薛飞
- 作品数：97 被引量：286H指数：10
- 供职机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 3株牛病毒性腹泻病毒的分离鉴定及其基因分型被引量：13
- 2019年
- 为确定牛呼吸道传染病的病原以及牛病毒性腹泻病毒(BVDV)在临床健康牛群中是否存在持续性感染,本研究采集了内蒙古自治区和黑龙江省两个牛场牛鼻拭子46份及肺脏样品8份,采用MDBK细胞进行病毒分离培养,经BVDV特异性引物RT-PCR检测有3份样品为阳性。利用间接免疫荧光检测3株阳性样品,可以观察到特异性荧光,表明分离得到3株BVDV,分别命名为480、A0583和Lung-6。进一步研究显示480、A0583和Lung-6均为非致细胞病变型。对3株分离病毒的5'端非编码区和Npro基因进化树分析显示3株病毒均属于BVDV1型,其中480株属于BVDV1c亚型,A0583株和Lung-6株同属于BVDV1m亚型。本研究首次在国内同一个牛场分离到BVDV1m(A0583)和BVDV1c(480)两个基因亚型。本研究为我国BVDV-1型不同基因亚型的抗原关系分析及BVDV疫苗的研制奠定了基础。
- 向文杰林俊宋文凤李德栋薛飞朱远茂
- 关键词：牛病毒性腹泻病毒基因分型
- 马传染性贫血琼扩抗原生产工艺的改进被引量：2
- 2005年
- 赵立平许井君朱远茂相文华薛飞杨建德王晓钧吕晓玲木拉提沈荣显
- 关键词：传染性贫血琼扩抗原生产工艺传染性贫血病毒
- 马流感病毒(A/equine/Qinghai/1/94)核蛋白基因的序列测定及同源性分析被引量：4
- 2003年
- 根据已发表的马流感病毒核蛋白基因序列 ,设计并合成一对特异性引物 ,经反转录_聚合酶链反应 (RT_PCR)成功扩增出了我国马流感病毒 (A/Equine/Qinghai/ 1/ 94 )核蛋白基因 ,将该片段连接到PGEM_T_EASY载体并转化DH5α ,提取阳性菌落的质粒经EcRo1酶切和PCR鉴定其大小为 1.5kb左右 ,对其测序并进行分析发现 ,与A/Equine /Kentucky/2 / 86、A/Equine/Miami/ 1/ 6 3等关系较近 ,同源率为 93.3%～_97.4 % ,而与我国马流感吉林A/Equine/Jilin/ 1/ 89株关系较远 ,同源率仅为 84 .6 %。
- 杨建德薛飞王晓钧朱远茂赵立平吕晓玲沈荣显相文华李景鹏
- 关键词：马流感病毒NP基因同源性分析核蛋白基因
- Asia 1型口蹄疫病毒VP1基因的表达鉴定及其多抗制备被引量：3
- 2010年
- 本研究旨在表达口蹄疫病毒(FMDV)的VP1全基因并制备特异性的多克隆抗体。利用PCR方法扩增Asia 1 IND 49197株VP1全基因,将其克隆至原核表达载体pET-30a(+)中,在大肠杆菌BL21中进行表达。SDS-PAGE结果显示表达产物分子量约为31.6ku,以包涵体的形式存在。通过Ni-NTA Purification System纯化后进行western blot和间接ELISA分析,结果显示重组蛋白能够被FMD阳性血清识别,具有良好的反应性。将纯化的重组蛋白免疫新西兰白兔制备多克隆抗体,ELISA测定抗体效价为1∶20480,病毒中和试验测定抗体效价为1∶64。本研究所表达的VP1蛋白可用于开发检测Asia1口蹄疫抗体的诊断试剂,所制备的多克隆抗体为进一步研究VP1的结构、功能以及抗原表位的鉴定提供了条件。
- 朱远茂任宪刚史鸿飞高欲燃于作冯军科相文华薛飞
- 关键词：ASIAVP1基因多克隆抗体
- 绵羊副流感病毒3型PE2019株的分离与鉴定被引量：3
- 2020年
