姜明红
- 作品数：11 被引量：31H指数：4
- 供职机构：中国医学科学院北京协和医学院基础医学院基础医学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学更多>>
- E3泛素连接酶RNF121对脂多糖诱导的巨噬细胞表达促炎性细胞因子的影响
- 2016年
- 目的探讨E3泛素连接酶RNF121对脂多糖(LPS)诱导的小鼠腹腔巨噬细胞表达促炎性细胞因子的调控作用。方法 LPS刺激小鼠腹腔巨噬细胞,Western blot检测RNF121的表达。用RNA干扰(si-RNF121)降低RNF121的表达,小鼠腹腔巨噬细胞经LPS刺激后,实时荧光定量PCR法检测TNF-α和IL-6的mRNA水平,ELISA检测细胞培养上清中TNF-α和IL-6的浓度,Western blot检测小鼠腹腔巨噬细胞中P65及磷酸化P65(p-P65)的表达水平,利用双荧光素酶报告基因法检测NF-κB的活性。结果 LPS诱导小鼠腹腔巨噬细胞后,RNF121的蛋白水平显著降低(P<0.05),蛋白酶抑制剂MG132能够显著增加RNF121的蛋白水平。si-RNF121降低RNF121的表达后,给予LPS刺激小鼠腹腔巨噬细胞,IL-6和TNF-α的表达水平均显著下降(P<0.05),转录因子P65的磷酸化(p-P65)水平及NF-κB的活性均显著降低(P<0.05)。结论 E3泛素连接酶RNF121通过调控NF-κB的活性从而影响小鼠巨噬细胞促炎性细胞因子TNF-α及IL-6的表达。
- 孟姝刘音姜明红
- 关键词：天然免疫巨噬细胞
- E3泛素连接酶RNF2负向调控天然免疫抗病毒反应及机制研究
- 研究背景：Ⅰ型干扰素信号通路在天然免疫抗病毒反应中具有重要的作用。病毒感染机体诱导Ⅰ型干扰素产生后,Ⅰ型干扰素能够与细胞表面的Ⅰ型干扰素受体结合,触发下游信号通路的激活,导致转录因子STAT1发生磷酸化,形成ISGF3复...
- 刘硕刘玮王文蝶宋晓琦马中飞姜明红曹雪涛
- 关键词：STAT1泛素化抗病毒
- MiR-146a调节TRAIL不敏感的乳腺癌细胞迁移及其分子机制被引量：3
- 2013年
- 目的研究miR-146a及其靶基因EGFR对乳腺癌细胞迁移的影响。方法用终浓度为50、100、200和500μg/L的重组可溶性TRAIL(rsTRAIL)持续刺激对TRAIL敏感的MDA-MB-231细胞4周,筛选得到TRAIL不敏感的乳腺癌细胞MDA-MB-231/TR。RT-PCR检测miR-146a的表达;Transwell实验以及划痕实验检测乳腺癌细胞的迁移能力;双荧光素酶报告基因分析以及Western blot鉴定MDA-MB-231/TR细胞中miR-146a与EGFR基因的靶向调控关系;Western blot检测DR4、DR5、IRAK1、CXCR4、p-IκBα、IκBα、caspase 8和caspase 3的蛋白表达水平;染色质免疫共沉淀技术(ChIP)分析MDA-MB-231和MDA-MB-231/TR细胞中NF-κB P65亚基与miR-146a启动子区的结合情况。结果 TRAIL细胞毒作用不敏感的人乳腺癌细胞系MDA-MB-231/TR中miR-146a的表达降低,并引起其靶基因EGFR的表达增加,最终导致TRAIL不敏感的乳腺癌细胞迁移能力增强。同时发现NF-κB参与miR-146a低表达的调控。结论 miR-146a对TRAIL不敏感的乳腺癌细胞迁移起重要的调节作用。
- 刘丹姜明红刘敏高静刘彦信郑德先
- 关键词：TRAIL乳腺癌细胞MIR-146A迁移
- LPS触发的TLR4对NF-κB和IRF3信号通路的调控差异被引量：5
- 2017年
