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沈浩元: 作品数：13 被引量：37H指数：4; 供职机构：孝感市中心医院更多>>; 发文基金：国家自然科学基金广东省医学科学技术研究基金更多>>; 相关领域：医药卫生更多>>

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急性结石性梗阻性胆囊炎的胆囊切除被引量：8: 2011年; 目的:探讨使用强生Ultracision scalpel system Gen04超声刀不分离胆囊床、不解剖胆囊三角的胆囊切除的临床经验和可行性。方法:回顾性分析我院2005-2009年期间27例急性梗阻性结石性胆囊炎患者使用超声刀一期切除胆囊的临床治疗经验。结果:所有患者均获手术成功,术后疼痛即明显缓解,1～3d后体温、白细胞逐渐恢复至正常。术后引流管放置3～7d,所有患者未发生感染、出血、胆漏等并发症;随访1～5年,脂肪泻、消化不良等消化道症状均在6个月后逐渐恢复,但未发现结石复发、胆道狭窄、胆囊切除术后综合征(PCS)发生。结论:伴有严重感染的急性梗阻性胆囊炎,使用超声刀不分离胆囊床、不解剖胆囊三角的胆囊切除是安全可靠的有效方法。; 王炜刘猛沈浩元; 关键词：胆囊炎急性胆囊切除超声刀

预实验中大鼠原位肝移植常见失败原因及对策被引量：3: 2010年; 目的分析预实验中大鼠原位肝移植常见的失败原因,并提出相应对策。方法回顾性分析2008年3月至2009年3月期间预实验中采用改良Kamada"二袖套"法行大鼠原位肝移植手术120例的资料。结果 120例大鼠原位肝移植预实验中失败原因有:无肝期延长66例,肝上下腔静脉吻合失败61例,肝下下腔静脉吻合失败17例,门静脉吻合失败12例,麻醉不满意8例。成功21例(17.50%)。结论加强显微外科技术的操作训练,特别是肝上下腔静脉的吻合,可提高大鼠原位肝移植手术成功率。; 丘昶儒王炜程卫沈浩元; 关键词：原位肝移植

肝癌组织中Bcl-2和NF-κB的表达与AFP相关性的研究被引量：4: 2011年; 目的:观察凋亡相关基因Bcl-2、核因子NF-κB在肝细胞性肝癌(HCC)组织中的表达,并探讨二者与AFP之间的关系。方法:采用免疫组织化学方法检测40例HCC组织(其中AFP阳性20例,AFP阴性20例)和10例良性肿瘤组织中Bcl-2、NF-κB的表达。结果:40例HCC患者Bcl-2阳性表达率为45.0%,NF-κB阳性表达率为57.5%;其中AFP阳性细胞Bcl-2表达率为55.0%,AFP阴性细胞为35.0%;AFP阳性细胞NF-κB表达率为75.0%,AFP阴性细胞为40.0%。HCC细胞NF-kB和Bcl-2的表达呈正相关(r=0.778,P<0.01)。结论:Bcl-2、NF-κB的异常表达同HCC的抗凋亡和耐药性有一定关系,AFP阳性HCC细胞的Bcl-2、NF-κB阳性表达率更高。Bcl-2和NF-κB可以考虑作为预后的判断指标之一。; 王炜沈浩元刘猛姜开文李丰; 关键词：肝细胞甲胎蛋白 BCL-2 NF-ΚB

