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林浩铭
作品数:
2
被引量:1
H指数:1
供职机构:
中山大学
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发文基金:
国家自然科学基金
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相关领域:
医药卫生
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合作作者
沈浩元
广州医学院第一附属医院
王炜
广州医学院第一附属医院
丘昶儒
广州医学院第一附属医院
程卫
广州医学院第一附属医院
沈昌理
中山大学
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1篇
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靶向性反向半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3重组腺病毒诱导肝癌细胞凋亡的实验研究
被引量:1
2010年
目的观察靶向性反向半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(r—caspase-3)重组腺病毒体外诱导肝癌细胞凋亡的效果和特异性。方法构建甲胎蛋白(AFP)增强子和白蛋白(ALB)启动子腺病毒载体(pAdTrack.EATP.PALB),亚克隆r—caspase-3至载体pAdTrack—EAFP-PALB,PmeI线性化pAdTrack—EAFP.PALB/r—easpase.3,电转化至BJ/AdEasy菌,获得重组腺病毒骨架pAdeasy—EnrP-PALB/r.caspase一3。PacI酶切后脂质体转染AD293细胞进行包装、扩增、获得病毒。绿色荧光蛋白(GFP)监测病毒滴度和感染效率;RT-PCR和Western印迹法检测r-caspase.3在HepG2细胞中的表达;流式细胞术检测其特异性诱导肝癌细胞凋亡的作用。结果穿梭载体pAdTrack.EAFP-PALB/r—caspase-3酶切、测序正确。穿梭载体、pAdeasy-1载体同源重组后PCR及PacI酶切鉴定结果表明pAdeasy.E&FP-PALB/r—caspase-3重组成功。转染AD293细胞后可观察到GFP的表达。病毒感染HepG2细胞总DNA经RT—PCR和Western印迹均可检测到目的基因的表达,证实Ad-E—FP-PAL/dr—caspase-3病毒颗粒包装成功;靶向性r—easpase-3重组腺病毒感染各组细胞24h后,各组凋亡指数分别为:HepG细胞48.2%、7721细胞17.7%、L-02细胞7.3%、MDA—MB-231细胞0%。结论成功构建了靶向性Ad.EAFP-PALB/r—caspase-3重组腺病毒,体外实验表明其具有凋亡诱导靶向性,为进一步研究靶向性r—caspase-3基因治疗肝细胞肝癌及其生物学功能提供了依据。
王炜
沈浩元
丘昶儒
林浩铭
程卫
关键词:
腺病毒
半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3
肝肿瘤
靶向性
耻骨上小切口行双精索静脉结扎术
目的 评价经耻骨上横切口一期行双侧精索静脉曲张结扎术的临床效果.方法 2008年至2009两年间采用耻骨上横切口一期行双侧精索静脉曲张结扎术共238例,年龄12-35岁,经临床及超声确诊精索静脉曲张2-3级,其中152例...
沈昌理
林浩铭
关键词:
精索静脉曲张
睾丸活检
男性不育
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