- 目的探讨脂多糖(LPS)触发的Toll样受体4(TLR4)对NF-κB和干扰素调节因子3(IRF3)信号通路的调控差异。方法 LPS刺激小鼠原代腹腔巨噬细胞,用免疫荧光法检测TLR4及两种转录因子p65及IRF3的定位,用Western blot方法检测转录因子p65和IFR3的磷酸化水平。结果巨噬细胞经LPS刺激30 min内,细胞膜上的TLR4荧光强度增加(P<0.01),胞质中TLR4荧光强度显著增加(P<0.01),且与早期内体抗原1(early endosome antigen 1,EEA1)共定位;当LPS刺激90和180 min时,胞膜和胞质内的TLR4信号均显著下降(P<0.01),与EEA1共定位的信号也明显减少(P<0.01)。静息状态下,TLR4的下游信号通路分子p65和IRF3的荧光信号均出现在胞质中;LPS刺激后,两者的荧光信号在细胞核中逐渐增加(P<0.05),但p65荧光信号比IRF3增强得更早,且更持久。p65磷酸化的修饰也明显早于IRF3,且持续时间更长。结论 TLR4活化后的定位变化导致其下游IRF3信号通路的传递时间明显延后,且比NF-κB信号通路短暂。
- 宋晓琦刘玮刘硕姜明红
- 关键词：脂多糖TOLL样受体4干扰素调节因子3
- 利用流式细胞术检测LPS刺激活化后小鼠腹腔巨噬细胞体积的变化被引量：1
- 2014年
- 目的探讨小鼠腹腔巨噬细胞经脂多糖(LPS)刺激活化后体积的变化。方法 LPS刺激小鼠腹腔巨噬细胞3和24 h后,用倒置显微镜观察细胞的形态,用ELISA法检测细胞上清中IL-6的含量,用流式细胞术定量检测细胞活化后的体积。结果小鼠腹腔巨噬细胞在正常状态下呈圆型,细胞边缘光滑无伪足,胞质内无空泡。经LPS刺激3 h后,小鼠腹腔巨噬细胞的表面积变大,伸出伪足,伪足的数量和长度随时间延长而逐渐增多和增长,胞质内的空泡也逐渐增加;24 h后,细胞表面积明显增大,伪足牵拉使细胞形状呈梭型。LPS处理后细胞上清中IL-6的含量较对照组显著增加(P<0.01)。流式细胞术检测发现细胞的前向角散射光(FSC)的数值(代表细胞大小)随LPS刺激时间的延长而增加,3和24 h分别增加了11.0%(P<0.05)和20.2%(P<0.01);侧向角散射光(SSC)的数值(代表表面颗粒数)也逐渐增加,3和24 h分别增加了21.6%(P<0.05)和68.0%(P<0.01)。结论流式细胞术可以定量检测小鼠腹腔巨噬细胞经LPS活化后的体积变化,为天然免疫细胞的活化研究提供了新的检测手段。
- 刘音刘硕王文蝶朱军陈朱波姜明红
- 关键词：LPS巨噬细胞活化流式细胞术
- miR-147对老龄小鼠巨噬细胞表达促炎性细胞因子的影响被引量：2
- 2016年
- 目的探讨miR-147对老龄化小鼠腹腔巨噬细胞功能的影响。方法腹腔注射LPS,用ELISA方法检测老年小鼠和年轻小鼠血清中白细胞介素6(IL-6)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的表达水平。分离的老年和年轻小鼠腹腔巨噬细胞经LPS刺激,用实时定量PCR方法检测miR-147的表达水平。在巨噬细胞中过表达和抑制表达miR-147,用ELISA方法检测细胞培养上清中IL-6和TNF-α的表达水平。结果腹腔注射LPS后,老年小鼠血清中促炎性细胞因子IL-6和TNF-α均显著高于年轻小鼠(P<0.05)。分离出的腹腔巨噬细胞经LPS刺激后,年轻小鼠细胞中miR-147的表达水平显著上调(P<0.05),而在老年小鼠中没有明显变化。巨噬细胞中过表达miR-147后,IL-6和TNF-α的表达水平均显著下降(P<0.05),而抑制miR-147的表达,两者均显著上升(P<0.05)。结论老年小鼠巨噬细胞中miR-147的表达异常可能是老龄化小鼠表达促炎性细胞因子异常的重要机制。
- 孟姝刘音姜明红
- 关键词：巨噬细胞老龄固有免疫LPS
- E3泛素连接酶RNF2负向调控天然免疫抗病毒反应及机制研究
- 研究背景:Ⅰ型干扰素信号通路在天然免疫抗病毒反应中具有重要的作用。病毒感染机体诱导Ⅰ型干扰素产生后,Ⅰ型干扰素能够与细胞表面的Ⅰ型干扰素受体结合,触发下游信号通路的激活,导致转录因子STAT1发生磷酸化,形成ISGF3复...
