李宪臻
- 作品数：220 被引量：632H指数：13
- 供职机构：大连工业大学生物工程学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金辽宁省自然科学基金公益性行业(农业)科研专项更多>>
- 相关领域：生物学轻工技术与工程化学工程农业科学更多>>
- 蔗糖异构酶PalI在解脂耶氏酵母中的表面展示被引量：4
- 2022年
- 【背景】蔗糖异构酶(PalI)生物转化蔗糖是目前生产异麦芽酮糖的主要方法,但在生产过程中存在的蔗糖异构酶转化蔗糖副产物比例较高、游离酶需要分离纯化等问题限制了异麦芽酮糖工业生产的应用。【目的】构建蔗糖异构酶PalI在解脂耶氏酵母(Yarrowia lipolytica)Po1g中的表面展示菌株,以降低蔗糖异构酶转化蔗糖的副产物比例及其纯化成本。【方法】为获得具有生产PalI能力的Y.lipolytica Po1g表面展示菌株,通过重叠延伸PCR将克雷伯氏菌(Klebsiella singaporensis)LX3的PalI的编码基因PalI与全基因合成的来自Y.lipolytica细胞壁的锚定蛋白Pir1融合,转入Y.lipolytica Po1g中构建表面展示菌株。利用3,5-二硝基水杨酸(3,5-dinitrosalicylic acid,DNS)比色定糖法测定表面展示的PalI酶活力并对其酶学性质进行探究,通过高效液相色谱法分析其转化蔗糖的产物。【结果】构建了蔗糖异构酶表面展示菌株Pir1-PalI/Po1g,经DNS法测得展示在Y.lipolytica Po1g表面的PalI酶活力为(4694.6±56.6)U/g-菌体干重(dry cell weight,DCW),该酶的最适反应温度及pH值分别为45℃和pH 6.0,在20−55℃,pH 3.5−9.0区间内较稳定。对该酶转化蔗糖产物进行分析,结果表明以异麦芽酮糖为主的二糖产物与单糖副产物的比例可达到91:9。【结论】本研究构建了表面展示PalI的Y.lipolytica Po1g菌株,为异麦芽酮糖的工业化生产奠定了基础。
- 吴琦黄思敏郭小宇李宪臻刘家豪陈慧玲李思彭
- 关键词：解脂耶氏酵母酶学性质
- Microbacterium sp.LB37菌筛选及酶学性质研究
- 由自然界中分离到一株黄原胶降解菌,能够合成黄原胶降解酶.通过对该生物破胶剂作用条件的研究发现,黄原胶降解酶的最适水解温度为40℃,但室温下的作用能力非常低,黄原胶的这种反应条件非常适于洗井液的过程操作.在磷酸-柠檬酸缓冲...
- 陈晓艺杨帆李宪臻
- 关键词：发酵过程菌株筛选酶学性质
- 微生物实验教学改革初探被引量：1
- 2017年
- 针对之前微生物学实验教学存在的诸多不足,以大连工业大学生物工程学院为例,进行了微生物学实验教学改革。通过实验教学改革实践,激发了学生自主学习、探究科学、主动创新的热情。
- 唐文竹李宪臻
- 关键词：微生物学实验教学改革
- 根霉酶系及其洗涤效果的研究被引量：8
- 1993年
- 本文研究了三种根霉固体培养时所生成的酶系变化。结果,三种菌培养温度较高(37℃)时,α—淀粉酶产量都高。生成速度快。但蛋白酶产量都较低;培养温度较低(30℃以下)时,蛋白酶和纤维素内切酶产量都高,α—淀粉酶产量都较低;但其他糖化酶。纤维素糖化力酶没有规律,随菌种不同而不同。也研究了根霉所生成的酶在洗涤剂上应用的可能性。结果,加酶之后洗衣粉的洗净率提高47.5%～58.9%其中米根霉 DQ—R_2菌所生成的酶加到洗衣粉中,其洗净率最高,提高58.9%。
- 鱼红闪金花张春枝李宪臻金风燮
- 关键词：粉状洗涤剂
- 微生物群体感应及其在感染性疾病治疗新策略中的潜在应用被引量：2
- 2010年
- 微生物抗药性突变株的出现,导致抗生素的治疗效果大幅降低,寻找新的感染性疾病防治策略迫在眉睫。病原菌的致病毒性受群体感应系统调控,因此,以群体感应为靶标,调控群体感应过程中的关键步骤可以达到治疗感染性疾病的目的。这种以阻断群体感应过程而非细胞生长为治疗策略的方式,不会引起抗药性突变株的出现,所开发的药物是抗病原性的,是继抗生素之后最具发展前景的新型抗感染药物之一。主要论述了有关群体感应作为新型药物靶标的可能性及相关研究的最新进展。
- 马月陈晓艺李宪臻
- 关键词：抗生素靶标感染性疾病
- 糖组学研究策略及前沿技术研究进展被引量：9
- 2006年
- 糖组学是继基因组学和蛋白质组学后的新兴研究领域,主要研究聚糖结构与功能.通过与蛋白质组数据库结合,糖捕捉法能系统鉴定糖蛋白和糖基化位点.糖微阵列技术可以对生物个体产生的全部蛋白聚糖结构进行鉴定与表征,提高了聚糖分析通量.而化学选择糖印迹技术简化了聚糖纯化步骤并提高了糖基化分析的灵敏度.双消化并串联柱法通过双酶消化双柱分离,在分析聚糖结构的同时也鉴定蛋白质的序列,并与蛋白质组学研究兼容.
