姚忠萍
- 作品数:5 被引量:29H指数:3
- 供职机构:中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所更多>>
- 发文基金:云南省自然科学基金国家高技术研究发展计划卫生部卫生公益性行业科研专项更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 低血清培养Vero细胞和流感病毒条件的优化被引量:11
- 2009年
- 目的优化低血清培养Vero细胞和流感病毒的条件,为开发Vero细胞流感疫苗奠定基础。方法分别在DMEM/F12和SLM-199培养基中,添加不同浓度的血清,培养Vero细胞,观察细胞连续传代的生长状态;接种流感病毒后,检测病毒培养液不同pH值、不同浓度TPCK-胰酶和病毒不同接种量对病毒血凝效价的影响。结果用SLM-199在1.0%血清浓度下培养的Vero细胞接种流感病毒血凝效价较高,病毒培养液pH值为7.2,TPCK-胰酶含量为1.0μg/ml,接种病毒MOI为1.0时,72h收获的病毒血凝效价最高。结论已筛选出低血清培养Vero细胞和流感病毒的适宜条件。
- 刘铮孙明波高菁霞马磊林小瑞燕景恩张勇吴忠香刘雅灵姚忠萍廖国阳李卫东
- 关键词:流感病毒VERO细胞
- Triton X-114液相分离法去除流感单价病毒原液中内毒素的实验研究被引量:7
- 2010年
- 目的探讨Triton X-114液相分离法去除流感单价病毒原液中内毒素的效果。方法用终浓度为1、2、3%Triton X-114抽提、液相分离法去除流感单价病毒原液中的内毒素;用鲎试剂凝胶法检测去除前后内毒素含量、Lowry法测定蛋白质含量、红细胞凝集试验检测血凝效价、单相免疫扩散法测定血凝素含量等。结果通过3轮抽提,Triton X-114能够将单价病毒原液中内毒素水平降至低于0.25EU/mL,去除率达到99.9%,蛋白质回收率为85.11%,血凝效价保持不变,血凝素含量几乎无变化。以1%Triton X-114去除流感单价病毒原液中内毒素效果最好。结论Triton X-114液相分离法可有效去除流感病毒原液中的内毒素。
- 黄秋香毕湖冰张新文高菁霞蔡玮刘泽姚忠萍姜述德李映波
- 关键词:内毒素TRITON
- 一种去除流感病毒原液中内毒素的方法
- 本发明提供一种从流感病毒原液中去除内毒素的方法,包括萃取分离,其特征在于在流感病毒原液中加入终浓度为0.5-5%(体积百分浓度)的介质——聚乙二醇单辛基酚醚,用于萃取分离流感病毒原液中的蛋白质和内毒素。可在不改变流感病毒...
- 李映波黄秋香毕湖冰张新文高菁霞蔡玮刘泽姚忠萍姜述德
- 文献传递
- 一种去除流感病毒原液中内毒素的方法
- 本发明提供一种从流感病毒原液中去除内毒素的方法,包括萃取分离,其特征在于在流感病毒原液中加入终浓度为0.5-5%(体积百分浓度)的介质——聚乙二醇单辛基酚醚,用于萃取分离流感病毒原液中的蛋白质和内毒素。可在不改变流感病毒...
- 李映波黄秋香毕湖冰张新文高菁霞蔡玮刘泽姚忠萍姜述德
- 文献传递
- 以重配技术制备H1N1流感病毒Vero细胞适应株被引量:12
- 2009年
- 目的以重配技术制备H1N1流感病毒Vero细胞适应株,为以Vero细胞为基质生产流感疫苗奠定基础。方法以流感病毒Vero细胞适应株A/Yunnan/1/2005Va(H3N2)为母本株,与WHO推荐的2007~2008年度北半球流感疫苗生产用毒株A/Caledonia/20/99(H1N1)共同感染SPF鸡胚和Vero细胞,用抗A/Yunnan/1/2005Va(H3N2)抗体筛选重配病毒,在Vero细胞连续传12代,采用血凝抑制试验和RT-PCR鉴定病毒型别。将重配病毒经Vero细胞大量培养,重配前的病毒经鸡胚大量培养,分别经甲醛灭活,制备灭活疫苗,免疫ICR小鼠,检测其免疫原性。结果获得了1株Vero细胞适应的高产H1N1流感病毒株,连续传9代后,病毒血凝滴度维持在512,免疫原性与重配前的毒株相比,差异无统计学意义。结论通过流感病毒Vero细胞适应株与流行株的重配和抗体筛选,可以获得H1N1流感病毒Vero细胞适应株。
- 张英伟李卫东马娜姚忠萍燕景恩张勇刘雅灵杨佳吴忠香廖国阳杨净思李长贵
- 关键词:流感病毒H1N1亚型VERO细胞