子进化,研究基因突变增强emrE外排泵耐药性的潜力,调查志贺菌外排泵基因emrE基因垂直进化对临床耐药发展的影响。方法通过用体外易错PCR(EP-PCR)方法对emrE基因进行随机突变实验,用微量稀释生长曲线法进行菌株的耐药性筛选,用荧光实时定量RT-PCR测定基因表达情况,应用DNA分析软件DNAStar进行生物信息学分析。结果在31个突变子中筛选到了突变子ep2-emrE(DH5α),它的emrE基因有6个氨基酸突变,分别为Thr-28→Ala,Cys-39→Ser,Tyr-40→终止子,Ser-72→Arg,Leu-93→Phe,Ile-101→Phe。它不但增强四环素和红霉素的耐药能力,还产生新的氯霉素耐药能力。结论尽管emrE基因较易获得新增耐药性,但在志贺菌对四环素、红霉素等抗生素耐药性发展中,emrE基因的进化突变没有被筛选,表明有其他能力更强的耐药基因在突变进化中起作用。; 吴健穆瑞瑞任存邦王春阳李珏张卫东范清堂段广才; 关键词：志贺菌耐药性分子进化

高产γ-氨基丁酸的大肠杆菌菌株及其γ-氨基丁酸生产方法: 本发明公开了一株安全、高产γ-氨基丁酸的大肠杆菌(Escherichia coli) ZS-07菌株以及利用其合成γ-氨基丁酸的方法，属生物化学领域。该大肠杆菌菌株保藏编号为CGMCC No.3562，利用其含有的谷氨酸...; 戴桂馥吴健周新钦王卫富马文艳王廷王春阳谭印成蒋盛耀李季伦; 文献传递

河南省高校健身气功运动队组建及发展对策研究: 本文对河南省高校健身气功运动队组建及发展对策进行研究，以参加河南省首届高校健身气功比赛的31所院校为调查对象，运用文献资料法、问卷调查法、访谈法、数理统计法和逻辑分析法等方法，了解各高校健身气功运动队的组建方式。研究目的...; 王春阳; 关键词：健身气功

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王春阳