沈岚 作品数:26 被引量:62 H指数:4 供职机构: 第四军医大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家杰出青年科学基金 国家重点基础研究发展计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 文化科学 更多>>
PRL-3在前列腺癌组织中的表达及其意义 被引量:8 2010年 目的:研究蛋白酪氨酸磷酸酶PRL-3在前列腺癌及前列腺癌旁增生组织中的表达及其与临床病理特征和生物学行为的关系。方法:采用免疫组织化学S-P法检测60例前列腺石蜡包埋组织中PRL-3的表达情况,其中前列腺增生组织12例,前列腺癌组织48例,均为存档石蜡切片。并应用χ2检验方法分析PRL-3在前列腺癌组织中表达的意义与临床病理特征之间的关系。结果:免疫组化结果显示PRL-3表达定位于前列腺癌组织的细胞浆,癌组织与癌旁增生组织的阳性率为分别为79.2%和25.0%(P<0.05),癌组织中PRL-3的表达明显高于癌旁增生组织。PRL-3表达水平在不同年龄段、有无家族史之间差异无显著性(P>0.05),在不同Gleason评分之间差异有显著性(P<0.05),在不同临床TNM分期之间差异无显著性(P>0.05),在血清PSA浓度≤20ng/mL与PSA浓度>20ng/mL组间差异无显著性(P>0.05)。结论:PRL-3的表达与前列腺癌发生发展机制关系较密切,PRL-3蛋白可作为前列腺癌诊断、治疗及预后判断过程中的一种较有价值的病理学指标。 赵易 武国军 张瑞 沈岚 于垂恭 王映梅 药立波 袁建林关键词:前列腺肿瘤 PRL-3基因 良性前列腺增生 免疫组织化学 临床医学八年制生物化学教学的体会 被引量:1 2009年 八年制医学教育旨在培养高层次、高素质的医学人才。通过对生物化学八年制教学的总结,从教学形式,教学内容和教学大纲各方面进行探讨,以增强教学效果,提高八年制医学生的培养质量,适应现代社会对医学人才的需求。 沈岚 刘新平 药立波关键词:生物化学 教学改革 OS-9基因的融合表达、纯化及多克隆抗体制备 被引量:14 2003年 OS 9基因广泛表达于人体多种组织 ,该基因的表达产物可能与肿瘤的发生相关 .为获得可溶性表达的OS 9蛋白 ,制备多克隆抗体 ,深入了解OS 9基因的功能 ,将OS 9基因片段克隆入组氨酸标签融合的表达载体pET2 8a中 ,IPTG诱导 ,利用金属螯合亲和层析 (MCAC)进行纯化 ,薄层扫描及Bradford法检测纯化蛋白的纯度与含量 .免疫家兔制备多克隆抗体 ,利用间接ELISA法检测抗体效价 ,Western印迹检测抗体特异性 .经表达形式分析证明 ,融合蛋白大部分可溶 .薄层扫描分析纯度可达 90 %以上 ,Bradford法检测蛋白浓度约 0 1mg ml.抗血清效价可达 1∶32 0 0以上 ,Western印迹检测证明抗体特异性良好 .经诱导表达及纯化制备出可溶的纯度较高的OS 9蛋白产物 。 韩月恒 张文红 沈岚 季少平 刘新平 药立波关键词:纯化 多克隆抗体 肿瘤 抑癌基因NDRG2对人结肠癌细胞系Caco-2增殖的影响 被引量:2 2013年 目的:采用重组慢病毒系统,在过表达和抑制NDRG2(N-myc downstream regulated gene 2)基因后,检测人结肠癌细胞系Caco-2的增殖情况。方法:分别采用NDRG2过表达慢病毒载体pLenti6-NDRG2和NDRG2干涉慢病毒载体pLKO.1-shNDRG2制备病毒并感染Caco-2细胞,经14天耐药的筛选,获得稳定感染的细胞株;采用Real time RT-PCR和Western blot方法明确NDRG2在稳转细胞株中的表达情况,同时采用MTT方法检测细胞的增殖能力,通过流式细胞仪检测细胞周期变化情况。结果:Real time RT-PCR和Western blot结果表明,在慢病毒pLenti6-NDRG2稳定感染的Caco-2细胞中,NDRG2表达上调;pLKO.1-shNDRG2稳定感染的Caco-2细胞中,NDRG2的表达下调。MTT实验结果表明,NDRG2过表达细胞株中细胞的增殖能力下降,而pLKO.1-shNDRG2慢病毒感染Caco-2后细胞的增殖能力明显增加;流式细胞术结果显示,过表达NDRG2使Caco-2细胞在G0/G1期细胞增多而S期的细胞减少,抑制细胞内源性NDRG2后G0/G1期细胞减少而S期细胞增多。结论:通过过表达和抑制NDRG2基因,验证了NDRG2作为抑癌候选基因能够有效抑制结肠癌细胞Caco-2的增殖。 李剑英 吴琳 徐欣元 张健 沈岚关键词:NDRG2 慢病毒 增殖 肿瘤代谢重编程中的癌基因与抑癌基因 被引量:3 2016年 目前对肿瘤特有的代谢模式的认识日益广泛深入,尤其是肿瘤细胞代谢重编程的过程和机制受到关注。癌基因与抑癌基因在影响肿瘤发生发展的过程中也不断改变着肿瘤的物质代谢途径和流量,使之适应肿瘤生长需求。本文讨论c-MYC、TP53、HIF-1α等癌基因或抑癌基因及其相关通路在肿瘤代谢重编程中的作用。 