苏明权
- 作品数：383 被引量：1,007H指数：14
- 供职机构：第四军医大学西京医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学轻工技术与工程农业科学更多>>
- 伤寒杆菌聚合酶链反应检测方法被引量：4
- 2000年
- 目的 探讨聚合酶链反应快速检出血培养物中的伤寒杆菌 ,用于伤寒杆菌菌血症的诊断 .方法 根据伤寒杆菌鞭毛抗原基因 DNA核苷酸序列设计特异性寡核苷酸引物 ,应用聚合酶链反应技术快速检出血培养物中的伤寒杆菌 .结果 对伤寒杆菌和 7株非伤寒杆菌 ,同时进行 PCR扩增 ,结果只有伤寒杆菌出现 45 8bp的特异性扩增区带 ,其他 7株非伤寒杆菌均未出现 45 8bp的扩增区带 .有关引物的敏感性 ,经对倍比稀释的伤寒杆菌菌悬液进行扩增 ,结果表明 ,在 10 0个菌细胞时即可扩增出明显的 45 8bp的区带 .应用所建立的 PCR方法 ,对 10份模拟血培养中的伤寒杆菌进行检测 ,已确定PCR鉴定伤寒杆菌的最佳鉴定时机 ,在第 6小时检测出的阳性结果可达 80 % ,8h以后的阳性结果就可达 10 0 % ;对 18例发热患者血液用常规细菌增菌培养、分离鉴定与 PCR法同时检测 ,结果分离鉴定法有 5例被证实为伤寒杆菌感染 ;有 6例被 PCR扩增出特异性区带 ,在检出时间上 PCR法 (8h)明显早于细菌分离鉴定法 (48h) .结论 以伤寒杆菌鞭毛抗原基因 DNA核苷酸序列设计特异性寡核苷酸引物 ,用于血培养物中伤寒杆菌的快速检出 。
- 苏明权于文彬马越云张建芳彭道荣丁振若
- 关键词：伤寒杆菌聚合酶链反应菌血症
- HMGB1B盒编码序列的克隆和大肠杆菌表达被引量：2
- 2005年
- 目的:克隆小鼠高迁移率族蛋白1(highmobility groupbox1,HMGB1)B盒编码序列并在大肠杆菌中表达GST B盒融合蛋白.方法:从新生小鼠肺组织提取总RNA,经RT PCR获得HMGB1B盒编码序列.将酶切后PCR产物克隆到 pGEX 4T 2载体的BamHI和EcoRI位点之间,经双酶切鉴定 后测序证实.用pGEX 4T 2 B转化BL21(DE3)感受态细胞,在30℃经IPTG诱导表达5h后进行SDS PAGE分析.结果: 测序结果证实成功获得了小鼠HMGB1B盒编码序列,其序列 与GenBank中报道序列完全一致.SDS PAGE分析表明,在大 肠杆菌BL21(DE3)中高效表达了GST B盒蛋白,表达量约占 菌体总蛋白的30%,结论:成功克隆小鼠HMGB1B盒编码序 列并在大肠杆菌中获得了高效表达.
- 姜南艳于文彬苏明权李斌郝晓柯李立文
- 关键词：高迁移率族蛋白1基因表达
- RNA干扰技术及其在前列腺癌基因治疗研究中的应用被引量：1
- 2006年
- RNA干扰(RNA i)是指生物体内由双链RNA(dsRNA)介导同源序列mRNA的特异性降解,从而导致基因沉默的现象。近年来,随着对RNA i研究的不断深入,其作用机制正逐步阐明;同时作为阻断基因表达的新手段,RNA i技术也日趋完善和成熟。它具有高效性和特异性,为RNA i在肿瘤的基因治疗方面的应用提供了有力的工具。本文综述RNA i技术的有关研究进展及其在前列腺癌基因治疗研究中的应用。
- 缪应业刘家云田晋洪苏明权
- 关键词：前列腺肿瘤基因疗法RNA
- 结核分枝杆菌katG基因突变的研究
- 本文根据结核分枝杆菌genebank中katG序列,自行设计特异性寡聚核苷酸引物,采用聚合酶链反应-单链构象多态性分析和直接测序法(DirectSequencing,DS)分析结核分枝杆菌中katG基因突变情况;以H37...
- 程晓东苏明权岳乔红杨柳张建芳别良峰于文彬郝晓柯
- 关键词：结核分枝杆菌异烟肼基因突变耐药状况
- 文献传递
- 高聚金葡素活化淋巴细胞抗肺癌作用被引量：5
- 2001年
- 徐修礼张建芳刘宝瑞于文彬马越云苏明权刘家云
- 关键词：高聚金葡素肺癌免疫治疗抗癌作用
- 血乳酸及乳酸清除率测定对危重病患者预后评估的价值
- 目的监测危重患者血乳酸水平及乳酸清除率,探讨动态监测血乳酸水平与危重病患者预后的相关性。方法采用干化学方法对102例危重患者进行血乳酸测定和乳酸清除率的的计算,结合临床资料,分析患者血乳酸浓度及乳酸清除率与疾病预后的关系...
