周磊
- 作品数:15 被引量:7H指数:2
- 供职机构:第四军医大学西京医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金陕西省自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生农业科学动力工程及工程热物理更多>>
- 血清miRNA的检测在前列腺癌诊断中的价值评估
- 目的筛选前列腺癌相关miRNA,定量检测miR-141、miR-16、miR-103、miR-574、miR-34b、miR-485等6种前列腺癌相关的miRNA在中国人前列腺癌患者血清中的含量,分析其与前列腺癌的相关性...
- 马越云朱琳周磊范渝红韦晓明岳乔红郝晓柯
- 关键词:MIRNA前列腺癌前列腺增生血清
- 文献传递
- 二代测序技术在血流感染病原体检测中的应用
- 周磊李金洁贺文芳付晓蕊徐修礼郝晓柯
- 肝素结合血凝素通过抑制A549细胞的自噬作用增强耻垢分枝杆菌的感染能力
- 2014年
- 目的将肝素结合血凝素(HBHA)重组表达于耻垢分枝杆菌(MS),鉴定其对A549细胞自噬作用的影响。方法将HBHA克隆于穿梭表达质粒pMV261,构建HBHA重组载体,电转化至MS;感染A549细胞,Western blot法鉴定A549细胞微管相关蛋白轻链3(LC3)的表达情况,并检测LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值的变化可估计自噬的水平;利用单丹磺酰尸胺(MDC)将自噬体染色后,激光共聚焦观察细胞内自噬体变化的情况;通过MS、rMS-HBHA感染A549细胞18 h,计算胞内活菌数,鉴定感染状况。结果 rMS-HBHA经42℃热诱导成功表达HBHA蛋白;相对野生型MS,重组表达HBHA蛋白的MS(rMS-HBHA)可以显著抑制A549细胞中的LC3Ⅰ和LC3Ⅱ的表达,rMS-HBHA组的LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值为0.625显著低于MS组2.025,表明rMS-HBHA组自噬体形成受到抑制;并且rMS-HBHA感染A549细胞18 h后胞内活菌为6.3×106,明显高于MS组1×105。结论外源性HBHA可以通过抑制A549细胞的自噬作用增强MS的感染能力。
- 郑青杨柳杨静周珊周磊韩若冰郝晓柯马越云
- 关键词:RMS肝素结合血凝素A549细胞LC3耻垢分枝杆菌
- devR基因调控的结核分枝杆菌细胞毒性的研究
- 2015年
- 目的阐明devR基因表达对分枝杆菌生长及感染能力的影响。方法确认野生型牛分支杆菌卡介苗(M.bovis BCG,简称BCG)、devR基因敲除的BCG菌株(简称ΔdevR)和devR基因回补的BCG菌株(简称devR.com)的devR序列正确;在不同时间点测定600 nm下的吸光度(A)值,绘制3种细菌的生长曲线;以感染复数(MOI)=10感染人肺泡Ⅱ型上皮细胞A549(简称A549细胞)和小鼠巨噬细胞Raw264.7(简称Raw264.7细胞),分别采用流式细胞仪和酶联免疫吸附试验于0、24、48、72 h测定细胞凋亡率和乳酸脱氢酶(LDH)释放水平;采用实时定量PCR(RT-PCR)测定凋亡相关基因bcl-2和bad的表达水平。结果ΔdevR菌株在早期(培养2-10 d)生长较BCG菌株和devR.com菌株明显加快(P〈0.01)。ΔdevR菌株感染A549细胞和Raw264.7细胞后,细胞的凋亡和坏死效应明显增加,与BCG菌株和devR.com菌株比较差异有统计学意义(P〈0.05)。3种菌株感染A549细胞均导致凋亡相关基因bcl-2表达上调,且ΔdevR菌株感染组bcl-2基因表达明显高于BCG和devR.com菌株感染组;3种菌株感染Raw264.7细胞均导致凋亡相关基因bad表达上调,且ΔdevR菌株感染组bad基因表达明显高于BCG和devR.com菌株感染组。结论 devR基因敲除的BCG菌株毒力明显增强。
- 旦正尖措马越云周磊付晓蕊苏明权郝晓柯
- 关键词:卡介苗凋亡乳酸脱氢酶
- 重症监护病房分离金黄色葡萄球菌的分子流行特征被引量:2
- 2017年
- 目的了解某三甲医院重症监护病房(ICU)患者分离金黄色葡萄球菌的分子流行特点及其同源性,为有效控制医院感染的发生提供实验室依据。方法收集该院2013年3—8月ICU患者各类感染标本分离的62株金黄色葡萄球菌,采用PCR方法扩增7个管家基因并进行测序分析,采用多位点序列分型(MLST)技术获得菌株ST分型,对ST分型进行亲缘关系分析。结果 62株金黄色葡萄球菌均可以扩增出7个管家基因的特异性产物;共分为10个ST基因型,其中2个基因型为新发现的ST型(STn1和STn2),1个为国内新发现的ST型(ST675)。ST239是ICU患者分离的金黄色葡萄球菌主要ST型别,占74.20%,分布于6个ICU,分布范围最广;其次为ST5,分布于3个ICU。62株菌株在系统进化树上形成7个主要分支,检出耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)55株,占88.71%。结论医院ICU分离的金黄色葡萄球菌具有一定的同源性,并且少数型别表现出集中分布趋势。
- 杨玉琪徐修礼马越云史皆然周珊周磊郝晓柯
- 关键词:重症监护病房金黄色葡萄球菌多位点序列分型基因同源性
- 耐多药结核分枝杆菌双组份系统反应调节子表达研究
- 目的检测MTB耐多药菌株和敏感菌株的TCS反应调节子的表达水平,以探讨其与耐药的相关性。方法将7H9肉汤培养至对数生长期的结核分枝杆菌进行总RNA的提取和鉴定纯度;然后进行反转录,利用SYBR Green定量PCR方法检...
