傅国平
- 作品数:3 被引量:22H指数:2
- 供职机构:南京农业大学生命科学学院农业部农业环境微生物工程重点开放实验室更多>>
- 发文基金:江苏省自然科学基金国家高技术研究发展计划农业部农业科技跨越计划项目更多>>
- 相关领域:环境科学与工程生物学更多>>
- 微生物降解有机磷类毒剂的酶学研究进展被引量:9
- 2004年
- 有机磷毒剂在农业生产和战争中的应用广泛 ,其生物解毒受到理论和应用研究方面的重视。有机磷水解酶在有机磷毒剂的生物降解中具有重要的作用 ,目前在有机磷水解酶的蛋白质晶体结构、酶促反应机制等方面的研究取得了较大的进展。文中对有机磷水解酶在酶学、高级结构、催化机制、定向进化及其应用等方面的研究进行了综述 。
- 傅国平崔中利吴旭平徐玮李顺鹏
- 关键词:有机磷水解酶定向进化
- 甲基对硫磷水解酶基因的表达及酶学性质研究
- 傅国平
- 关键词:甲基对硫磷水解酶微生物降解杀虫剂有机磷
- 甲基对硫磷水解酶的重组表达及其纯化和性质研究被引量:14
- 2004年
- 用PCR方法获得甲基对硫磷水解酶编码基因 ,构建了重组表达质粒pET2 9a_mpd ,将其转化至EscherichiacoliBL2 1 (DE3)中 ,经IPTG诱导表达 ,得到C 末端含有 6个寡聚组氨酸的甲基对硫磷水解酶 ,用Ni NTA亲和层析纯化得到具有活性的甲基对硫磷水解酶。测定了环境因素对酶活性的影响及酶动力学参数。甲基对硫磷水解酶水解甲基对硫磷时 ,最适pH8 6~ 8 8,最佳反应温度 1 5℃ ;Mn2 + 、Zn2 + 、Cu2 + 可使酶活性增加 1 5 %~ 2 0 % ,Ca2 + 、Mg2 + 微弱地促进酶的作用 ,Ni2 + 对酶活性几乎无影响 ;1mmol LEDTA·Na2 + 几乎不影响酶的活性 ,而 1 0mmol LEDTA·Na2 + 对甲基对硫磷水解酶有较强的抑制作用。甲基对硫磷水解酶水解乙基对硫磷时 ,最适pH8 6。 2 5℃时 ,该酶对甲基对硫磷的米氏常数Km 为 (6 8 6± 5 1 ) μmol L ,kcat为 (4 5± 6 )S- 1 ;对乙基对硫磷的米氏常数Km 为 (5 9 5± 6 0 )μmol L ,kcat为 (8± 1 )S- 1 。kcat Km
- 傅国平崔中利徐玮吴旭平李顺鹏
- 关键词:甲基对硫磷水解酶基因表达酶活性