淋巴细胞预输注诱导大鼠移植肝Fas-L表达: 2011年; 目的探讨预输注5-FU处理过的同种异基因淋巴细胞对大鼠移植肝的影响。方法实验分4组,均行Wistar大鼠至SD大鼠的肝移植。对照组:仅行肝移植;单纯淋巴细胞组:受体于术前第7天及第4天各输注Wistar大鼠淋巴细胞(5×106个/ml)悬液1 ml;低浓度5-FU预处理组:受体于术前第7天及第4天各输注经7.5μg 5-FU处理过的Wistar大鼠淋巴细胞(5×106个/ml)悬液1 ml;高浓度5-FU预处理组:受体于术前第7天及第4天各输注经15μg 5-FU处理过的Wistar大鼠淋巴细胞(5×106个/ml)悬液1 ml。于术后第7天处死SD大鼠,行移植肝脏Fas-L及CD8免疫组化检测。结果肝小叶及汇管区中,低浓度5-FU预处理组Fas-L表达阳性细胞的IOD均高于对照组、单纯淋巴细胞组和高浓度5-FU预处理组(P<0.05);单纯淋巴细胞组与高浓度5-FU预处理组比较差异无统计学意义(P>0.05)。肝小叶中,CD8+T淋巴细胞的IOD在单纯淋巴细胞组、低浓度5-FU预处理组和高浓度5-FU预处理组的差异无统计学意义(P>0.05);在汇管区,低浓度5-FU预处理组的CD8+T淋巴细胞IOD低于单纯淋巴细胞组、高浓度5-FU预处理组和对照组(P<0.05)。结论预输注经低浓度5-FU处理的同种异基因淋巴细胞可以较好地诱导大鼠肝移植免疫耐受,其可能的机理是通过诱导移植物中Fas-L表达的上调,从而获得免疫耐受。; 王炜沈浩元刘猛; 关键词：免疫耐受 FAS配体

改良单人操作大鼠原位肝移植模型的建立被引量：4: 2011年; 目的探索改良传统手术方法单人操作大鼠原位肝移植模型的建立方法。方法 200只(100对)大鼠建立原位肝移植模型,其中80只(40对)进行正式实验,采用改良的Kamada二袖套法,再对手术中关键步骤进行改良,并对术中及术后恢复情况进行分析。结果本组80只大鼠原位肝移植手术均顺利完成。供体手术时间为(28.5±2.4)min,供肝修整时间为(10.2±1.8)min;肝上下腔静脉吻合时间为(15.3±1.9)min,门静脉吻合时间为(3.4±1.2)min,受体无肝期为(23.8±1.9)min,肝下下腔静脉吻合时间为(5.1±2.1)min,胆道重建时间为(3.1±0.9)min。整个手术过程中供、受体出血量均不足0.5 ml。40只受体大鼠,术后2 d成活率为90.0%(36/40),3只死于肝上下腔静脉缝合处出血,1只死于无肝期过长;术后7 d成活率为82.5%(33/40),3只均死于腹腔内感染。结论在单人操作建立大鼠原位肝移植模型中,通过腹主动脉和下腔静脉整块游离行腹主动脉灌注供肝、精细解剖左隔下静脉三角、术中热凝控制出血等方面的改良可减少手术并发症的发生,保证供肝质量,提高大鼠成活率。; 沈浩元王炜刘猛李丰姜开文; 关键词：原位肝移植动物模型