- 周磊马越云黄芳刘家云杨柳苏明权郝晓柯
- 文献传递
- 耐多药结核分枝杆菌双组份系统反应调节子表达的研究被引量:2
- 2011年
- 目的检测MTB耐多药菌株和敏感菌株的TCS反应调节子的表达水平,以筛选出与MTB耐药相关的TCS。方法将7H9肉汤培养至对数生长期的MTB进行总RNA的提取和纯度鉴定;然后进行反转录,利用SYBRGreenI实时荧光定量PCR方法检测MTB的TCS反应调节子表达水平,以筛查出在耐多药菌株和敏感株中差异表达的TCS反应调节子。检测INH、SM和LFA压力下这些差异表达的TCS反应调节子的表达水平。结果与敏感菌株相比,在耐多药菌株中Rv0491、Rv3133c、Rv3143和Rv3246c分别上调表达1.03、7.11、3.48和1.37倍,差异有统计学意义(t或t’=5.623、-4.196、-3.559、-3.016,P〈0.01)。而其余反应调节子的表达在耐多药菌株和敏感菌株之间差异均无统计学意义。在抗生素压力下,Rv1027c、Rv3246c和Rv3143的表达明显升高,Rv0491和Rv3133c则变化不明显。结论Rv3246c和Rv3143的差异表达可能是MTB耐药的重要机制之一,可为新型抗结核药物的研制提供理论依据。
- 周磊马越云刘家云黄芳苏明权杨柳郝晓柯
- 关键词:聚合酶链反应信号传导
- 结核分枝杆菌体外休眠模型的建立被引量:1
- 2016年
- 目的:模拟结核分枝杆菌体内缺氧和微营养的生长环境建立其休眠模型。方法:将牛分枝杆菌卡介苗野生株BCG菌株在"微需氧+pH5.0+10%Dubos"的条件下培养,以菌株生长停滞,菌体表面脂质体增厚为休眠标准进行鉴定。取不同时间菌株测定600 nm下的吸光度(A)值绘制生长曲线,同时进行金胺O-尼罗红(Auramin-O,Nile Red)双荧光染色和实时荧光定量PCR(Quantitative Realtime-PCR,qRT-PCR)检测休眠相关基因的表达量,确定菌株进入休眠状态。结果:在休眠条件培养过程中,BCG菌株的生长速度与常规条件培养菌株相比明显减慢(P<0.01),并且在休眠条件培养中第10、14和18天细菌生长基本接近停滞状态(P<0.01);同时金胺O荧光染色显示绿色荧光减弱,尼罗红红色荧光增强;休眠相关基因hspX、devR表达量逐渐上调,且培养第18天菌株明显高于第0天培养菌株(P<0.05)。结论:应用"微需氧+p H5.0+10%Dubos"条件培养,以金胺O-尼罗红染色和devR表达为标准,可以成功建立结核分枝杆菌休眠模型。
- 付晓蕊郑青周磊旦正尖措苏明权郝晓柯马越云
- 关键词:休眠金胺O
- 重症监护病房金黄色葡萄球菌分子流行特点研究
- 杨玉琪郝晓柯马越云徐修礼周珊周磊
- 二代测序技术在血流感染病原体检测中的应用
- 周磊李金洁贺文芳付晓蕊徐修礼郝晓柯