蔡红
- 作品数：22 被引量：49H指数：5
- 供职机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室更多>>
- 发文基金：中央级公益性科研院所基本科研业务费专项公益性行业(农业)科研专项哈尔滨市科技攻关计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 牛病毒性腹泻病毒E2蛋白单克隆抗体的制备及初步鉴定被引量：3
- 2013年
- 为制备牛病毒性腹泻病毒(BVDV)糖蛋白E2单克隆抗体(MAb),利用原核表达并且纯化的重组糖蛋白E2(rE2)免疫BALB/c小鼠,取免疫后小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0融合。采用以BVDV为检测抗原的间接ELISA筛选阳性细胞克隆,经3次克隆纯化后获得2株稳定分泌抗E2特异性MAb的杂交瘤细胞株,分别命名为4E3与1G11。用4E3与1G11杂交瘤细胞株接种BALB/c小鼠制备腹水,采用rE2及BVDV包被的ELISA测得的效价分别是6.21×106和6.83×105及6.83×105和7.5×104。间接ELISA、Western blot、IFA试验表明两株杂交瘤细胞所分泌的MAb具有良好的反应性和特异性。经抗体亚类鉴定4E3与1G11均为IgM/κ。特异性试验表明4E3与1G11这2株MAb均不与牛传染性鼻气管炎病毒、牛副流感病毒3型、牛腺病毒3型反应;其中4E3不与猪瘟病毒反应,而1G11则可与猪瘟病毒发生交叉反应,这种反应特性可试用于BVDV与猪瘟病毒的鉴别诊断。所制备的4E3与1G11 MAb可以用于BVDV抗原的检测,为建立检测BVDV E2蛋白血清抗体的ELISA奠定了基础。
- 王姝朱远茂蔡红马磊史鸿飞吕闯董秀梅高欲燃薛飞
- 关键词：牛病毒性腹泻病毒E2单克隆抗体IGM
- 鸡传染性支气管炎病毒DB株核蛋白基因的克隆及在杆状病毒系统中的表达被引量：5
- 2002年
- 利用PT_PCR方法扩增鸡传染性支气管炎病毒 (IBV)DB株的核蛋白基因 ,并对其序列进行了测定 ,DB株IBV的核蛋白基因长度为 12 30bp ,编码蛋白由 4 0 9个氨基酸残基组成。与已发表的参考毒株进行核苷酸同源性比较 ,发现DB株与澳大利亚群毒株的亲缘关系最为密切。同时构建了杆状病毒重组转移载体pBlue_DB_N ,将其与线性化的杆状病毒DNA共转染Sf9昆虫细胞 ,经过 3轮蚀斑纯化和聚合酶链式反应 (PCR)鉴定 ,获得重组杆状病毒rBac_DB_N。SDS_PAGE分析和Westernblot检测的结果表明DB株IBV核蛋白基因在重组杆状病毒感染的Sf9昆虫细胞内获得表达 ,融合蛋白最大表达量占细胞蛋白总量的19 .4
- 高磊王玮刘胜旺谷守林孔宪刚蔡红
- 关键词：传染性支气管炎核蛋白重组杆状病毒
- 狂犬病病毒不同毒株的形态学研究
- 狂犬病是由弹状病毒科、狂犬病病毒属成员中的代表种--狂犬病病毒引起的一种危害极为严重的人畜共患病,该病几乎所有温血动物都有发生.它流行广,宿主多,死亡率高,是人类迄今为止尚未能征服的疫病之一.目前主要还是以预防接种疫苗及...