- 岳乔红周铁成程晓东马越云杨柳苏明权郝晓柯
- 关键词：乳酸乳酸清除率危重病预后
- 文献传递
- 应用RNA干扰技术阻断PC-3细胞中survivin基因的表达被引量：4
- 2006年
- 目的：用真核转录载体pSilencer^TM3.1-H1 neo构建针对survivin基因的重组真核转录载体,并转染前列腺癌细胞系PC-3,通过RNA干扰（RNAi）阻断PC-3细胞中survivin基因的表达,并研究survivin基因沉默后对PC-3细胞凋亡产生的影响.方法：将合成的DNA正义链及反义链变性、退火,形成的双链DNA与pSilencer^TM3.1-H1 neo线性质粒用T4DNA连接酶连接,重组质粒经酶切及DNA测序鉴定后,用脂质体法转染PC-3细胞,通过RT-PCR、免疫印迹和免疫组织化学染色实验检测survivin的表达变化,并用流式细胞术检测转染后PC-3细胞的凋亡变化,MTr法检测细胞生长速度的变化.结果：酶切及测序证实设计合成的DNA已正确插入载体.RT-PCR、免疫印迹和免疫组织化学染色实验表明,pSilencer3.1-SVV2和pSilencer3.1-SVV3重组载体有效地阻断了PC-3细胞中survivin基因的表达,survivin基因在mRNA和蛋白水平上的表达明显下调（P＜0.01）,转染后PC-3细胞的凋亡增加了10%～15%,细胞生长速度明显变慢.结论：成功构建了针对survivin基因的真核转录载体pSilencer3.1-SVV1、pSilencer3.1-SVV2和pSilencer3.1-SVV3,后两者可有效地阻断前列腺癌细胞系PC-3细胞中survivin基因的表达,并使转染后PC-3细胞的凋亡增加了10%～15%,细胞生长速度明显变慢.
- 沈建军郝晓柯刘家云苏明权缪应业张青
- 关键词：RNA干扰SURVIVIN前列腺癌细胞
- 乳品检测中实时荧光定量PCR仪的研制
- 2007年
- 完成了荧光检测系统、PCR热循环扩增系统、DNA核酸定量分析诊断系统等仪器关键技术研究,针对乳品检验及临床应用要求,在国家权威部门完成了仪器性能检测、使用验证、临床试验等全过程,实现了产品化和应用示范,并达到了准确性、安全性和有效性的要求。
- 彭年才苏明权张镇西
- 关键词：乳品检验
- 结核分枝杆菌Rv1009基因蛋白的克隆和表达被引量：1
- 2007年
- 目的克隆表达结核分枝杆菌促Rv1009基因,序列测定正确后进行融合、表达。方法采用热启动聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)从结核分枝杆菌H37Rv基因组中扩增出Rv1009编码基因,用限制性内切酶消化后插入pGEX 4T-2载体中,将重组质粒转化大肠杆菌BL21 (DE3),目的基因经IPTG诱导,表达Rv1009基因蛋白。结果经PCR扩增在1300bp处发现一条目的片段,获得了结核分枝杆菌H37Rv株Rv1009基因蛋白,经诱导后高效表达分子量为64KD的外源蛋白,与预期分子量大小一致,凝胶自动扫描分析,在A600值为0．6,IPTG终浓度为0．3 mmol／L,诱导表达3 h时融合蛋白表达量即达峰值,占菌体总蛋白的22．8％。结论构建了结核分枝杆菌Rv1009基因重组表达载体,获得了RPF样融合蛋白的高效表达,为今后深入研究奠定了基础。
- 杨柳苏哲岳乔红周萍苏明权刘家云郝晓柯
- 关键词：克隆
- 耐多药结核分枝杆菌双组份系统反应调节子表达的研究被引量：2
- 2011年
- 目的检测MTB耐多药菌株和敏感菌株的TCS反应调节子的表达水平，以筛选出与MTB耐药相关的TCS。方法将7H9肉汤培养至对数生长期的MTB进行总RNA的提取和纯度鉴定；然后进行反转录，利用SYBRGreenI实时荧光定量PCR方法检测MTB的TCS反应调节子表达水平，以筛查出在耐多药菌株和敏感株中差异表达的TCS反应调节子。检测INH、SM和LFA压力下这些差异表达的TCS反应调节子的表达水平。结果与敏感菌株相比，在耐多药菌株中Rv0491、Rv3133c、Rv3143和Rv3246c分别上调表达1．03、7．11、3．48和1．37倍，差异有统计学意义（t或t’=5．623、-4．196、-3．559、-3．016，P〈0．01）。而其余反应调节子的表达在耐多药菌株和敏感菌株之间差异均无统计学意义。在抗生素压力下，Rv1027c、Rv3246c和Rv3143的表达明显升高，Rv0491和Rv3133c则变化不明显。结论Rv3246c和Rv3143的差异表达可能是MTB耐药的重要机制之一，可为新型抗结核药物的研制提供理论依据。
- 周磊马越云刘家云黄芳苏明权杨柳郝晓柯
- 关键词：聚合酶链反应信号传导