靶向性重组腺病毒对裸鼠肝癌种植瘤的治疗作用: 2011年; 目的观察靶向性重组腺病毒Ad-EAFP-PALB/r-Caspase-3对原发性肝癌HepG2细胞及裸鼠皮下种植瘤的治疗作用。方法采用先前构建的靶向性重组腺病毒Ad-EAFP-PALB/r-Caspase-3感染肝癌HepG2细胞、乳腺癌MDA-MB-231细胞以及正常肝L-02细胞,观察细胞形态学改变,并通过流式细胞术检测细胞凋亡指数;采用裸鼠皮下种植瘤模型、重组腺病毒瘤内给药治疗,观察肿瘤生长情况及病理学改变。结果流式细胞学可见HepG2细胞凋亡和明显的凋亡峰,MDA-MB-231和L-02细胞凋亡指数分别为0和7.3%,明显低于HepG2细胞(48.2%),P<0.01。种植肿瘤细胞2周后HepG2细胞组、MDA-MB-231细胞组和对照组肿瘤体积大小分别为(0.26±0.31)cm3、(0.25±0.15)cm3和(0.26±0.28)cm3,各组间差异无统计学意义(P>0.05);种植肿瘤细胞4周后HepG2细胞组、MDA-MB-231细胞组和对照组肿瘤体积大小分别为(0.53±0.12)cm3、(0.49±0.22)cm3和(0.54±0.13)cm3,各组间差异无统计学意义(P>0.05);HepG2细胞组肿瘤经重组腺病毒Ad-EAFP-PALB/r-Caspase-3治疗后8周时肿瘤体积为(0.65±0.13)cm3,明显小于MDA-MB-231细胞组〔(1.27±0.32)cm3〕和对照组〔(1.43±1.09)cm3〕,P<0.01,而后两组之间比较差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后HepG2细胞组肿瘤细胞出现坏死区,伴淋巴浸润细胞和凋亡细胞;对照组肿瘤细胞区域内未见明显坏死区;而MDA-MB-231细胞组肿瘤细胞呈实性排列,呈小腺腔样结构,异型性明显,瘤巨细胞及多核瘤细胞可见,治疗前、后未见明显变化。结论靶向性重组腺病毒Ad-EAFP-PALB/r-Caspase-3具有有效靶向性凋亡诱导作用,体内、外治疗原发性肝癌有效,可能为原发性肝癌的靶向性基因治疗提供新途径。; 王炜沈浩元刘猛; 关键词：肝细胞性肝癌 CASPASE-3 种植瘤裸鼠

预输注经5-FU处理的同种异基因淋巴细胞诱导大鼠肝移植免疫耐受的初步研究被引量：1: 2010年; 目的探讨预输注5-FU处理的同种异基因淋巴细胞对大鼠肝移植免疫耐受的影响。方法实验分4组,均行Wistar大鼠至SD大鼠的肝移植。对照组:仅行肝移植;单纯淋巴细胞组:受体术前第7天与第4天各输注Wistar大鼠淋巴细胞(5×106个/ml)悬液1ml;低浓度5-FU+淋巴细胞组:受体术前第7天与第4天各输注经7.5μg 5-FU诱导过的Wistar大鼠淋巴细胞(5×106个/ml)悬液1ml;高浓度5-FU+淋巴细胞组:受体术前第7天与第4天各输注经15μg 5-FU诱导过的Wistar大鼠淋巴细胞(5×106个/ml)悬液1ml。术后第7天处死SD大鼠观察移植肝的病理改变。结果低浓度5-FU+淋巴细胞组受体大鼠的肝组织病理改变呈急性轻度排斥反应,肝细胞条索状排列基本整齐,肝小叶结构存在;中央静脉血管周围少量炎性细胞浸润;汇管区少量淋巴细胞浸润。对照组肝组织呈急性重度排斥反应。单纯淋巴细胞组和高浓度5-FU+淋巴细胞组肝组织呈急性中度排斥反应。结论预输注经低浓度5-FU处理的同种异基因淋巴细胞可以较好地诱导大鼠肝移植免疫耐受。; 程卫王炜丘昶儒沈浩元; 关键词：肝移植免疫耐受淋巴细胞

肝细胞癌中Bcl-2,Fas,Fas-L的表达及相关性研究被引量：7: 2011年; 目的探讨肝细胞癌中Bcl-2,Fas,Fas-L蛋白的表达及意义。方法采用免疫组化方法检测40例肝癌组织和10例良性肿瘤组织中Bcl-2,Fas,Fas-L蛋白的表达,分析它们之间的关系及与肝癌临床病理参数的关系。结果 40例肝细胞癌中Bcl-2,Fas,Fas-L蛋白的表达率分别为45%,75%,70%,10例肝良性病变中Bcl-2,Fas,Fas-L蛋白的表达率分别为0%,30%,30%。Bcl-2,Fas,Fas-L蛋白在肝细胞癌中的表达率高于肝良性病变,差异有统计学意义(P<0.05)。其中Bcl-2蛋白的表达与Fas蛋白的表达呈正相关(r=0.390,P<0.05)。结论 HCC的Bcl-2表达上调可能通过阻断Fas/Fas-L凋亡通路和其直接抗凋亡作用导致HCC细胞得以免疫逃逸。Fas,Fas-L表达的肿瘤细胞具有更强的浸润转移能力,其极有可能作为判断肿瘤转移能力的参考指标。; 沈浩元王炜刘猛姜开文李丰; 关键词：BCL-2 FAS FAS-L