- 刘硕刘玮王文蝶宋晓琦马中飞姜明红曹雪涛
- 关键词：STAT1泛素化抗病毒
- 文献传递
- RNF2在治疗病毒感染或病毒感染相关的炎症性疾病中的用途
- 本申请涉及RNF2在治疗病毒感染或病毒感染相关的炎症性疾病中的用途。本申请涉及人RNF2基因或其表达产物作为靶点在制备用于治疗病毒感染或病毒感染相关疾病的药物中的用途；以及人RNF2基因或其表达产物作为靶点在制备药物筛选...
- 刘硕姜明红曹雪涛
- 文献传递
- miR-146a对小鼠巨噬细胞IL-18表达的影响被引量：8
- 2011年
- 目的:探讨miR-146a对小鼠单核-巨噬细胞株RAW264.7以及小鼠原代腹腔巨噬细胞Thl/Th2类细胞因子表达的影响。方法:体外培养的小鼠单核-巨噬细胞系RAW264.7细胞和腹腔新鲜分离的巨噬细胞分别瞬时转染miR-146a mimics、阴性对照mimics(NC mimics)、抑制性miR-146a(miR-146a inhibitor)和抑制性miR-146a阴性对照(NC in-hibitor)。转染后,利用real time PCR定量检测IL-18、IL-5和IL-10的表达情况。结果:RAW264.7细胞和原代腹腔巨噬细胞在转染miR-146a mimics后IL-18的表达水平明显降低(P<0.05),转染miR-146a inhibitor后IL-18的表达水平明显升高(P<0.05),但对IL-5和IL-10的表达,两种转染形式均没有影响。结论:巨噬细胞RAW264.7及原代巨噬细胞表达的miR-146a能够负向调控Thl类细胞因子IL-18的表达,但是不能调控Th2类细胞因子IL-5及IL-10的表达。
- 项洋姜明红王东生高静张亚玺刘彦信郑德先
- 关键词：巨噬细胞MIR-146ATH1/TH2细胞因子表达
- 胰高血糖素样肽-1对胰岛素抵抗肌细胞脂代谢相关基因表达的干预作用被引量：4
- 2010年
- 目的:探讨胰高血糖素样肽-1(glucagon-like peptide-1,Glp-1)对胰岛素抵抗肌细胞模型的胰岛素敏感性和脂类代谢相关基因的影响。方法:分化成熟的肌小管细胞经软脂酸(palmitate,PA)诱导,建立胰岛素抵抗肌细胞模型。在此基础上,用药物Glp-1干预后,检测胰岛素抵抗指标的变化,并用real time PCR的方法检测脂类代谢相关基因的转录水平。结果:浓度为0.25 mmol.L-1的PA孵育成肌细胞C2C12 24 h后,细胞能被诱导成胰岛素抵抗状态。Glp-1干预后,葡萄糖消耗量和摄取率显著升高,细胞内脂类堆积明显减少。脂类合成相关基因Fas的mRNA水平在胰岛素抵抗细胞中显著上升,经Glp-1干预后表达量显著下降,而脂肪酸氧化分解的多个关键基因在胰岛素抵抗及Glp-1处理组中并没有呈现出一致的变化。结论:PA能够诱导分化成熟的C2C12细胞为胰岛素抵抗肌细胞。Glp-1药物能够增加胰岛素抵抗肌细胞的胰岛素敏感性,并能够通过调节脂类代谢基因的表达而改善细胞的脂类沉积状态。
- 黄立嵩王立秋林朱森姜明红
- 关键词：胰高血糖素样肽-1胰岛素抵抗成肌细胞