- 郭丽娜王洪荣李宪臻
- 关键词：糖组学微阵列技术
- 分子信号抑制剂的提取及其优化发酵条件
- 2006年
- 选用铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa,PAO1)为研究菌株,通过实验发现在该菌种自身生长过程中同时产生一种抑制剂,该种抑制剂对革兰氏阴性菌的AHL型信号分子有明显抑制作用。其优化发酵条件为:3 g/L的葡萄糖为碳源,3 g/L的硫酸铵为氮源,250 mL三角瓶中装液量为150 mL,37℃摇床发酵培养72 h。
- 罗菲李宪臻
- 关键词：发酵
- 蔗糖异构酶PalⅠ在枯草芽孢杆菌中的异源表达及应用被引量：3
- 2021年
- 目的构建表达蔗糖异构酶PalⅠ的枯草芽孢杆菌B. subtilis WB800重组表达菌,并对其催化蔗糖转化的产物进行分析。方法采用RF-clone方法扩增蔗糖异构酶PalⅠ基因(NCBI:AY040843.1),克隆至pHT43载体,构建重组质粒pHT43-PalⅠ,转化至枯草芽孢杆菌B. subtilis WB800中,构建菌株pHT43-PalⅠ/B. subtilis WB800,IPTG诱导表达,SDS-PAGE分析目的蛋白蔗糖异构酶PalⅠ的表达情况。在含2%、4%、8%、12%蔗糖的培养基中发酵pHT43-PalⅠ/B. subtilis WB800,HPLC分析发酵液中蔗糖异构酶PalⅠ催化蔗糖转化的产物。结果经PCR鉴定,重组质粒p HT43-PalⅠ及重组菌株pHT43-PalⅠ/B. subtilis WB800均构建正确。蔗糖异构酶PalⅠ在B. subtilis WB800中成功分泌表达,其相对分子质量约为66 400。在含12%蔗糖的培养基中,发酵液中蔗糖异构酶PalⅠ可催化蔗糖转化为以异麦芽酮糖为主的二糖产物,其与单糖副产物的最大比值可达92∶1。结论成功构建了表达蔗糖异构酶PalⅠ的枯草芽孢杆菌表达菌株,其可利用重组菌在含蔗糖培养基中直接发酵催化蔗糖的转化,降低副产物的含量。
- 张贺朋王兵兵李宪臻李蓉
- 关键词：枯草芽孢杆菌异源表达异麦芽酮糖
- 褐藻酸降解菌AGN12制备褐藻酸裂解酶的反应条件被引量：3
- 2006年
- 新分离菌AGN12能够降解褐藻酸,具有褐藻酸裂解酶活性。褐藻酸裂解酶降解褐藻酸的最适反应条件是:温度30℃,pH 7.0,底物浓度8 g/L。褐藻酸裂解酶稳定性对温度高度敏感,50℃保温1 h酶活力基本消失。Mn2+、Mg2+浓度高低对褐藻酸裂解酶均有激活作用,K+在5 mmol/L浓度下对该酶有激活作用,而Cu2+、Fe3+对该酶具有抑制作用。
- 张颖利李宪臻
- 关键词：褐藻酸
- Pandoraea sp.OXJ-11菌产草酸盐降解酶性质的研究
- 研究了Pandoraea sp.OXJ-11菌产草酸盐降解酶的酶学性质。草酸钠降解酶的最适底物浓度为0.7 mg/mL，最适酶反应温度为30℃。20℃下保温酶活力较稳定，30℃时保温2h酶活力开始下降，50℃时酶活完全丧...
- 孙玥郭继强李宪臻
- 关键词：降解酶酶反应