靶向性反向半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3重组腺病毒诱导肝癌细胞凋亡的实验研究被引量：1: 2010年; 目的观察靶向性反向半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3（r—caspase-3）重组腺病毒体外诱导肝癌细胞凋亡的效果和特异性。方法构建甲胎蛋白（AFP）增强子和白蛋白（ALB）启动子腺病毒载体（pAdTrack．EATP．PALB），亚克隆r—caspase-3至载体pAdTrack—EAFP-PALB,PmeI线性化pAdTrack—EAFP．PALB／r—easpase．3，电转化至BJ／AdEasy菌，获得重组腺病毒骨架pAdeasy—EnrP-PALB／r．caspase一3。PacI酶切后脂质体转染AD293细胞进行包装、扩增、获得病毒。绿色荧光蛋白（GFP）监测病毒滴度和感染效率；RT-PCR和Western印迹法检测r-caspase．3在HepG2细胞中的表达；流式细胞术检测其特异性诱导肝癌细胞凋亡的作用。结果穿梭载体pAdTrack．EAFP-PALB／r—caspase-3酶切、测序正确。穿梭载体、pAdeasy-1载体同源重组后PCR及PacI酶切鉴定结果表明pAdeasy．E＆FP-PALB／r—caspase-3重组成功。转染AD293细胞后可观察到GFP的表达。病毒感染HepG2细胞总DNA经RT—PCR和Western印迹均可检测到目的基因的表达，证实Ad-E—FP-PAL／dr—caspase-3病毒颗粒包装成功；靶向性r—easpase-3重组腺病毒感染各组细胞24h后，各组凋亡指数分别为：HepG细胞48．2％、7721细胞17．7％、L-02细胞7．3％、MDA—MB-231细胞0％。结论成功构建了靶向性Ad．EAFP-PALB／r—caspase-3重组腺病毒，体外实验表明其具有凋亡诱导靶向性，为进一步研究靶向性r—caspase-3基因治疗肝细胞肝癌及其生物学功能提供了依据。; 王炜沈浩元丘昶儒林浩铭程卫; 关键词：腺病毒半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3 肝肿瘤靶向性

重组腺病毒r-caspase3的靶向性实验研究: 2011年; 目的:观察构建靶向性反向半胱氨酸蛋白酶3(r-caspase3)重组腺病毒对AFP表达阳性肝癌细胞凋亡诱导的效果和特异性。方法:采用AFP表达强阳性细胞HepG2、表达弱阳性细胞7721、正常肝细胞L-02以及AFP表达阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231,分别感染构建之重组腺病毒Ad-r-caspase3、Ad-EAFPPALB/r-caspase3及Ad-PALB/r-caspase3,SRB染色测定O.D值,计算细胞死亡率和IC50;流式细胞术检测细胞凋亡指数。结果:HepG2、7721细胞对各腺病毒敏感程度为Ad-EAFPPALB/r-caspase3>Ad-PALB/r-caspase3>Ad-r-caspase3;流式细胞术检测结果显示重组腺病毒Ad-EAFPPALB/r-caspase3具有极强的凋亡选择性,AFP表达越强,凋亡指数越高。结论:靶向性Ad-EAFP-PALB/r-caspase3重组腺病毒具有肝细胞性肝癌凋亡选择性,同AFP表达呈正相关。; 王炜沈浩元刘猛; 关键词：腺病毒靶向性

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