徐欣元 沈岚 药立波关键词:肿瘤 癌基因 抑癌基因 蛋白激酶B的PH结构域可溶性表达与纯化及其二级结构分析 被引量:2 2003年 The serine/threonine protein kinase B(PKB) is related to cellular survival and regulation. PKB is composed of PH domain, catalytic domain and carboxyl terminal regulator domain. The PH domain of PKB is crucial to the activation of kinase. In order to investigate the function and the structure function relationship of PKB, the cDNA coding fragment of PKB PH domain was amplified from human dental pulp mRNA by RT PCR and cloned into pMD18 T vector to analyze the sequence. The result showed that DNA sequence of cloned human PKB PH domain was consistent with that reported previously. To express PKB PH domain, the cDNA was subcloned into expression vector pRSET A which was then transformed into E.coli BL21(DE3) pLysS, and the strain highly expressing soluble 6His PKB PH domain in minimal medium was obtained. The fusion protein was purified by Ni 2+ NTA agarose beads. The secondary structure of the purified 6His PKB PH domain fusion protein was analysed by circular dichroism. The results indicated that the PH domain was composed of α helix 1 7%,β pleated sheet 80 5% and radom coli 17 8%. 沈岚 季少平 刘新平 王吉村 王立峰 苏金 药立波关键词:蛋白激酶B PH结构域 可溶性表达 纯化 胰腺疾病组织N—myc下游调节基因2的表达与分布 2013年 分离胰岛细胞增生症患者、胰岛素瘤患者、胰尾高中分化腺癌患者和正常人胰腺组织,制成石蜡切片,用抗N-myc下游调节基因2(Ndrg2)单克隆抗体进行免疫组织化学染色(ABC法),用Western印迹法检测Ndrg2的表达与分布情况。结果显示,Ndrg2阳性反应物主要分布在胰岛细胞的胞浆,与胰岛素的阳性反应物分布与定位相似;胰岛细胞增生症患者胰岛数量增加,体积增大,且该疾病患者胰腺中Ndrg2表达增加;Western印迹实验结果显示胰岛细胞增生症患者胰腺组织中Ndrg2蛋白的表达量较正常组增高。提示Ndrg2基因可能在胰岛细胞中发挥重要的生理功能。 贺菲菲 焦凯 刘新平 沈岚关键词:胰岛细胞 胰岛素 免疫组织化学 提高医学生物化学教学质量的体会 2012年 通过对生物化学教学工作进行总结,采用以问题为导向的PBL教学方法、多媒体的教学手段、生物化学与分子生物学前沿进展的介绍等多种教学手段和方式,激发学生的学习兴趣,培养学生思考和解决问题的能力,丰富学生的专业知识并开阔视野,提高医学生物化学的教学质量,从而适应现代社会对高层次医学人才的需求。 沈岚 傅海燕 药立波关键词:医学生物化学 教学方法 教学质量 讨论课教学模式在生物化学教学中的优化 被引量:8 2015年 讨论课是在教师指导下以学生活动为主的教学形式,是第四军医大学生物化学与分子生物学教学的重要组成部分。近年来,适应我校的模块式教学改革需求,我们在以往的实践基础上,对生物化学讨论课的组织实施进行了系统优化,建立了科学合理的衡量标准和考核方式,实行及时有效的教学效果评估与反馈,实现了全面培养与提高学员的综合素质与能力,并充分促进了教学相长。因此,讨论课作为一种课堂教学新模式,是培养学员思维能力和综合素质、提高教学效果的有效方法和手段,值得进一步完善和推广。 李霞 王立锋 赵晶 张健 沈岚 贾林涛 药立波关键词:生物化学 讨论课 教学模式 应用组织芯片技术研究抑癌候选基因NDRG2在淋巴瘤组织中的表达及其意义 2009年 目的:应用组织芯片技术分析抑癌候选基因NDRG2在人类淋巴瘤组织、淋巴结正常组织及淋巴结良性病变组织中的表达情况。方法:采用小鼠抗NDRG2单克隆抗体的免疫组织化学ABC法,研究NDRG2在不同淋巴结组织的表达,并分析NDRG2在不同淋巴结组织中的表达差异。结果:免疫组化结果显示,淋巴瘤组织与淋巴结良性病变组织中DNRG2的表达相比呈显著性差异(P<0.05),淋巴瘤组织与正常淋巴结组织中DNRG2的表达相比呈显著性差异(P<0.05)。淋巴结良性病变组织与正常淋巴结组织中DNRG2的表达相比呈显著性差异(P<0.05)。正常淋巴结,淋巴结良性病变及淋巴瘤组织中NDRG2的阳性表达率分别为92.5%(37/40)、67.5%(27/40)和18.51%(15/81),3者间比较,差异有统计学意义。结论:NDRG2在淋巴瘤组织中呈低表达,提示其可能对淋巴瘤的发生或发展有重要作用,这不仅为研究淋巴瘤的发病机制进一步提供了线索,而且对淋巴瘤的诊断和治疗具有重要意义。 杨怡 刘文超 沈岚 付强 宋爱玲 何芸 刘新平关键词:NDRG2 淋巴瘤