- 刘霓红蔡红李成
- 关键词：狂犬病病毒免疫原性毒株形态学
- 文献传递
- 牛呼吸道合胞体病毒核蛋白的表达及其单克隆抗体的制备被引量：4
- 2012年
- 利用牛呼吸道合胞体病毒(BRSV)接种牛肺细胞(BL),提取病毒RNA。通过RT-PCR扩增BRSV的核蛋白基因,然后定向克隆到原核表达载体pET30a,获得重组表达质粒pET30a-N。将重组质粒转化表达菌BL21(DE3),经增菌培养和IPTG诱导以及SDS-PAGE和Western blot分析,成功表达出了核蛋白(N),其分子量约为49kDa。为制备BRSV核蛋白的单克隆抗体,用纯化的重组核蛋白免疫BALB/c小鼠,取免疫鼠脾细胞与SP2/0细胞融合。采用以BRSV为检测抗原的间接ELISA筛选阳性细胞克隆,经3次克隆纯化后获得2株稳定分泌抗N特异性MAb的杂交瘤细胞株,分别命名为2D12与4B10。用2D12与4B10杂交瘤细胞株接种BALB/c小鼠制备腹水,采用rN及BRSV包被的ELISA测得的效价分别是1×105和1×106及1×102和1×103。间接ELISA、Western blot、IFA试验表明两株杂交瘤细胞所分泌的MAb具有良好的反应性和特异性。经抗体亚类鉴定D12与4B10均为IgG1/κ。特异性试验表明单抗2D12与4B10均不与牛副流感病毒3型和牛病毒性腹泻病毒反应。所制备的D12与4B10可用于建立检测BRSV病原及抗体的诊断方法。
- 马磊朱远茂蔡红王姝史鸿飞吕闯董秀梅高欲燃薛飞
- 牛病毒性腹泻病毒E0蛋白的表达与多克隆抗体制备被引量：4
- 2014年
- 为了制备BVDV的E0蛋白兔源多克隆抗体,试验采用大肠杆菌对E0蛋白进行了表达,根据已发表的BVDV的VEDEVAC株的全基因组序列设计1对扩增E0的引物,经RT-PCR扩增出长约680 bp的E0基因片段,然后将目的基因克隆到pET-30a载体上,经酶切鉴定获得阳性重组质粒后进行测序,再将测序正确的阳性重组质粒转化BL21表达菌,经扩大培养及IPTG诱导后获得以包涵体形式存在的重组E0蛋白,经亲和层析法纯化后进行Western-blot检测,同时以纯化的E0蛋白免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体,并对E0多克隆抗体进行了中和试验和免疫荧光检测。结果表明:E0蛋白具有良好的反应性;E0多克隆抗体的病毒中和试验测定其中和抗体效价达到1∶128,具有良好的反应性和特异性。说明制备的重组E0蛋白多克隆抗体可以用于BVDV的检测。
- 王雪枝朱远茂史鸿飞严昊蔡红王姝马磊薛飞
- 关键词：牛病毒性腹泻病毒多克隆抗体IFA
- 一株3型牛腺病毒的分离与鉴定被引量：10
- 2011年
- 本研究于2009年由患急性呼吸道疾病牛的鼻拭子中分离获得一株病毒,经形态特征、血清学试验及PCR鉴定表明,该病毒与牛腺病毒3型(BAV-3)相似。对其E2A基因进行序列测定,并与GenBank中登录的BAV1型、3型、4型及人、绵羊、鼠等其它种属来源的腺病毒E2A基因序列进行比对及系统进化分析,结果显示该分离株与BAV-3的同源性为95.5%。经MEGA4软件分析,分离株与BAV-3验证值为100,表明其为BAV-3,并命名为BAV-3HLJ0955株。对该分离株热敏感试验表明,BAV-3 HLJ0955在56℃ 30min可被完全灭活,属于BAV第一群。这是国内首次分离获得BAV-3的报道。
- 于作朱远茂蔡红高欲燃董秀梅吕闯薛飞
- 应用电镜技术检测动物病毒被引量：1
- 2008年
- 目前，动物病毒病越来越多，无论对人或畜禽都构成了很大的威胁。为了迅速控制和扑灭这些疾病，必须尽快地确定病原。确定病原，尤其对新发生的疫病来说是至关重要。常使用方法是血清学检测、生物学接种及病原分离等。就血清学而言，因为是新发生的疫病，手中不一定具备与该疫病相对应的血清（抗体），因此就不能马上进行检测。以上这些方法需要时间和大量的人力物力。
- 蔡红李敏
- 关键词：动物病毒血清学检测电镜病原分离病毒病
- 用扫描和透射电镜对肠毒性大肠杆菌定居状态的观察
- 谷守林郭宝清蔡红李成
- 文献传递
- 我国牛副流感病毒3型山东分离株的研究
- 近年来牛呼吸道疾病综合征严重威胁着我国养牛业的发展,造成很大的经济损失。牛副流感病毒3型是引起牛呼吸道疾病综合征的主要病毒性病原之一。本实验室从我国山东省采集的牛鼻腔棉拭子中分离出4株牛副流感病毒3型,开展了病毒分离鉴定...
- 朱远茂薛飞蔡红董秀梅吕闯史鸿飞严昊马磊王姝王雪枝
- 关键词：全基因组
- 文献传递
- 鸡传染性支气管炎病毒国内分离株核蛋白基因的克隆与序列分析被引量：6
- 2002年
- 本研究参考已发表的鸡传染性支气管炎病毒核蛋白基因序列 ,设计了一对核蛋白基因的特异性引物NP5、6 ,经RT_PCR扩增得到了IBV国内分离株DB株、XJ株、DC株、HD株的 1199bp的核蛋白基因片段 ,并进行了克隆和序列测定。将 4个国内分离株核蛋白基因的序列与国外发表的参考毒株的核蛋白基因序列进行了比较和分析 ,结果显示这 4个毒株与澳大利亚群的参考毒株亲缘关系最为密切 ,核苷酸序列同源性为 86 %～ 91%。其中DC株发生了较大程度的变异。国内分离株核蛋白基因核苷酸的变异引起了蛋白质二级结构的部分改变。
- 高磊刘胜旺谷守林孔宪刚蔡红
- 关键词：传染性支气管炎病毒核蛋白鸡病毒