- 为了确定引起绵羊呼吸道传染病的病原,本研究于2019年对一患急性呼吸道疾病死亡绵羊的病料进行了病毒分离,从其胸腔积液中分离到一株绵羊副流感病毒3型(OPIV3),命名为PE2019株。该病毒能够在MDBK细胞上增殖,产生细胞圆缩、集聚成簇等为特征的细胞病变;电子显微镜观察可见OPIV3 PE2019株为直径约300 nm的圆形粒子;经检测该分离株病毒滴度为107.8TCID50/mL。分离株对小鼠和豚鼠的红细胞血凝价均为164,不凝集鸡、兔、绵羊和牛的红细胞。参考山羊副流感病毒3型全基因组序列(MK091103),设计其N和M基因特异性引物,通过RT-PCR可从病毒细胞培养物中扩增到特异性片段,对其进行序列分析,结果显示,分离株N基因序列与山羊、牛和人副流感病毒3型参考株的基因同源性分别为84.0%、82.1%和78.8%,M基因序列与山羊、牛和人副流感病毒3型参考株的基因同源性分别为81.5%、78.4%和77.6%,OPIV3 N和M基因均为独立一个分支。本研究首次于国内分离到OPIV3,为了解国内OPIV3的流行情况及疫苗的研制奠定了基础。
- 朱远茂陈瑞红林俊杨木娇薛飞
- 牛副流感的流行、危害及其防控被引量：9
- 2016年
- 牛副流感（Bovine parainfluenza）是由牛副流感病毒3型（Bovine parainfluenza virus type 3,BPIV3）引起的一种急性接触性传染病,曾被称为“船运热”（Shipping fever）。应激因素如运输、转群、气候变化等容易诱发牛副流感病的局部流行。BPIV3感染牛多表现出精神沉郁、
- 朱远茂马磊杨婷宋文凤薛飞
- 关键词：副流感病毒急性接触性传染病VIRUS应激因素气候变化
- 牛传染性鼻气管炎间接ELISA诊断方法的建立被引量：24
- 2005年
- 以牛肾细胞系(MDBK)培养牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)Bartha Nu/67株,经超速离心纯化病毒,再经超声破碎处理后作为诊断抗原,建立了检测牛血清IBRV抗体的间接酶联免疫吸附试验。该ELISA的判定标准为:血清D490 nm值大于0.369的判为阳性,小于0.295的判为阴性,在0.295与0.369之间的为可疑。特异性和重复性试验结果表明,该方法特异性高、重复性好。与法国进口ELISA抗体诊断试剂盒比较,其符合率为96.3%;与中和试验比较,符合率为95.8%,且敏感性更高。应用该诊断方法调查了我国部分地区IBRV的感染情况,结果显示,这些地区的IBRV感染率为67.1%。
- 朱远茂王海燕薛飞辛九庆赵立平童光志郭巍李兆利相文华
- 关键词：牛传染性鼻气管炎病毒酶联免疫吸附试验
- 马传染性贫血病毒囊膜基因的研究进展
- 2004年
- 马传染性贫血病毒是反转录病毒科慢病毒属的成员之一 ,不仅与人免疫缺陷病毒具有序列同源性 ,而且与其血清具有交叉反应。马传染性贫血驴白细胞弱毒疫苗是迄今为止唯一研究成功的慢病毒疫苗。在马传贫病毒囊膜基因的研究中有助于弄清其抗原变异、持续感染和疫苗免疫机理 ,为艾滋病疫苗的研究提供借鉴。对囊膜基因的结构、变异及其在机体免疫应答中的作用进行了讨论。
- 朱远茂薛飞赵立平相文华
- 关键词：马传染性贫血病毒囊膜基因抗原变异反转录病毒科
- 用绵羊进行性肺炎病毒实验感染山羊的研究
- 1997年
- 用绵羊进行性肺炎病毒（ＯＰＰＶ）接种４只山羊３～４个月后，可观察到接毒山羊都出现了发育迟缓和消瘦现象，并有１只山羊出现了明显的临床病症。而未接毒的对照山羊则发育正常。接毒２８ｄ后，可以从接毒山羊的外周血单核细胞中分离到病毒。病理剖检发现４只接毒山羊中有１只山羊的多种器官出现了较为严重的病变，组织学检查则可看到典型的间质性肺炎、中度的脑炎和较为严重的脾炎的病变。以上的结果表明ＯＰＰＶ可以感染山羊，并对山羊有较强的致病性。因此将来用山羊培育ＯＰＰＶ强毒是可能的，并且这是研制ＯＰＰＶ减毒疫苗最为关键的一步。
- 薛飞相文华褚桂芳沈荣显
- 关键词：绵羊进行性肺炎病毒山羊羊病
- 牛呼吸道疾病综合征的防治被引量：3
- 2009年
- 薛飞 博士／研究员／博士生导师，中国农业科学院哈尔滨兽医研究所牛呼吸道病研究组负责人，主要从事牛病毒性呼吸道疾病防制技术的研究。欢迎广大基层养牛场及临床兽医技术人员来电、来函进行牛呼吸道疾病的技术咨询。
- 薛飞
- 关键词：呼吸道疾病综合征临床兽医牛病博士生导师
